蒲小蘭　林書蘭　王曉玉　王娃金

摘要：產(chǎn)地不同，葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元、總黃酮這幾種成分的含量存在一定的差異。對(duì)不同產(chǎn)地葛根藥材的化學(xué)成分進(jìn)行詳細(xì)地測定，為葛根藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供一定的理論支持，分析研究結(jié)果可以將其作為研究此物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供一定的理論幫助。

關(guān)鍵詞：葛根;產(chǎn)地不同;化學(xué)成分;總黃酮

【中圖分類號(hào)】R197??? 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A???? 【文章編號(hào)】1004-7484（2019）10-0218-03

葛根主產(chǎn)于河南、湖南等地區(qū)。其用途比較廣泛，可以緩解發(fā)熱的癥狀，還可以升陽止瀉等。它是一種豆科植物，葛根的主要的成分包括葛根素、大豆苷、大豆苷元等成分。同時(shí)還包括一定的黃酮類物質(zhì)、多糖以及很多的微量元素。葛根是一種分布十分廣泛的藥材。產(chǎn)地不一致，從而導(dǎo)致質(zhì)量方面存在一定的差異。為了對(duì)藥材的質(zhì)量進(jìn)行合理的控制，同時(shí)制定一定的標(biāo)準(zhǔn)，本次實(shí)驗(yàn)通過對(duì)不同產(chǎn)地的葛根藥材中葛根素、大豆苷、大豆苷元、總黃酮進(jìn)行詳細(xì)地分析和測定，希望可以對(duì)葛根藥材質(zhì)量的控制提供一定的幫助。實(shí)驗(yàn)如下：

一、儀器、試劑及樣品

高效液相色譜儀;色譜柱;真空泵;外分光光度計(jì);電子天平;葛根樣品;甲醇;乙醇;水。

二 、方法與結(jié)論

2.1葛根素含量的測定：在進(jìn)行測定時(shí)，主要運(yùn)用中國藥典中的測定方法進(jìn)行測定，測定結(jié)果如下圖1所示：

2.2大豆苷、大豆苷元含量測定

2.2.1色譜條件 （如圖二所示）

根據(jù)圖2 的色譜圖，可以明顯地看出大豆苷、大豆苷元與其他成分分離的效果是很可觀的，理論塔板數(shù)均高于4000。

2.2.2制備對(duì)照品溶液

用天平準(zhǔn)確地稱取大豆苷，大豆苷元的對(duì)照樣品需按實(shí)際情況適量稱取，加70%乙醇分別制成0.2和0.1mg/mL溶液.

2.2.3制備供試品溶液

用天平準(zhǔn)確地稱取藥材細(xì)粉0.2克，放在100mL平底的燒瓶內(nèi);加入20ML70%的乙醇溶液;密封處理;對(duì)其稱重;加熱回流2h進(jìn)行提取;冷卻;繼續(xù)用乙醇溶液補(bǔ)充溶液恢復(fù)至原刻度線的位置。

2.2.4精密度分析

對(duì)大豆苷以及大豆苷元對(duì)照品溶液進(jìn)行精密吸取，體積分別為10ML，對(duì)兩者分別連續(xù)進(jìn)樣5次，RSD分別為1.3%和1.5%，說明儀器具備良好的精密度。

2.2.5穩(wěn)定性試驗(yàn)分析

對(duì)供試品溶液分別進(jìn)行精密吸取，分別于0，2，4，6，8，10，12 等不同的時(shí)刻進(jìn)樣10ML，大豆苷和大豆苷元RSD分別為1.7%和1.3% ，表明供試液整個(gè)階段內(nèi)屬于穩(wěn)定狀態(tài)。

2.2.6重復(fù)性試驗(yàn)

用天平準(zhǔn)確地稱取同一樣品的粉末各6份，每一份質(zhì)量為0.2g，重復(fù)上述制備供試液的方法繼續(xù)制此溶液，測得大豆 苷、大豆苷元的平均含量沒有明顯地變化， RSD也是比較穩(wěn)定的，這一結(jié)果表面該實(shí)驗(yàn)的方法的重復(fù)性方面基本沒有問題。

2.2.7加樣回收率試驗(yàn)分析

取同樣的葛根粉末各6份，每一份大約在0.1g左右，在每份樣品中加入一定量的大豆苷和大豆苷元的對(duì)照品。重復(fù)上述操作制備供試液，測定結(jié)果如表1所示。

從表格可以看出回收率比較可觀。

2.3總黃酮含量實(shí)驗(yàn)分析

2.3.1制備對(duì)照品的溶液：稱取葛根素的標(biāo)準(zhǔn)品20mg于100mL量瓶中，注意稱取時(shí)盡量準(zhǔn)確，加95%的乙醇溶解進(jìn)行稀釋處理，達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)刻度位置的同時(shí)需要進(jìn)行搖勻處理，避免一定的誤差出現(xiàn)。

2.3.2制備供試品溶液：用天平準(zhǔn)確地稱取葛根粉末0.4 g于100ML的錐形瓶中，加進(jìn)95%乙醇60 mL;放在熱水中進(jìn)行加熱處理;大約50min并在加熱時(shí)及時(shí)進(jìn)行振搖處理;時(shí)間結(jié)束后進(jìn)行冷卻處理;加乙醇補(bǔ)足到原刻度線位置;搖勻處理;靜置一段時(shí)間使溶液澄清;吸取上清液2 mL左右導(dǎo)入到25 mL的量瓶中;加入適量的蒸餾水進(jìn)行稀釋;恢復(fù)原刻度線位置并作搖勻處理。

2.3.3最大吸收峰的確定：吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液，吸取時(shí)需要注意兩點(diǎn)，一是吸取需精準(zhǔn)，二是吸取需適量。以2mL 95%乙醇加水稀釋至20mL量瓶中作為主要的對(duì)照溶液，進(jìn)行掃描處理，結(jié)果顯示在250nm附近的時(shí)候有最大吸收強(qiáng)度。

2.3.4精密度分析：對(duì)黃酮對(duì)照品溶液進(jìn)行精密吸取，在250nm的時(shí)候測定其吸收光照的程度，連續(xù)操作5次，RSD為0.1%，說明儀器具備良好的精密度。

2.3.5穩(wěn)定性試驗(yàn)分析：吸取同一種供試品溶液，在制備60min（每間隔10min測量一次）時(shí)間內(nèi)分別測定其吸收光照的程度，測得RSD在60分鐘之內(nèi)變化處于穩(wěn)定的狀態(tài)，因此可以說明此實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性良好，不會(huì)因此而出現(xiàn)一定的誤差現(xiàn)象。

2.2.6重復(fù)性試驗(yàn)：用天平準(zhǔn)確地稱取同一樣品的粉末各6份，每一份質(zhì)量為0.4g，重復(fù)上述制備供試液的方法繼續(xù)制此溶液，在250nm下測定其吸收光照的強(qiáng)度，在此位置RSD為1%左右，這一結(jié)果表面該實(shí)驗(yàn)的方法的重復(fù)性方面基本沒有問題。

2.2.7加樣回收率試驗(yàn)分析：取同樣的葛根粉末各6份，每一份大約在0.1g左右，在每份樣品中加入一定量的葛根素作為主要的對(duì)照樣品。重復(fù)上述操作制備供試液，測定結(jié)果如表2所示。

2.4不同地區(qū)的葛根成分分析

通過檢測測出不同地區(qū)葛根含量明細(xì)如下（圖3）

三、討論

對(duì)大豆苷、大豆苷元標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行紫外全波長的掃面，再加上對(duì)樣品溶液進(jìn)行紫外全波長掃描，結(jié)果顯示都是在248 nm處吸收程度比較好，因此通過實(shí)驗(yàn)分析出大豆苷、大豆苷元含量進(jìn)行相關(guān)的測定是時(shí)選擇測定波長為248 nm時(shí)效果是最明顯的，因此這個(gè)數(shù)值可以被用來以后的測定和研究，可以節(jié)省一定的人力、物力和財(cái)力。葛根中的黃酮物質(zhì)對(duì)乙醇比較容易吸收，通過實(shí)驗(yàn)的分析可以發(fā)現(xiàn)，當(dāng)濃度為70%時(shí)，乙醇提取大豆苷、大豆苷元效果是比較好的，因此在進(jìn)行測定的時(shí)候一般可以采用70%的乙醇來進(jìn)行操作。另外當(dāng)大豆苷的元峰與其它峰交互在一起時(shí)。經(jīng)過試驗(yàn)選用甲醇～水按上述實(shí)驗(yàn)的操作步驟進(jìn)行，使大豆苷，大豆苷元可以完全分離的狀態(tài)，這樣往往分離效果是比較明顯，方便結(jié)果分析。

四、總結(jié)

本實(shí)驗(yàn)主要是根據(jù)葛根的多種成分進(jìn)行詳細(xì)地分析，對(duì)收集的不同地區(qū)的葛根樣品進(jìn)質(zhì)量分析，結(jié)果表明，產(chǎn)地不同，葛根的質(zhì)量上均存在一定的差異。因此在不斷地研究中，對(duì)于藥材的產(chǎn)地和不同的品種之間進(jìn)行相應(yīng)的研究，可以在一定程度上對(duì)藥材的質(zhì)量進(jìn)行保證。

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