盧蕊 天津市南開醫(yī)院病理科 （天津 300100）

內(nèi)容提要： 目的：總結全自動浸染式染色機的應用體會以及其應用對效率的影響。方法：選取2018年9月～2019年10月本院病理組織切片，按照來自不同組織（胃，腸，肝臟，子宮頸，皮膚）分為五組，并用全自動浸染式染色機進行染色。染色結束后統(tǒng)一對切片進行鏡檢，根據(jù)切片是否合格，胞核、胞質染色效果進行評分，并進行統(tǒng)計學分析。結果：使用全自動浸染式染色機進行染色效率明顯提高，細胞結構清晰，紅藍對比適宜，染色質量穩(wěn)定。不同組織染色評分近似，五組切片數(shù)據(jù)差異無統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論：全自動浸染式染色機對提高染色效率和穩(wěn)定染色質量具有重要意義。

隨著病理技術的發(fā)展，傳統(tǒng)的手工染色逐漸被淘汰，全自動染色機以其效率高、可以批量染色等特點成為當前主要的染色方式。近年來，有關全自動染色機在應用過程中的特點及染色效果的研究取得了良好的結果，其中，根據(jù)傳統(tǒng)HE染色的流程確定最合理的染色程序，減少干擾因素是保證全自動染色機染色質量的關鍵。目前，全自動染色機的染色方式主要有浸染式與滴染式兩種，全自動浸染式染色機與全自動滴染式染色相比，染色設備與試劑的成本較低[1]，滴染式染色機的經(jīng)濟要求相對較高，且與傳手工染色相比，染色制片所需要的時間明顯減少，染色效率有很大程度的提高，染色質量穩(wěn)定，結構清晰[2]。然而，由于HE染色步驟較多，影響因素較多，以及全自動染色機的使用對操作人員提出了新的技術要求，在使用全自動染色機染色的過程中，仍有脫片、染色效果不理想等情況出現(xiàn)?；诖?，結合長時間使用經(jīng)驗，本文將對全自動浸染式染色機的應用體會進行總結和評價，為全自動浸染式染色機在病理學的應用提供依據(jù)。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年9月～2019年10月本院病理組織切片400例，均采用石蠟固定切片，切片厚度大致相同。

1.2 儀器與材料

全自動浸染式染色機，二甲苯，無水乙醇，80%乙醇，95%乙醇，蘇木精染液，伊紅染液，1%鹽酸乙醇，

1.3 研究方法

首先將切片分為1～5五組，分別選取來自胃，腸，肝臟，子宮頸，皮膚的病理組織切片，在載玻片一側用標簽標記好組別后開始進行染色。將切片置于70°的恒溫箱中進行烤片，持續(xù)20min，便可放入全自動染色機進行染色。將全自動染色機的染色程序設置為：（1）用二甲苯、無水乙醇進行脫蠟，均設置為兩次，每次10min；（2）染色：蘇木精染液染色5min，之后依次用蒸餾水沖洗3s、鹽酸乙醇溶液沖洗2s，用0.6的氨水進行反藍5min后蒸餾水沖洗3s，之后進行5%伊紅染液染色3min，染色后用蒸餾水沖洗10s；（3）脫水固封：染色結束后，依次將玻片放入95%乙醇溶液、二甲苯溶液中進行脫水，分別設置為兩次、三次，時間分別設置為5s，3min，脫水結束后，用中性樹膠進行封片。

1.4 切片染色評價

染色全部結束后統(tǒng)一對切片進行鏡檢與評價，根據(jù)鏡檢結果進行評分。首先判斷切片染色質量是否合格，切片是否發(fā)生污染，若不合格則記為零分，若合格，則根據(jù)胞核、胞質的染色結果進行進一步評分，評分標準為優(yōu)、良、差三個等級，分別記入3、2、1分，滿分共6分。

1.5 統(tǒng)計學分析

應用SPSS19.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，評分結果用MEAN±SD表示。對五組計量資料進行方差分析，當P＜0.05時認為有統(tǒng)計學意義。

2.結果

2.1 全自動染色機可以同時對數(shù)張切片進行染色操作，將繁瑣復雜的染色步驟程序化，從而縮短了HE染色需要的時間，提高了染色制片的效率。

2.2 全自動浸染式染色機進行染色，具有染色質量穩(wěn)定，染色評分較高，切片污染率低等特點。五種組織的染色效果相近，五組切片組間差異無統(tǒng)計學意義，P＞0.05（見表1）。切片胞核染色清晰，顏色對比強烈，細胞透明度高，視野潔凈。皮膚組織染色結果紅藍對比更加顯著。

3.討論

HE染色是石蠟切片染色最常用的方法之一，廣泛應用于醫(yī)院病理科室和病理實驗室。隨著病理技術的發(fā)展和醫(yī)療水平的逐漸提高，對于切片染色的質量和效率的要求也不斷增高，是以全自動染色機的出現(xiàn)和應用對滿足其高要求具有重要意義。因此，筆者結合實際使用經(jīng)驗，對全自動浸染式染色機的應用體會進行闡述。

表1. 染色評分統(tǒng)計表

HE染色步驟較多，因此傳統(tǒng)的手工染色操作較為復雜，需要較多的人力資源，且易受人為操作因素的影響。隨著技術的發(fā)展，手工染色的缺點更加突出。全自動染色機具有高效、穩(wěn)定、且效果出色等優(yōu)勢，逐漸代替手工染色，尤其是在規(guī)模較大的醫(yī)院中，得到了廣泛應用，成為主要的HE染色方式。本研究對五種不同組織切片染色結果進行評分并進行統(tǒng)計學分析，發(fā)現(xiàn)不同組織的染色效果近似，且評分較高，方差小，提示全自動浸染式染色機通過對染色步驟、時間精準的控制，保證對不同組織來源的切片染色質量穩(wěn)定。石蠟切片的染色顏色、對比度、細胞結構是否清晰是評價染色質量的重要標準[3]。本研究染色結果顯示，全自動浸染式染色結果細胞結構清晰，染色質量優(yōu)異，提示通過全自動浸染式染色機進行染色更容易對HE染色過程中的諸多影響因素進行控制，從而保證染色效果。

研究發(fā)現(xiàn)，全自動浸染式染色機的染色質量會隨染色批次的增加而下降，因此在應用中需要及時地更換染色試劑，增加了操作人員接觸染色試劑的頻率，存在一定的不足[4]。筆者認為其可能的原因是烤片等過程的時間欠佳，以及浸染式染色的自身特點等。因此，在實際應用的過程中，不斷優(yōu)化染色流程和設計及各個步驟的時間，探究更加環(huán)保、有效的染色試劑，對提高染色效果有重要的意義[5,6]。

綜上所述，本研究結果顯示全自動浸染式染色機的使用對石蠟切片染色具有重要的意義，為全自動浸染式染色機在病理學的應用提供依據(jù)。