張玉梅

薄層層析法

TLC具有簡單方便、成本低廉的優(yōu)點。TLC法分離樣品后，需要再以呈色劑及或紫外光照射檢視定位作初步鑒定，但因需樣品消耗量大，且無法直接與光譜法連接檢測，結(jié)果僅能定性，難以達到快速定量目的，為其缺點?？衫肨LC法定性檢測果汁中的糖精、醋磺內(nèi)酯鉀和甜精。隨著固相材料及光學(xué)偵測技術(shù)發(fā)達，已可達成定量樣品目標(biāo)。預(yù)先對樣品以C18管柱進行固相萃取，接著以C18薄層片分離的TLC法進行飲料中己二烯酸、苯甲酸定量，其結(jié)果回收率達101%，變異系數(shù)1.8%。以TLC法定量分析飲料中對羥苯甲酸、甲酯、乙酯、丙酯、丁酯防腐劑的含量，選用含熒光劑F254的C18薄層片分離，并于波長260nm進行光密度掃描，檢測結(jié)果變異系數(shù)5.1～8.3%。由上述研究結(jié)果可知，受限于TLC法分辨率，無法同步分析多類型防腐劑及人工甜味劑。

分光光度法

分光光度法分析防腐劑容易有干擾，早期是使用二次反應(yīng)產(chǎn)物的間接測定法。早期建立以蒸氣蒸餾萃取酸化食品樣品中己二烯酸后，加入鉻酸鉀與硫酸混合溶液氧化己二烯酸生成丙二醛，再與硫巴比妥酸作用形成紅色物質(zhì)，并于波長530nm進行分光光度的定量。防腐劑也有相同干擾情況，以分光光度法嘗試直接檢測糖精及糖精鈉含量，但發(fā)現(xiàn)若是樣品中苯甲酸存在時，因糖精及糖精鈉的最大吸收波峰229nm及235nm波峰和苯甲酸的吸收波長225nm重迭，使亮度吸收受到干擾，無法準(zhǔn)確定性、定量。采用直接分光光度測定防腐劑，樣品經(jīng)蒸氣蒸餾萃取后，以分析化合物最大吸收波長測定吸亮度，但若是樣品中同時含有苯甲酸、己二烯酸、去水醋酸，由于己二烯酸的吸收波峰和苯甲酸、去水醋酸吸收波峰有部分重迭，將影響定量結(jié)果。

氣相色譜法

氣相色譜法具有分離效率佳及靈敏度高的優(yōu)點，但分析物必須對熱穩(wěn)定且具揮發(fā)性，才能適用。受限管柱材料，GC法檢測食品中的防腐劑或人工甜味劑甜精，需要個別進行；為避免管柱損傷，樣品通常需要進行復(fù)雜的凈化前處理。近年出現(xiàn)新的高效能萃取技術(shù)，如先以頂空固相微萃取飲料中己二烯酸及苯甲酸，再以GC分析，結(jié)果回收81.2～108.1%，變異系數(shù)7.5%以下，此法顯著降低樣品需求量，以及有效減少有機溶劑使用。固相萃取法吸附-熱脫附的TD- GC法，可以檢測食品中苯甲酸、己二烯酸、對羥苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯等五種防腐劑。

毛細(xì)管電泳法

CE是近年來發(fā)展迅速的分離技術(shù)，具有眾多的分離模式，不需更換管柱適應(yīng)不同類型樣品，且樣品用量極少，分辨率極高以及直接管柱開口行在線光學(xué)偵測等特點。CE分離原理為高壓電場作用下，帶電物質(zhì)在極細(xì)毛細(xì)管（10～

m）內(nèi)電解液中因泳動差異性，加上毛細(xì)管內(nèi)產(chǎn)生的電滲流沖提作用，可同時快速偵測正、負(fù)電荷及中性物質(zhì)。CE法分離防腐劑及人工甜味劑必須要考慮二者的性質(zhì)不同，以選擇適合的緩沖溶液、pH值、電場強度、離子強度等條件，并避免樣品基質(zhì)干擾。CE法的主要缺點是，操作技術(shù)需求高，基線穩(wěn)定及分析物遷移時間再現(xiàn)性較差，再者，因毛細(xì)管內(nèi)徑極小，當(dāng)使用普遍性光學(xué)偵測時，因光徑過短導(dǎo)致靈敏度不佳。

高效液相色譜法

HPLC法具有高選擇性，可用于分析熱不穩(wěn)定與揮發(fā)性低的化合物，分析效果好，易操作，可適用于大部分的化合物分析，成為廣泛應(yīng)用的分析方法。許多學(xué)者提出以HPLC法分析食品中的防腐劑和人工甜味劑等添加物采用甲醇-醋酸（35：36，v/v）緩沖溶液（pH4.4）并以梯度進行沖提，利用C18管柱，在波長254nm下，歷經(jīng)25分鐘可同時分析苯甲酸、己二烯酸、對羥苯甲酸甲酯、丙酯。針對飲料及特殊營養(yǎng)食品，分析其人工甜味劑，透過不同比例乙腈（15%、20%、25%）和磷酸鹽緩沖液為移動相組合，探討分析物最佳的分辨率，結(jié)果得知糖精、醋磺內(nèi)酯鉀和阿斯巴甜，在15%乙腈（v/v）和磷酸鹽緩沖液移動相下分辨率最佳。使用C18管柱，以乙腈和0.1M磷酸鹽緩沖液等度沖提，探討低熱量飲料及果汁飲料中人工甜味劑含量，于210nm下檢測糖精、阿斯巴甜，235nm下檢測醋磺內(nèi)酯鉀。HPLC多重檢驗方法，分析金棗制品中的防腐劑及人工甜味劑，在波長280nm下，利用乙睛和5mM檸檬酸緩沖溶液梯度沖提，于50分鐘內(nèi)同時測得10種添加物（糖精、甘精、苯甲酸、己二烯酸、水楊酸、去水醋酸、對羥苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯、丁酯）。

綜合前述，食品添加物使用液相色譜（LC）、氣相色譜（GC）、薄層層析（TLC）等方法分析，因食品種類繁多、成分復(fù)雜，容易遭受基質(zhì)的干擾，造成定性定量的困擾。另一方面，對不具光學(xué)吸收分析物，就必須衍生化處理，或以其他檢出器替換普遍性應(yīng)用的UV/ VIS檢測器。