吳 雪 羅采南 石亞妹 孟新艷 孟飛龍 武麗君

(新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，烏魯木齊830001)

結(jié)締組織病(Connective tissue disease，CTD)是一組由自身免疫異常所致的疾病，包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic lupus erythematosus，SLE)、原發(fā)性干燥綜合征(Primary Sj?gren′s syndrome，PSS)、系統(tǒng)性硬化征(Systemic sclerosis，SSc)、皮肌炎(Dermatomyositis，DM)、多肌炎(Polymyositis，PM)、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis，RA)、 重疊綜合征(Overlap connective tissue disease，OS)、混合性結(jié)締組織病(Mixed connective tissue disease，MTCD)、未分化結(jié)締組織病(Undifferentiated connective tissue disease，UCTD)及血管炎(Vasculitis)等。間質(zhì)性肺病(Interstitial lung disease，ILD)是CTD最主要的并發(fā)癥，也是 CTD患者預(yù)后不良及導(dǎo)致死亡的重要因素之一[1]。

目前肺功能檢測(cè)(Pulmonary function,test PFT)、高分辨率計(jì)算機(jī)斷層掃描(High-resolution computed tomography，HRCT)、支氣管鏡檢查(Bronchoscopic examination)和手術(shù)肺活檢(Surgical lung biopsy，SLB)是確定各種ILD(包括IIP)診斷所需的基本檢查方法[2-4]。 此外，連續(xù)肺功能測(cè)試通常用于監(jiān)測(cè)疾病活動(dòng)和預(yù)測(cè)ILDs患者的預(yù)后[5]。但是這些檢查都需要特定的檢查儀器，且可重復(fù)性較差并給被檢查者造成相當(dāng)大的不適。因此，研究出能夠鑒定ILD的血清生物標(biāo)志物將大大改善目前的診斷方法。目前許多生物標(biāo)志物已經(jīng)被研發(fā)出來(lái)用于檢測(cè)ILDs，其中最主要生物標(biāo)志物是來(lái)自Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞分泌唾液腺化蛋白-6(Krebs von den Lungen-6，KL-6)、肺泡表面活性蛋白A(Surfactant protein A，SP-A)及肺泡表面活性蛋白D(Surfactant protein D，SP-D)。且相關(guān)研究證明KL-6的敏感度、特異度和準(zhǔn)確性均高于SP-A和SP-D等其他生物標(biāo)志物[6-8]。

本文的主要目的是通過分析KL-6與肺功能相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)性，探討KL-6在結(jié)締組織病合并間質(zhì)性肺病(Connective tissue disease-associated interstitial lung diseases，CTD-ILD)診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1研究對(duì)象 本實(shí)驗(yàn)收集自2016年1月至2017年12月就診于新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科并確診的CTD-ILD患者50例，選取單純CTD患者46例作為對(duì)照組。ILD的診斷依靠1名風(fēng)濕科醫(yī)生及1名呼吸科醫(yī)生根據(jù)患者臨床表現(xiàn)、肺功能、X/CT確診。記錄患者年齡、性別、診斷、肺功能等資料。

1.2KL-6檢測(cè)方法 所有入組患者均在治療前抽取外周靜脈血經(jīng)4℃、1 000 g離心10 min后取血清，保存于-80℃待測(cè)。使用美國(guó)TSZ 公司生產(chǎn)KL-6試劑盒，ELISA法測(cè)定。

1.3數(shù)據(jù)分析 所有數(shù)據(jù)處理均采用 SPSS 20軟件包，其中計(jì)量資料統(tǒng)計(jì)采用t檢驗(yàn)及Mann-Whitney檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料統(tǒng)計(jì)采用χ2檢驗(yàn)，臨界值用ROC曲線分析，危險(xiǎn)因素分析采用Logistic回歸檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組一般情況比較 本研究共納入CTD患者96例，其中CTD-ILD組50例，其中SLE患者2例，RA患者8例，SSc患者12例，PSS患者7例，MCTD患者8例，UCTD患者6例，ANCA相關(guān)血管炎患者1例，JO-1綜合征患者1例，PM/DM患者5例，單純CTD患者46例，其中SLE患者21例，患者9例，SSc患者0例，SS患者12例，MCTD患者2例，UCTD患者1例。

2.2兩組年齡、種族、KL-6及肺功能指標(biāo)水平比較 CTD-ILD患者年齡明顯高于單純CTD組患者，組間對(duì)比存在顯著差異(P<0.05)。CTD-ILD患者FVC%、FEV1% 及TLcoSB%明顯低于單純CTD組，組間對(duì)比存在顯著差異(P均小<0.05)。CTD-ILD患者KL-6水平明顯高于單純CTD組患者，組間對(duì)比存在顯著差異(P<0.05)，具體見表1。

2.3KL-6與肺功能指標(biāo)的相關(guān)性 KL-6與用力肺活量(Forced vital capacity，F(xiàn)VC%)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.230，P=0.024)，與第一秒用力肺活量呈負(fù)相關(guān)(Forced expiratory volume in 1 s，F(xiàn)EV1%)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.236，P=0.024),與一氧化碳彌散量(Single breath transfer factor of carbon monoxide method TLcoSB)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.327，P=0.000)，見圖1。

2.3KL-6診斷CTD-ILD的敏感度與特異度 應(yīng)用接受者操作特征(Receiver-operating characteristic，ROC)曲線分別分析確診ILD的最佳血清KL-6濃度的臨界值，結(jié)果顯示確診ILD的血清KL-6的最佳臨界值為512.2 mg/dl,敏感度與特異度分別為82.0%、89.1%，曲線下面積為0.877。見圖2。

2.4單因素及多因素分析CTD患者發(fā)生ILD發(fā)生的危險(xiǎn)因素 采用單因素回歸分析發(fā)現(xiàn)病例組與對(duì)照組相比，F(xiàn)VC%(OR=1.030,95% CI 1.004-1.057,P=0.022)、FEV1%(OR=1.032,95% CI 1.004-1.062,P=0.06)、TLcoSB%(OR=1.081,95% CI 1.042-1.120,P=0.000)、KL-6(OR=0.998,95% CI 0.997-0.999,P=0.000)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但通過多因素分析后僅有KL-6與ILD顯著相關(guān)(P=0.000)，具體見表2。

表1CTD-ILD及CTD患者一般數(shù)據(jù)對(duì)比

Tab.1Epidemiologicaldataofpatients

IndexCTD-ILDCTDPAge52.7±13.145.3±12.50.006Female/Male42/831/150.057Uyghur/Han15/3512/340.067VC%80.8±15.4103.7±87.10.071FVC%82.1±16.790.7±18.00.018FEV1%80.7±16.487.8±13.50.023TLcoSB%55.2±21.276.7±13.40.000KL-61 962.1±1 329.4259.4±435.10.000

圖1 KL-6與肺功能指標(biāo)的相關(guān)性Fig.1 Correlation between KL-6 level and pulmon-ary functionNote: A.Correlation between KL-6 level and forced vital capacity(FVC)(% predicted);B.Correlation between KL-6 level and forced expiratory volume in 1 s(FEV1)(% predicted);C.Correlation between KL-6 level and diffusing capacity of the lung for single breath transfer factor of carbon monoxide method (TLCO)(%predicted).

圖2 血清KL-6的ROC曲線Fig.2 ROC curve of KL-6Note: Receiver-operating characteristic(ROC)curve according to the specificity and sensitivity of serum KL-6 levels.

3 討論

KL-6(Krebs von den Lungen-6，KL-6)是日本人Kohno等于1985年發(fā)現(xiàn)并命名的高分子量(200 kD)糖蛋白，屬于黏液素黏蛋白(Mucin mucin，MUC1)家族。

表2單因素及多因素分析結(jié)締組織病發(fā)生間質(zhì)性肺病的危險(xiǎn)因素

Tab.2SinglefactorandmultifactoranalysisofriskfactorsofILD

VariablesUnivariate analysisOR(95% CI)PMultivariate regression analysisOR(95% CI)PAge0.956(0.924,0.988)0.008VC%1.051(1.018,1.084)0.00FVC%1.030(1.004,1.057)0.022FEV1%1.032(1.004 1.062)0.026 TLcoSB%1.081(1.042,1.120)0.0001.097(1.031,1.168)0.004 KL-60.998(0.997,0.999) 0.0000.997(0.996,0.999)0.000

KL-6首先被建議作為肺癌、乳腺癌和胰腺癌的血清腫瘤生物標(biāo)志物，但是ILD患者假陽(yáng)性率較高，所以準(zhǔn)確性低于癌胚抗原(Carcino-embryonic antigen，CEA)，Kohno等人通過進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)KL-6可以作為ILD血清標(biāo)志物[9-12]。

首先，本研究發(fā)現(xiàn)CTD-ILD組的血清KL-6濃度明顯高于單純CTD組，組間對(duì)比存在顯著差異(P=0.000)，通過ROC曲線分析我們發(fā)現(xiàn)診斷ILD的最佳血清KL-6濃度臨界值為512.2 mg/L,其敏感度與特異度分別為82%、89.1%。這與Doishita等[13]研究一致，Doishita等進(jìn)行的一項(xiàng)涉及240例患者的研究表明，診斷CTD-ILD的最佳血清中KL-6水平為509 U/ml，其敏感度與特異度分別為79.1%，93%[13]。Ohnishi等[14]的研究也證實(shí)，KL-6是診斷 ILD 的最佳生物學(xué)標(biāo)記物，其敏感度、特異度高于SP-A,SP-D。

另外，最近一項(xiàng)專家共識(shí)強(qiáng)調(diào)了FVC%在預(yù)測(cè)CTD-ILD結(jié)局中的重要作用[15]。Winstone等[16]的研究證明，高齡、用力肺活量降低及一氧化碳的擴(kuò)散能力降低是預(yù)測(cè)SSC-ILD死亡的重要預(yù)測(cè)因素。本研究發(fā)現(xiàn)KL-6與用力肺活量(FVC%)呈負(fù)相關(guān),同時(shí)，本研究同樣證實(shí)KL-6與第一秒用力肺活量(FEV1%)(r=-0.236，P=0.024)、一氧化碳彌散量(TLcoSB%)(r=-0.327，P=0.000)及肺泡一氧化碳彌散量(TLcoVB%)呈負(fù)相關(guān)。說(shuō)明KL-6可能像肺功能一樣(FVC%、TLcoSB%、TLcoVB%)在檢測(cè)CTD-ILD的活動(dòng)及預(yù)測(cè)CTD-ILD患者預(yù)后中具有重要價(jià)值。

其次，本研究通過多因素Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)KL-6升高及TLcoSB%降低是CTD患者發(fā)生ILD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。同樣，馬芹等[17]的研究證實(shí)，KL-6是CTD-ILD的發(fā)生的危險(xiǎn)因素。

本研究證明，CTD-ILD患者血清KL-6水平明顯高于單純CTD患者，KL-6是診斷ILD的重要血清標(biāo)志物，且KL-6與FVC%、FEV1%、TLcoVB及TLcoSB呈負(fù)相關(guān)，說(shuō)明KL-6可能是檢測(cè)ILD預(yù)測(cè)的重要生物學(xué)指標(biāo)，但仍需進(jìn)一步縱向研究證實(shí)。