酶法在中藥提取中的研究進(jìn)展

張宏梅，崔佰吉

（吉林醫(yī)藥學(xué)院，吉林 吉林 132013）

酶法在中藥提取中的研究進(jìn)展

張宏梅，崔佰吉

（吉林醫(yī)藥學(xué)院，吉林 吉林 132013）

酶法是一種生物藥物分析方法，在中藥提取中，應(yīng)用酶法有一定的優(yōu)勢(shì)，相關(guān)研究是目前醫(yī)學(xué)界的重點(diǎn)課題之一?；诖?，本文試分析酶法在中藥提取中的研究進(jìn)展，給出該方法的優(yōu)缺點(diǎn)以及應(yīng)用實(shí)例、方法等，旨在通過分析明晰相關(guān)狀況，完善對(duì)應(yīng)理論，并為后續(xù)具體工作的開展提供必要的參考和支持。

酶法；中藥提??；果膠酶

酶是一種專一性強(qiáng)、催化效率高的生物催化劑。這是其能應(yīng)用于中藥提取的基礎(chǔ)優(yōu)勢(shì)，酶法與其他分析方法相比有許多獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)待測(cè)樣品中含有結(jié)構(gòu)和性質(zhì)與待測(cè)物十分相似的共存物時(shí)，要找到被測(cè)物特有的特征性質(zhì)或者要將被測(cè)物分離純化出來，往往非常困難，應(yīng)用酶法可以相對(duì)有效的進(jìn)行提取，分析酶法在中藥提取中的研究進(jìn)展，對(duì)后續(xù)工作有一定的積極意義。

1 酶法原理

酶法能夠應(yīng)用于中藥提取，核心原理是利用其較強(qiáng)的催化作用破壞植物細(xì)胞的纖維素、細(xì)胞壁等致密結(jié)構(gòu)，使有效成分溶出，其本質(zhì)是利用酶解反應(yīng)加快生物反應(yīng)的過程。

一般來說，大部分中藥材（植物藥材）中能夠用于疾病治療的有效成分不是單獨(dú)存在的，這也是需要對(duì)中藥材進(jìn)行炮制的原因，酶法與炮制是不同的工藝，能夠更有效的分離中藥材中的有效成分。現(xiàn)有研究表明，中藥材的有效成分在被分離的過程中，往往需要破除細(xì)胞壁的阻礙，但細(xì)胞壁以及細(xì)胞間質(zhì)中的半纖維素、果膠質(zhì)、纖維素等會(huì)形成較為致密的結(jié)果，常規(guī)情況下，有效成分很難快速的溶出，導(dǎo)致提取困難，使用酶法，生物反應(yīng)的速度大大加快，植物致密組織通過快速反應(yīng)而失去效能，有效成分得以溶出。這是酶法的基本原理。

2 酶法的工藝

酶法的工藝由于遠(yuǎn)離的通用性而帶有一致特征，分析主要可以從兩個(gè)方面著手，一是各類參數(shù)的具體影響，二是提取液的制備。各類參數(shù)包括pH值、溫度、酶的濃度及酶解作用的時(shí)間等，這些參數(shù)影響反應(yīng)的成效、提取液的選擇和精制。

提取液的制備同樣需要重視，傳統(tǒng)模式下制備提取液雖然也能夠?qū)崿F(xiàn)精處理，但制備的周期較長，而且成本高、工藝條件復(fù)雜，無法大規(guī)模應(yīng)用。在現(xiàn)代科技不斷發(fā)展的情況下，人員發(fā)現(xiàn)應(yīng)用電導(dǎo)率測(cè)試法可以了解傳質(zhì)規(guī)律，優(yōu)化提取液的制備工藝。其核心是膜法超濾技術(shù)，該技術(shù)是對(duì)絮凝技術(shù)、生物酶工程技術(shù)、大網(wǎng)格組合大孔吸附樹脂技術(shù)、膜分離技術(shù)的融合，能夠?qū)崿F(xiàn)以傳質(zhì)規(guī)律為基礎(chǔ)、約束條件為輔助的產(chǎn)業(yè)化、大規(guī)模提取液制備，使酶法中藥提取的工藝大為強(qiáng)化。

3 酶法的優(yōu)勢(shì)與不足

3.1 酶法的優(yōu)勢(shì)

酶法的優(yōu)勢(shì)眾多，基本優(yōu)勢(shì)包括快速、精準(zhǔn)、簡便、靈敏等，此外，其可以應(yīng)用于復(fù)雜環(huán)境而且無污染，這是酶法得到大規(guī)模應(yīng)用和推廣的核心優(yōu)勢(shì)。如果被測(cè)目標(biāo)是固定的，在選擇酶時(shí)，可以針對(duì)其特色進(jìn)行挑選，不必進(jìn)行預(yù)處理，即便被測(cè)物質(zhì)成分復(fù)雜也不會(huì)產(chǎn)生過多影響。這是由于目標(biāo)物質(zhì)理化性質(zhì)與目標(biāo)酶帶有一定的適應(yīng)性，酶的特異性意味著其在影響被測(cè)目標(biāo)的同時(shí)，不會(huì)影響其他物質(zhì)，因此能滿足復(fù)雜環(huán)境的應(yīng)用[1]。酶法的污染在各類中藥提取、分析工作中也是相對(duì)較小的，一些需要應(yīng)用化學(xué)試劑、色譜分析器材的工作，可以應(yīng)用酶法替代，酶法反應(yīng)條件溫和，由于其本身就屬于催化劑，無需額外使用酸堿材料，因此污染被降至較低的水平。以上均是酶法的優(yōu)勢(shì)。

3.2 酶法的不足

酶法的不足主要體現(xiàn)在兩個(gè)方面，一是必須嚴(yán)格控制反應(yīng)參數(shù)，二是酶法可能產(chǎn)生一些不利作用。為使酶的活性提高到最大值，必須嚴(yán)格控制酶反應(yīng)時(shí)的溫度及pH值，反應(yīng)條件的微小波動(dòng)，都可能使酶的活性大大降低，因此對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備有較高的要求。如姜黃素的提取，溫度條件變化幅值超過5%，產(chǎn)率將下降8%以上，酸堿度變化超過10%，也會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)率下降6%～7%。

酶法提取的過程中，中藥中的某些成分可能受到酶的影響發(fā)生改變，導(dǎo)致產(chǎn)物的純度降低。如黃芩苷提取的研究，經(jīng)纖維素酶進(jìn)行酶解后，黃芩苷收率反而下降，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)纖維素酶在提取黃芩苷的過程中，會(huì)產(chǎn)生水解作用。這也是酶法提取技術(shù)的不足之處[2]。

4 酶法的應(yīng)用實(shí)例

以蒲黃花粉的酶法破壁為例，人員經(jīng)過反復(fù)研究，發(fā)現(xiàn)果膠酶和纖維素酶的混合酶能夠起到最佳破壁效果，二者最佳比例為：1∶0.4，反應(yīng)溫度方面，應(yīng)控制在42.5℃～46.5℃之間，酶解時(shí)間則不得低于230 min，上述參數(shù)條件下，蒲黃花粉的提取率可以提升至85.97%以上。又比如香菇多糖的提取，參數(shù)為：纖維素酶0.5%，木瓜蛋白酶2.0%，果膠酶1.0%，溫度50℃，pH為4.0，效果最佳。姜黃素的提取中，各參數(shù)應(yīng)確定為：pH值取4.5；溫度50℃；酶的濃度（混合濃度）應(yīng)為0.35 mg·mL-1，酶解作用的時(shí)間應(yīng)為120 min，該標(biāo)準(zhǔn)下，可以提升收率大約8%。

通過分析酶法在中藥提取中的研究進(jìn)展，了解了相關(guān)基本內(nèi)容。目前來看，酶法應(yīng)用于重要提取的基本原理是利用酶解反應(yīng)加快生物反應(yīng)的過程。其工藝核心是參數(shù)設(shè)定和提取液制備。該方法的優(yōu)劣勢(shì)同樣明顯，具體應(yīng)用時(shí)也應(yīng)加以注意。文章最后給出的部分應(yīng)用實(shí)例可用于實(shí)際工作。后續(xù)工作中，對(duì)上述原理的應(yīng)用也有助于在中藥提取中應(yīng)用酶法。

[1] 李慧婷,伍振峰,李遠(yuǎn)輝.浸提輔助劑在中藥提取中的應(yīng)用及研究進(jìn)展[J/OL].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2017,(09):1-7.

[2] 章懷云,毛紹名,孫漢洲.天然產(chǎn)物活性成分提取分離研究進(jìn)展[J/OL].經(jīng)濟(jì)林研究,2017,(03):244-250.

Research progress of enzymatic extraction in traditional Chinese Medicine

ZHANG Hong-mei, CUI Bai-ji
(Jilin Medical College, Jilin Jilin 132013, China)

R284

B

ISSN.2095-8242.2017.070.13859.02

本文編輯：劉欣悅

《臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)雜志》繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育培訓(xùn)試題

答題即可申請(qǐng)繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育學(xué)分（Ⅱ類5分）

以下每一道題下面有A、B、C、D、E五個(gè)備選答案，請(qǐng)從中選擇一個(gè)最佳答案，在答題卡處做答。

1．不宜用激素類藥物的疾病是（ ）

A、白血病 B、水痘

C、哮喘 D、嚴(yán)重感染 E、腎病綜合癥

2．高膽紅素血癥的患兒需光照療法時(shí)應(yīng)（ ）

A、裸體 B、穿單衣、包尿布

C、裸體、包尿布、戴眼罩 D、穿單衣、包尿布、戴眼罩 E、裸體、戴眼罩

3．新生兒硬腫癥首要的護(hù)理措施是（ ）

A、激素 B、輸液

C、復(fù)溫 D、抗生素 E、能量合劑

4．新生兒通過胎盤從母體中獲得的免疫球蛋白是（ ）

A、IgA B、IgG

C、IgM D、IgE E、IgD

5．出生后1天、1個(gè)月、6個(gè)月時(shí)接種的疫苗是（ ）

A、卡介苗 B、乙肝疫苗

C、麻疹疫苗 D、流感疫苗 E、白喉疫苗

6．新生兒胎糞的特點(diǎn)是（ ）

A、褐色、干厚 B、金黃色、糊狀

C、陶土色、軟膏狀 D、淡黃色、水樣便 E、墨綠色、粘稠狀

7．早產(chǎn)兒肝臟功能不全，生理性黃疸的特點(diǎn)為（ ）

A、較足月兒輕，持續(xù)時(shí)間短 B、較足月兒重，持續(xù)時(shí)間長

C、較足月兒輕，持續(xù)時(shí)間長 D、較足月兒重，持續(xù)時(shí)間短 E、與足月兒一致

8．新生兒出生后排出胎便的時(shí)間應(yīng)是（ ）

A、12小時(shí)內(nèi) B、18小時(shí)后

C、24小時(shí)后 D、36小時(shí)后 E、48小時(shí)后

9．下列抑制鐵吸收的食物是（ ）

A、肉末 B、果糖

C、牛奶 D、脂肪酸 E、維生素C

10．服用鐵劑的最佳時(shí)間是（ ）

A、餐前 B、餐后

C、晨起時(shí) D、臨睡前 E、兩餐之間

《臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)雜志》繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育培訓(xùn)試題答題卡

1.A（ ）B（ ）C（ ）D（ ）E（ ） 2.A（ ）B（ ）C（ ）D（ ）E（ ）

3.A（ ）B（ ）C（ ）D（ ）E（ ） 4.A（ ）B（ ）C（ ）D（ ）E（ ）

5.A（ ）B（ ）C（ ）D（ ）E（ ） 6.A（ ）B（ ）C（ ）D（ ）E（ ）

7.A（ ）B（ ）C（ ）D（ ）E（ ） 8.A（ ）B（ ）C（ ）D（ ）E（ ）

9.A（ ）B（ ）C（ ）D（ ）E（ ） 10.A（ ）B（ ）C（ ）D（ ）E（ ）

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