徐進(jìn)棟，朱風(fēng)華，陳佳，劉文華，朱連勤

(1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)與信息科學(xué)學(xué)院，山東 青島 266109; 2.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東 青島 266109； 3.榮成市俚島畜牧獸醫(yī)站，山東 威海 264317; 4.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，山東 青島 266109)

近幾年來由于食品安全備受人民群眾重視，飼料霉菌毒素的污染作為食品安全的源頭也被人們逐漸關(guān)注。玉米、水稻、高粱、花生等糧食作物常被黃曲霉、寄生曲霉污染，從而產(chǎn)生次級(jí)代謝產(chǎn)物——黃曲霉毒素，主要包括黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2，其中AFB1最常見，活性最強(qiáng)，被國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)認(rèn)定為I級(jí)強(qiáng)致癌物[1]。

AFB1對(duì)食品及飼料的污染在世界范圍內(nèi)被報(bào)道較多，許多報(bào)告指出糧食谷物、牧草以及其他一些飼料原料中均有AFB1檢出，且嚴(yán)重超出最大允許量。尤其是在發(fā)展中國家更為常見[2]。謝文梅等[3]對(duì)2016年全國部分地區(qū)飼料及原料霉菌毒素分析報(bào)告指出，黃曲霉毒素污染率為83.11%，最高含量67.58 μg/kg，平均值5.04 μg/kg，超標(biāo)率2.48%。周芬等[4]對(duì)安徽省養(yǎng)豬場(chǎng)飼料中黃曲霉毒素B1污染狀況調(diào)查表明，養(yǎng)豬場(chǎng)飼料黃曲霉毒素B1污染情況較為普遍，污染率高達(dá)99.5%，中度污染率達(dá)6.1%，最高含量達(dá)38.9 μg/kg。由此可見，飼料中飼料霉菌毒素污染需要引起重視，為了更加準(zhǔn)確地了解山東省飼料霉菌毒素污染狀況，采集大批量有代表性的樣品進(jìn)行檢測(cè)，促使畜牧生產(chǎn)從源頭上降低黃曲霉毒素的危害，為畜產(chǎn)品安全保駕護(hù)航。

1 材料與方法

1.1 樣品采集與制備

檢測(cè)所用樣品，采集時(shí)間為2018-01—12，來源于山東省各地規(guī)模化動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)、飼料廠，樣本總數(shù)量12 593份，詳見表1。樣品采集方法按GB/T 14699.1—2005《飼料采樣》進(jìn)行。樣品采集后，用四分法縮減取樣約200 g，粉碎過20目篩后，裝入自封袋內(nèi)，貼好標(biāo)簽，標(biāo)明樣品名稱、采樣時(shí)間、采樣地點(diǎn)，置于-20℃冰箱保存，備用。

表1 被檢飼料原料和配合飼料樣品種類和數(shù)量

1.2 檢測(cè)項(xiàng)目與方法

利用上轉(zhuǎn)發(fā)光競爭抑制免疫層析法測(cè)定飼料中AFB1值，采用多參數(shù)控溫測(cè)定試劑盒AFB1提供的方法，檢測(cè)飼料中AFB1含量。按照試劑盒中固體樣品前處理方法進(jìn)行，AFB1用70%甲醇制取提取液。本試驗(yàn)檢測(cè)樣品利用試劑盒中的參數(shù)卡1進(jìn)行。上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫分析儀為北京熱景生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)。試驗(yàn)室內(nèi)分析CV≤10%(n=45)。

1.3 限量值和參考標(biāo)準(zhǔn)

GB 13078—2017《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，AFB1在飼料原料中玉米加副產(chǎn)品和花生餅(粕)中的限量值為≤50 μg/kg，其他原料≤30 μg/kg。雛禽、仔豬配合飼料、泌乳牛精料補(bǔ)充料≤10 μg/kg，小鴨、生長及產(chǎn)蛋鴨配合飼料≤15 μg/kg，育成牛精料補(bǔ)充料≤30 μg/kg，其他配合飼料≤20 μg/kg。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS9.3軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，描述性統(tǒng)計(jì)量采用means過程，頻數(shù)統(tǒng)計(jì)采用freq過程。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料原料中的AFB1

2.1.1玉米及加工副產(chǎn)品中的AFB1

由表2可知，玉米中AFB1污染率為55.00%，含量為3.03～100.00 μg/kg，平均值為20.52 μg/kg，中值為8.80 μg/kg，超標(biāo)率為21.21%。

玉米加工副產(chǎn)品中，AFB1污染率較高的為玉米皮和玉米淀粉渣，檢出率分別為93.83%、84.09%，最高含量分別為37.54、40.04 μg/kg，在限量標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)。玉米胚餅粕檢出率為91.74%，含量為3.02～100.00 μg/kg，中值為21.22 μg/kg，超標(biāo)率9.80%。玉米蛋白粉和DDGS檢出率分別為82.05%、65.57%，最高含量分別為400.00、204.20 μg/kg，超標(biāo)率分別為3.84%、2.35%，見表2。

表2 玉米及副產(chǎn)品中AFB1檢測(cè)結(jié)果

2.1.2小麥及加工副產(chǎn)品中的AFB1

小麥檢出率為27.78%，含量為3.29～8.86 μg/kg，不超標(biāo)。小麥加工副產(chǎn)品中小麥次粉、麩皮檢出率分別為25.71%、20.00%，含量為3.52～7.99、4.05～10.66 μg/kg，均不超標(biāo)。小麥胚AFB1未檢出，見表3。

表3 小麥及加工副產(chǎn)品中AFB1檢測(cè)結(jié)果

2.1.3餅粕類飼料中的AFB1

餅粕類飼料中花生餅粕、棉籽粕檢出率較高，分別為89.91%、83.33%，最高含量分別為360.00、100.00 μg/kg，是限量標(biāo)準(zhǔn)的7.2倍和2倍，超標(biāo)率分別為14.88%、26.92%。

菜籽餅粕檢出率為62.50%，最高含量為50.15 μg/kg，超標(biāo)率為10.00%。大豆餅粕檢出率62.22%，其最高含量為10.33 μg/kg，不超標(biāo)，見表4。

表4 餅粕類飼料中AFB1的檢測(cè)結(jié)果

2.1.4其他原料中的AFB1

賴氨酸渣、米糠AFB1污染率較高，檢出率為71.43%、50.00%，含量為3.31～10.29、3.13～9.95 μg/kg，都不超標(biāo)。米糠粕、大豆皮檢出率為43.08%、30.95%，含量為3.07～31.09、3.04～15.69 μg/kg，中值5.68、4.37 μg/kg，超標(biāo)率為1.79%、0.00%，見表5。

表5 其他原料中AFB1的檢測(cè)結(jié)果

2.2 配合飼料中的AFB1

2.2.1牛配合飼料中的AFB1

牛配合飼料中育成牛精料AFB1檢出率63.64%、含量為3.08～10.02 μg/kg，在限量標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)。泌乳牛精料AFB1檢出率59.33%，最高含量22.89 μg/kg，中值4.90 μg/kg，超標(biāo)率為4.84%，見表6。

表6 牛配合飼料中AFB1的檢測(cè)結(jié)果

2.2.2雞配合飼料中的AFB1

雞配合飼料中雛雞AFB1污染率最高，檢出率為82.32%，含量為3.02～15.26 μg/kg，平均值為5.90 μg/kg，中值5.28 μg/kg，超標(biāo)率為3.36%。小雞、生長及產(chǎn)蛋雞檢出率分別為79.21%、76.19%，含量為3.01～22.67、3.03～51.90 μg/kg，平均值為7.44、8.86 μg/kg，中值7.06、8.25 μg/kg，超標(biāo)率為1.02%、1.42%，見表7。

表7 雞配合飼料中AFB1的檢測(cè)結(jié)果

2.2.3鴨配合飼料中的AFB1

鴨配合飼料中雛鴨AFB1檢出率為25.53%，最高含量為9.89 μg/kg接近限量標(biāo)準(zhǔn)，小鴨、生長及產(chǎn)蛋鴨AFB1檢出率分別為79.39%、79.70%，最高含量分別為22.08、43.88 μg/kg，中值為6.81、8.45 μg/kg，超標(biāo)率分別為3.25%、8.84%，見表8。

表8 鴨配合飼料中AFB1的檢測(cè)結(jié)果

2.2.4豬配合飼料中的AFB1

豬配合飼料中生長豬、仔豬AFB1檢出率為50.46%、42.65%，含量為3.01～139.18、3.02～27.42 μg/kg，平均值為7.86、6.36 μg/kg，中值5.61、5.42 g/kg，超標(biāo)率0.61%、5.17%。青年母豬、育肥豬污染率檢出率為38.10%、35.56%，含量為3.05～29.34、3.19～19.00 μg/kg，平均值為7.01、7.33 μg/kg，中值5.40、5.85 μg/kg，超標(biāo)率1.14%、0.00%，見表9。

表9 豬配合飼料中AFB1的檢測(cè)結(jié)果

2.2.5其他配合飼料中的AFB1

其他配合飼料中貉狐貂膨化、鵪鶉AFB1檢出率為97.67%、62.03%，含量3.15～25.89、3.04～27.12 μg/kg，平均值為10.41、11.02 μg/kg，中值9.20、9.19 μg/kg，超標(biāo)率4.76%、12.24%。見表10。

表10 其他配合飼料中AFB1的檢測(cè)結(jié)果

3 討論

由于黃曲霉毒素對(duì)動(dòng)物和人類健康危害較大，已成為飼料企業(yè)質(zhì)量控制的必檢項(xiàng)目。試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料原料中玉米是黃曲霉毒素的主要污染對(duì)象，超標(biāo)率為21.21%。玉米加工副產(chǎn)品超標(biāo)率明顯低于往年，超標(biāo)率都在10%以下，表明在加工及儲(chǔ)藏環(huán)節(jié)得到很好的控制。小麥及加工副產(chǎn)品比較安全，米糠粕超標(biāo)率1.79%。餅粕類飼料，與往年相差較大，大豆粕沒有超標(biāo)，棉粕超標(biāo)率高于花生粕。黃曲霉毒素是由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的，除了土壤和種子帶菌外，環(huán)境條件影響較大。近幾年來，山東省06-08月份高溫高濕層出不窮，2018年高溫創(chuàng)歷史記錄，溫度都在20℃以上，平均相對(duì)濕度也在80%以上，在此條件下黃曲霉菌株快速繁殖，因此造成黃曲霉毒素污染飼料原料。

配合飼料令人擔(dān)憂，除了育成牛精料、雛鴨、育肥豬飼料外，其他配合飼料都有不同程度的超標(biāo)，尤其泌乳牛精料、生長及產(chǎn)蛋鴨雞配合飼料，直接關(guān)系到食品安全問題，危及人類健康。因此，配合飼料生產(chǎn)企業(yè)要嚴(yán)把原料關(guān)，超過標(biāo)準(zhǔn)含量的一律拒收，同時(shí)適當(dāng)添加脫霉劑；飼料儲(chǔ)存過程中保證溫度(<20℃)、濕度(<80%)及水分含量(<13%)符合標(biāo)準(zhǔn)要求，將黃曲霉毒素的污染降低到最低范圍，保證畜產(chǎn)品黃曲霉毒素零污染。

4 結(jié)論

2018年山東省飼料原料AFB1污染較2017年重，超標(biāo)率：玉米21.21%、花生餅粕14.88%、玉米DDGS 2.35%、玉米胚餅粕9.80%。配合飼料除了育成牛精料補(bǔ)充料、雛鴨、育肥豬配合飼料不超標(biāo)外，其他配合飼料超標(biāo)率在0.61%～12.24%。