劉衛(wèi)榮

(江蘇揚(yáng)農(nóng)化工股份有限公司，江蘇揚(yáng)州 225009)

螺蟲乙酯(spirotetramat)化學(xué)名稱為 4-(乙氧基羰基氧基)-8-甲氧基-3-(2,5-二甲苯基)-1-氮雜螺[4,5]癸-3-烯-2-酮，是德國(guó)拜耳公司開發(fā)的一種季酮酸類殺蟲劑，是一種高效內(nèi)吸且雙向傳導(dǎo)的殺蟲劑，通過干擾昆蟲的脂肪生物合成導(dǎo)致幼蟲死亡[1-2]。啶蟲脒(acetamiprid)化學(xué)名稱為(E)-N-[(6-氯-3-吡啶基)甲基]-N′-氰基-N-甲基乙脒，是日本曹達(dá)株式會(huì)社開發(fā)的一種氯化煙堿類化合物，主要作用于昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)突觸后膜的乙酰膽堿受體及其周圍的神經(jīng)，從而使昆蟲興奮、麻痹而后死亡。藥效試驗(yàn)證明，兩者的復(fù)配制劑 22%螺蟲乙酯·啶蟲脒懸浮劑持效期長(zhǎng)，殺蟲譜擴(kuò)大了，可有效防治農(nóng)作物各種刺吸式口器害蟲如蚜蟲、薊馬、木虱、粉虱和介殼蟲等，應(yīng)用前景廣泛。螺蟲乙酯、啶蟲脒單劑或與其他藥劑復(fù)配制劑的分析方法已有報(bào)道[3-8]，但有關(guān)螺蟲乙酯和啶蟲脒兩者復(fù)配制劑的液相色譜分析方法，目前尚未見公開報(bào)道。本文采用反相高效液相色譜法，使用Diamonsil C18柱和紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，以乙腈+水為流動(dòng)相，在同一色譜條件下用外標(biāo)法對(duì)有效成分進(jìn)行分析和定量。該方法具有操作簡(jiǎn)便，快速，準(zhǔn)確，分離效果好的特點(diǎn)，適用于產(chǎn)品質(zhì)量的檢測(cè)分析。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀：Shimadzu LC-20A，具可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器和自動(dòng)進(jìn)樣器；色譜數(shù)據(jù)處理工作站；色譜柱：250 mm×4.6 mm (i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝Diamonsil C18填充物，粒徑5 μm；超聲波清洗器；微孔過濾膜：0.45 μm有機(jī)膜。

乙腈：色譜純；水：新蒸二次蒸餾水；螺蟲乙酯標(biāo)樣(質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%)、啶蟲脒標(biāo)樣(質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.0%)：江蘇揚(yáng)農(nóng)化工股份有限公司；22%螺蟲乙酯·啶蟲脒懸浮劑試樣：江蘇揚(yáng)農(nóng)化工股份有限公司研制。

1.2 色譜條件

流動(dòng)相：乙腈+水=50+50(體積比)；流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：220 nm；進(jìn)樣體積：2 μL；保留時(shí)間：啶蟲脒約4.3 min，螺蟲乙酯約9.7 min。典型的液相色譜圖見圖1、2。

圖1 螺蟲乙酯、啶蟲脒標(biāo)樣液相色譜圖

圖2 22%螺蟲乙酯·啶蟲脒懸浮劑液相色譜圖

1.3 分析步驟

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制

稱取螺蟲乙酯標(biāo)樣約0.05 g和啶蟲脒標(biāo)樣約0.05 g (精確至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，超聲振蕩使試樣溶解，冷卻至室溫，搖勻。

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取試樣約0.45 g (精確至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，超聲振蕩使試樣溶解，冷卻至室溫，搖勻，用0.45 μm有機(jī)濾膜過濾后備用。

1.3.3 測(cè)定

在上述操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針螺蟲乙酯(啶蟲脒)的峰面積相對(duì)變化小于1.2%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

1.3.4 計(jì)算

將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中螺蟲乙酯(啶蟲脒)峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中螺蟲乙酯(啶蟲脒)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X(%)按下式計(jì)算：

式中：A1為標(biāo)樣溶液中螺蟲乙酯(啶蟲脒)峰面積的平均值；A2為試樣溶液中螺蟲乙酯(啶蟲脒)峰面積的平均值；m1為螺蟲乙酯(啶蟲脒)標(biāo)樣的質(zhì)量(g)；m2為試樣的質(zhì)量(g)；w為標(biāo)樣中螺蟲乙酯(啶蟲脒)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

在190～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)，對(duì)螺蟲乙酯和啶蟲脒標(biāo)樣溶液分別進(jìn)行紫外光譜掃描，得到其相應(yīng)的吸收波長(zhǎng)與響應(yīng)值的紫外吸收光譜圖。當(dāng)選用220 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)時(shí)，螺蟲乙酯和啶蟲脒均有較強(qiáng)吸收峰，2種有效成分在220 nm處的液相色譜圖分離、峰形都很好，響應(yīng)值和峰高比例都較為合適，且無雜質(zhì)干擾，流動(dòng)相無吸收，故選用了220 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.1.2 流動(dòng)相的選擇

試驗(yàn)選擇Diamonsil C18色譜柱，分別試用不同比例的甲醇+水、乙腈+水作為流動(dòng)相對(duì)試樣進(jìn)行分離檢測(cè)。經(jīng)過反復(fù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，用乙腈+水=50+50(體積比)作為流動(dòng)相，流速控制在1.0 mL/min時(shí)，各組分之間能有效分離，無其他組分的干擾，2個(gè)有效組分的峰形尖銳，對(duì)稱，且保留時(shí)間適中，因此選用了乙腈+水=50+50(體積比)作為流動(dòng)相。

2.2 線性相關(guān)性測(cè)定

配制一系列不同質(zhì)量濃度的螺蟲乙酯(啶蟲脒)標(biāo)樣溶液，按上述色譜操作條件，測(cè)定相應(yīng)的響應(yīng)值，以螺蟲乙酯(啶蟲脒)的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)作圖，得到螺蟲乙酯(啶蟲脒)的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)。螺蟲乙酯線性方程為y=5.587 9x－1.220 5，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 7；啶蟲脒線性方程為y=6.603 0x+12.384 9，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 8。結(jié)果表明，該方法的線性關(guān)系良好。

表1 22%螺蟲乙酯·啶蟲脒懸浮劑測(cè)定方法的精密度

表2 22%螺蟲乙酯·啶蟲脒懸浮劑回收率測(cè)定

2.3 方法精密度測(cè)定

在上述色譜操作條件下，對(duì)同一個(gè)22%螺蟲乙酯·啶蟲脒懸浮劑樣品進(jìn)行5次平行測(cè)定，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差和變異系數(shù)。結(jié)果得到螺蟲乙酯和啶蟲脒的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.083和0.072，變異系數(shù)分別為0.73%和0.64%(表1)。由此可知該方法精密度較高。

2.4 方法準(zhǔn)確度測(cè)定

采用標(biāo)準(zhǔn)品添加法，在已知含量的22%螺蟲乙酯·啶蟲脒懸浮劑中加入一定量的螺蟲乙酯、啶蟲脒的標(biāo)準(zhǔn)品，按上述色譜操作條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率。測(cè)得螺蟲乙酯的回收率為99.24%～101.12%，平均回收率為100.18%；啶蟲脒的回收率為98.63%～100.98%，平均回收率為99.56%(表2)。由此可知該方法準(zhǔn)確度較高，滿足定量分析要求。

3 結(jié) 論

試驗(yàn)結(jié)果表明，本文建立的22%螺蟲乙酯·啶蟲脒懸浮劑中有效成分含量的高效液相色譜分析方法，具有較高準(zhǔn)確度和精密度，線性關(guān)系良好，分離效果好，并且操作簡(jiǎn)便、快速，適用于該產(chǎn)品生產(chǎn)過程的質(zhì)量控制。