楊愛萍

(青海紅十字醫(yī)院，西寧810000)

子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9表達變化及其意義

楊愛萍

(青海紅十字醫(yī)院，西寧810000)

目的探討子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9 mRNA表達變化及其臨床意義。方法選擇子宮內(nèi)膜癌患者120例(子宮內(nèi)膜癌組)、子宮內(nèi)膜不典型增生患者63例(不典型增生組)、子宮肌瘤患者70例(子宮肌瘤組)，分別取手術(shù)切除的子宮內(nèi)膜癌組織、子宮內(nèi)膜不典型增生組織、正常子宮內(nèi)膜組織，采用qRT- PCR法檢測各子宮內(nèi)膜組織Septin- 9 mRNA表達。同時分析子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果子宮內(nèi)膜癌組、不典型增生組、子宮肌瘤組Septin- 9 mRNA相對表達量分別為1.98±0.51、1.64±0.23、1.00±0.00，組間兩兩比較P均<0.05。子宮內(nèi)膜癌組Septin- 9 mRNA表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肌層浸潤和FIGO分期有關(guān)(P均<0.05)，與患者年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、病理類型及病理分級無關(guān)(P均>0.05)。以子宮內(nèi)膜癌組Septin- 9 mRNA相對表達量的下四分位數(shù)為界值，將子宮內(nèi)膜癌患者分為Septin- 9 mRNA低表達者和Septin- 9 mRNA高表達者。Septin- 9 mRNA高表達者術(shù)后5年生存率及總生存時間均低于Septin- 9 mRNA低表達者(P均<0.05)。結(jié)論子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9 mRNA表達升高，其表達變化可能有助于子宮內(nèi)膜癌診斷、病情評估及預(yù)后預(yù)測。

子宮內(nèi)膜癌；Septin- 9；實時熒光定量PCR；臨床病理特征；預(yù)后

子宮內(nèi)膜癌是女性常見的三大惡性腫瘤之一，占女性生殖道惡性腫瘤的20%～30%，近年來其發(fā)病率有升高趨勢[1]。Septin- 9蛋白是細胞骨架GTP結(jié)合蛋白家族的重要成員之一，廣泛存在于真核生物中，與細胞骨架重構(gòu)、囊泡運輸以及細胞質(zhì)分裂等多種生理過程密切相關(guān)[2]。近年研究表明，Septin- 9可參與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，如乳腺癌[3]、直腸癌[4]、胃癌[5]等。但Septin- 9與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系鮮有報道[6]。本研究分析子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9表達變化及其與患者臨床病理參數(shù)和預(yù)后的關(guān)系?，F(xiàn)分析結(jié)果并報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 研究對象為2008年1月～2012年1月在青海紅十字醫(yī)院行手術(shù)收治的子宮疾病患者253例，其病例資料完整。其中，子宮內(nèi)膜癌患者120例(子宮內(nèi)膜癌組)，年齡38～75(54.98±10.75)歲，術(shù)前未行任何抗腫瘤治療；子宮內(nèi)膜不典型增生患者63例(不典型增生組)，年齡36～72(57.47±13.62)歲；子宮肌瘤患者70例(子宮肌瘤組)，年齡36～80(53.54±12.17)歲。所有患者經(jīng)術(shù)后組織病理檢查明確診斷。三組年齡具有可比性。本研究經(jīng)青海紅十字醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準，患者均知情同意。

1.2 子宮內(nèi)膜組織Septin- 9 mRNA表達檢測 采用qRT- PCR法。取三組手術(shù)切除的子宮內(nèi)膜組織，采用TRIzol抽提試劑盒提取組織總RNA，紫外分光光度計檢測總RNA濃度和純度，采用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒將總RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，然后進行PCR擴增。引物序列由上海英駿生物技術(shù)有限公司設(shè)計合成。引物序列：Septin- 9上游引物：5′- CAGAGCGGCTTGGGTAAATCC- 3′，下游引物： 5′- CTCCTCAATATCGTGC-GTGATGG- 3′；GAPDH上游引物：5′- ACAACTTTGGTATCGTGGAAGG- 3′，下游引物：5′- GCCATCACGCCACAGTTTC- 3′。PCR反應(yīng)體系共20 μL，反應(yīng)條件：50 ℃孵育2 min，95 ℃ Taq酶活化10 min，95 ℃ 15 s、60 ℃ 1 min共40個循環(huán)。所有操作在熒光定量PCR擴增儀(ABI PRISM? 7300，美國ABI公司)上進行。以GAPDH為內(nèi)參，采用2-ΔΔCt法計算Septin- 9 mRNA相對表達量。

1.3 子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者臨床病理參數(shù)關(guān)系分析 收集子宮內(nèi)膜癌患者臨床病理參數(shù)，包括年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、組織學(xué)類型、病理分級、FIGO分期、肌層浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等，分析子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系。

1.4 子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者預(yù)后關(guān)系分析 收集子宮內(nèi)膜癌患者隨訪資料。以子宮內(nèi)膜癌患者Septin- 9 mRNA相對表達量的下四分位數(shù)為界值，將子宮內(nèi)膜癌組分為Septin- 9 mRNA低表達者(Septin- 9 mRNA相對表達量低于下四分位數(shù))和Septin- 9 mRNA高表達者(Septin- 9 mRNA相對表達量等于或高于下四分位數(shù))，繪制其Kaplan- Meier生存曲線，比較其術(shù)后5年生存率和總生存時間。

2 結(jié)果

2.1 各組Septin- 9 mRNA相對表達量比較 子宮內(nèi)膜癌組、不典型增生組、子宮肌瘤組Septin- 9 mRNA相對表達量分別為1.98±0.51、1.64±0.23、1.00±0.00，組間兩兩比較P均<0.05。

2.2 子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系 子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肌層浸潤和FIGO分期有關(guān)(P均<0.05)，與患者年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、組織學(xué)類型及病理分級無關(guān)(P均>0.05)。見表1。

表1 子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9 mRNA表達 與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3 子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9表達與患者預(yù)后的關(guān)系 隨訪3～60個月，子宮內(nèi)膜癌組死亡78例。Septin- 9 mRNA高表達者與Septin- 9 mRNA低表達者術(shù)后5年生存率分別為18.75%(12/64)、53.57%(30/56)，總生存時間分別為(33.67±2.59)、(50.55±2.35)個月，Septin- 9 mRNA高表達者術(shù)后5年生存率及總生存時間均低于Septin- 9 mRNA低表達者(P均<0.05)。

3 討論

子宮內(nèi)膜癌屬于上皮性惡性腫瘤，以來源于子宮內(nèi)膜腺體的腺癌最常見，是女性生殖系統(tǒng)的三大惡性腫瘤之一，其病因迄今尚不明確[7]。手術(shù)聯(lián)合放化療為目前子宮內(nèi)膜癌的首選治療方法[8]，但患者預(yù)后并不樂觀。故尋求新的治療和預(yù)測預(yù)后的靶標是臨床研究的熱點[9]。

Septin- 9基因是Septin- 9蛋白的編碼基因，位于染色體17q25.3，其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可產(chǎn)生18種變異剪切體，編碼15種多肽[10]。Septin- 9變異剪切體之間具有一定的核苷酸相似性和氨基酸一致性[11]，且他們的分布具有組織特異性，如Septin- 9 v1分布于除腦和胸腺外的組織[12]，Septin- 9 v2、Septin- 9 v3、Septin- 9 v4多在胎兒組織中表達[13]。Scholz等[14]研究證實，siRNA技術(shù)干擾Septin- 9表達可使細胞分裂不完整；Fukushige等[15]研究表明，Septin- 9異常表達可導(dǎo)致細胞極性丟失，從而使細胞癌變的發(fā)生風(fēng)險增加。

本研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜癌組Septin- 9 mRNA表達顯著高于不典型增生組和子宮肌瘤組，且不典型增生組Septin- 9 mRNA相對表達量顯著高于子宮肌瘤組。提示隨著正常子宮內(nèi)膜組織向子宮內(nèi)膜癌組織進展，Septin- 9 mRNA表達逐漸升高，Septin- 9在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展過程中可能具有癌基因作用。本研究還發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9 mRNA表達與患者年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、組織學(xué)類型和病理分級無關(guān)，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肌層浸潤和FIGO分期有關(guān)，且存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肌層浸潤深、FIGO分期高的子宮內(nèi)膜癌患者Septin- 9 mRNA表達相對較高，提示Septin- 9可能與子宮內(nèi)膜癌的侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)，檢測癌組織Septin- 9 mRNA表達有助于判斷病情。林春燕等[16]研究發(fā)現(xiàn)，Septin- 9能夠抑制HIF- 1α蛋白降解，增加血管內(nèi)皮生長因子的表達，從而促進腫瘤血管形成。這可能是Septin- 9參與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展的具體機制。

本研究結(jié)果顯示，Septin- 9 mRNA高表達者總生存時間較Septin- 9 mRNA低表達者明顯縮短，術(shù)后5年生存率亦明顯降低。提示子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9 mRNA表達變化可影響患者預(yù)后，Septin- 9 mRNA高表達提示患者預(yù)后不良；檢測子宮內(nèi)膜癌組織Septin- 9 mRNA表達將有助于評估子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后。

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