孔維請 束金華

【摘要】 樹突狀細胞（DC）是目前發(fā)現的最強的專職抗原提呈細胞（APC），其最大的特點是能刺激初始T細胞活化和增殖，并能分泌如IL-12、INF-γ等細胞因子發(fā)揮免疫調節(jié)作用，參與機體對腫瘤的免疫效應。細胞因子激活的殺傷細胞（CIK）是在體外經多種細胞因子誘導刺激形成的異質細胞群，兼具T細胞特異性的強大抗腫瘤活性與非MHC限制性的廣譜殺傷腫瘤作用。經樹突狀細胞誘導的細胞因子激活的殺傷細胞（DC-CIK）比單純的CIK有著更高的抗腫瘤活性。DC-CIK的生物免疫治療為非小細胞肺癌（NSCLC）治療提供又一有力手段，本文就DC-CIK的生物學作用及在NSCLC治療中的應用做一綜述。

【關鍵詞】 非小細胞肺癌 樹突狀細胞 細胞因子激活的殺傷細胞 細胞免疫治療

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.32.079 文獻標識碼 A 文章編號 1674-6805（2019）32-0-03

[Abstract] Dendritic cells （DC） is the strongest professional antigen presenting cell （APC） found at present. Its most prominent feature is that it can stimulate the activation and proliferation of initial T cells， and can secret cytokines such as IL-12， INF-γ to play an immune regulatory role and participate in the immune effect of the body on tumors. Cytokine induced killer cells （CIK） are heterogeneous cell populations induced and stimulated by a variety of cytokines in vitro， with strong anti tumor activity of T cell specificity and broad spectrum anti tumor effect not restricted by MHC. The DC-CIK have higher antitumor activity than CIK alone. The biological immunotherapy of DC-CIK provides another powerful means for the treatment of non-small cell lung cancer （NSCLC）. This article reviews the biological function of DC-CIK and its application in NSCLC treatment.

[Key words] Non-small cell lung cancer Dendritic cells Cytokine induced killer cells Cell immunotherapy

First-authors address： First People Hospital of Xuanwei City， Xuanwei 655400， China

肺癌是世界范圍內發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤，全球范圍內每年新發(fā)肺癌約182萬，占所有新發(fā)惡性腫瘤的13%。每年在所有腫瘤死亡病例中，肺癌死亡占19.4%，約160萬人。在中國，肺癌發(fā)病率和死亡率也位居首位[1]。肺癌根據其病理學類型，可分為小細胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）及非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC），其中以NSCLC居多，占80%左右[2]。由于早期肺癌大多缺乏特異性臨床表現，發(fā)現時約85%已處于中晚期，手術效果受到限制，化學治療、放射治療作為NSCLC的又一重要治療手段，雖取得一定療效，但由于耐藥問題、腫瘤干細胞的存在、嚴重的不良反應及對患者免疫功能的抑制等因素，使得肺癌的死亡率仍然居高不下，以致肺癌整體5年生存率一直徘徊在16%左右[3]。隨著科技的發(fā)展，分子靶向治療問世，由于其確切的療效、較低的毒副反應及對患者免疫功能影響較小等諸多優(yōu)點，靶向治療成為近年研究的熱點，其中以表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）為靶點的藥物研究最為廣泛。但隨著臨床應用的推廣，靶向藥物同樣存在耐藥問題，無疾病進展生存期及總體生存率仍然不理想[4]。在如此背景下，尋找新的治療方法成了目前最迫切的需求。隨著分子生物學及免疫學的發(fā)展，腫瘤細胞免疫治療應運而生。細胞免疫治療由于其抗腫瘤作用強、不良反應少等諸多優(yōu)點，逐漸成為治療惡性腫瘤的又一新興有效手段，通過利用各類免疫細胞及相應細胞因子來提高機體免疫系統(tǒng)抗腫瘤能力，殺滅腫瘤細胞，從而達到治療腫瘤的目的。本文就以樹突狀細胞誘導的細胞因子激活的殺傷細胞（DC-CIK）為主的細胞免疫治療在NSCLC中的應用做一綜述。

1 DC、CIK及DC-CIK的生物學作用及其抗腫瘤機制

1.1樹突狀細胞（dendritic cell，DC）

DC主要是由CD34+或CD14+細胞誘導分化的免疫細胞，可由骨髓中髓樣干細胞和淋巴樣干細胞分化而來，廣泛分布于除腦以外的全身各處組織，但數量極少，人外周血DC僅占單個核細胞（PBMC）的1%以下[5]。DC是目前發(fā)現的功能最強的抗原提呈細胞（antigen-presenting cell，APC），成熟的DC高度表達主要組織相容性復合體分子（major histocompatibility complex，MHC）和共刺激分子（B7、CD40），被DC所攝取的抗原經加工提呈處理，以抗原肽-MHC復合物形式提呈給T細胞，從而激活初始T細胞啟動抗腫瘤免疫效應[5-6]。另外，DC通過分泌TNF-α、INF-γ、IL-2、IL-12等細胞因子及趨化因子，增強機體免疫功能，調節(jié)免疫細胞的分化，募集效應T細胞維持在腫瘤細胞附近發(fā)揮抗腫瘤作用[7]。

1.2 細胞因子激活的殺傷細胞（cytokine induced killer，CIK）

CIK是PBMC在體外經多種細胞因子誘導激活的一群以CD3+CD56+T細胞為主要效應細胞的具有殺傷活性異質細胞群，對腫瘤細胞有較高的細胞毒作用。CIK中約88%的細胞為CD3+CD56+T細胞，研究發(fā)現CD3+CD56+T細胞比CD3+CD56-T細胞具有更高的腫瘤殺傷活性[8]。CIK既有T淋巴細胞的強大抗腫瘤活性，又具有自然殺傷細胞（NK）的非MHC限制性的殺傷能力。目前普遍認為CIK主要通過以下機制發(fā)揮抗腫瘤效應：（1）直接殺傷。CIK可釋放穿孔素、顆粒酶使腫瘤細胞融解壞死，直接殺傷腫瘤細胞[9];（2）誘導腫瘤細胞凋亡。CIK表達的FasL通過與腫瘤細胞的Fas結合誘導腫瘤細胞凋亡;（3）釋放細胞因子，免疫調節(jié)。CIK通過釋放IL-2、IL-12、TNF-α、INF-γ等細胞因子增強免疫系統(tǒng)反應水平，而且包括TNF-α部分細胞因子可直接抑制腫瘤細胞[10]。CIK抗腫瘤作用具有以下特點：（1）非MHC限制性殺傷作用。CIK對腫瘤細胞發(fā)揮細胞毒作用不需要通過MHC-I、MHC-II類分子和T細胞受體（TCR）相作用，而是被腫瘤細胞和CIK所結合的結合物所激活[11-12];（2）高效、廣譜殺瘤作用。由于CIK發(fā)揮作用不受MHC限制，為非特異性效應，故不受器官組織差異及病理學類型的限制，對各種腫瘤細胞甚至耐藥腫瘤均有殺傷作用[13];（3）較低的毒副作用，不良反應少。就目前大多數的關于CIK的臨床研究，報道不良反應的甚為少見，大多數相對安全。Ma等[14]報道的關于CIK臨床應用的一項Meta分析顯示，854例納入研究的患者僅少數出現輕微的發(fā)熱、畏寒等反應，且經對癥處理后即可好轉，顯示了CIK較高的安全性。

1.3 DC與CIK聯合

作為體內專職APC，DC具有強大的抗原提呈能力，可以有效地捕獲腫瘤抗原，在腫瘤免疫過程中參與腫瘤抗原的識別與提呈，對T細胞的活化起著關鍵作用，將DC與CIK聯合培養(yǎng)將能發(fā)揮協(xié)同抗腫瘤作用，比單獨應用CIK能取得更顯著地腫瘤殺傷效應[15-16]。由于DC分泌的IL-2、IL-12、INF-γ等細胞因子可激活CIK細胞，加之DC-CIK共培養(yǎng)可下調調節(jié)性T細胞（Treg）的表達，有利于解除免疫抑制效應，所以將DC和CIK細胞聯合培養(yǎng)能相互促進彼此的分化和成熟，這一理論在相應研究中也得到了驗證[17]。Ma等[18-19]的研究顯示，DC-CIK對腫瘤細胞的殺傷活性和抑制效應顯著高于單純CIK，將DC和CIK聯合培養(yǎng)有助于提高活性T細胞比例，增強抗腫瘤效應，若機體內的DC細胞缺乏，則不能活化足夠多的T細胞，導致CIK抗腫瘤能力下降。邱育淼等[20]通過建立人肺腺癌裸鼠移植瘤模型，分為CIK組和DC-CIK組，發(fā)現DC與CIK共培養(yǎng)后CD3+與CD8+均較單純CIK升高，DC-CIK組能明顯下調移植瘤中VEGF、MMP-9等蛋白的表達，表明DC-CIK能較單純CIK活化更多CD8+T細胞并能顯著抑制肺腺癌移植瘤的生長。所以，將具有強大抗原提呈能力和免疫激活能力的DC與對腫瘤有殺傷效應的CIK聯合培養(yǎng)將更能起到協(xié)同抗腫瘤作用。

2 DC-CIK細胞免疫療法在NSCLC治療中的應用

化療和放射治療是治療NSCLC的有力手段，能減少腫瘤的復發(fā)和轉移，對提高患者總體生存率有一定作用，但化療和放療對人體有明顯的不良反應，對機體免疫能力有明顯的抑制作用，加之腫瘤細胞對化療藥物的耐藥，導致其療效受到限制[21]。Verma等[22]的研究顯示，化療對人體CD4+T細胞和B細胞有較明顯的抑制作用，接受化療期間機體免疫細胞普遍減少，導致患者免疫功能低下，更加有利于腫瘤的復發(fā)和轉移。DC-CIK聯合放化療可以有效清除手術后殘余癌細胞，增強機體免疫功能，降低放化療的不良反應率，提高放化療療效[23]。Zhu等[24]以63例ⅢB期NSCLC患者為研究對象，治療組采用DC-CIK聯合多西他賽與鉑類雙藥化療和同步放療，對照組患者僅采用多西他賽與鉑類雙藥化療和同步放療，結果顯示治療組患者的治療有效率、KPS評分、腫瘤標志物和6、12個月生存率等指標均顯著高于對照組，說明DC-CIK聯合放化療能顯著增強放化療的療效，延長患者生存期并改善NSCLC患者的生存質量。劉淑娟等[25]選取185例晚期NSCLC患者做研究，將患者隨機分為化療組、DC-CIK組和聯合組，化療采用培美曲塞或吉西他濱治療6～8周期，DC-CIK組和聯合組進行2次DC-CIK回輸治療，結果顯示聯合組客觀反應率（ORR）、疾病控制率（DCR）、生活質量評分均高于其他兩組，且不良反應癥狀量表評分低于其他兩組，表明DC-CIK聯合化療可提高近期療效，減低化療不良反應，改善患者生活質量。Wang等[26]的一項納入了505名患者的Meta分析結果顯示，DC-CIK細胞免疫治療在改善患者無疾病進展生存期（PFS）、總生存期（OS）和疾病控制率（DCR）方面顯示出較明顯的優(yōu)勢，并且沒有明顯致命的不良反應出現，療效確切、安全。一項利用28篇關于DC-CIK聯合化療治療NSCLC的隨機對照研究做的薈萃分析[27]，結果顯示DC-CIK聯合化療治療NSCLC能顯著提高患者外周血CD4+、CD8+T細胞、NK細胞數量，提升CD4+/CD8+比值，治療組有著更低的Treg，且亞組分析還顯示，DC-CIK與NP方案或GP方案聯合對免疫細胞提升最明顯，表明DC-CIK細胞免疫治療能有效地提高患者免疫力，減少化療對患者免疫功能的抑制，加強抗腫瘤免疫。

3 結語與展望

DC-CIK細胞免疫療法是自身免疫細胞回輸患者體內治療惡性腫瘤的新興療法，且DC和CIK共培養(yǎng)能相互促進彼此成熟，提高CIK殺瘤作用，比單純CIK具有更強大的抗腫瘤免疫功能，DC-CIK聯合化療治療NSCLC能提高患者生存率，延緩或減少腫瘤的復發(fā)，提高機體免疫功能，降低化療所致的不良反應，是一種安全、有效、低毒的綠色生物療法，具有巨大發(fā)展?jié)摿蛷V闊發(fā)展空間，是未來肺癌免疫治療的發(fā)展方向之一，但目前多數研究均為小樣本研究，且針對DC-CIK最佳回輸方式、治療周期、與化療或放療聯合的最佳時機等問題的研究尚有空白，還需大規(guī)模、多中心的研究進一步證實其療效。

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（收稿日期：2019-06-25） （本文編輯：桑茹南）