食管癌術(shù)后肺部感染血漿TNF基因微衛(wèi)星多態(tài)性及與其預(yù)后的關(guān)系

師智勇 張振世 劉圣武

食管癌為臨床常見惡性腫瘤，病死風(fēng)險(xiǎn)較高，且該病發(fā)生率呈逐年升高趨勢(shì)[1-2]。食管癌早期予以治療可獲得良好的預(yù)后，對(duì)于早中期食管癌，臨床多采取手術(shù)治療方式。胸腔鏡手術(shù)因創(chuàng)傷小、術(shù)后恢復(fù)快等特點(diǎn)，現(xiàn)已在臨床大范圍使用，且手術(shù)適應(yīng)癥得到不斷擴(kuò)大，部分嚴(yán)重并發(fā)癥發(fā)生率亦得到有效控制[3-4]。然而手術(shù)具有一定的創(chuàng)傷性，會(huì)對(duì)呼吸肌造成損傷，若術(shù)后排痰不充分、呼吸鍛煉不足，則肺部感染發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)較高，繼而給術(shù)后恢復(fù)造成影響。既往臨床關(guān)于肺部感染與預(yù)后的流行病學(xué)調(diào)查與預(yù)后的危險(xiǎn)因素相關(guān)研究報(bào)道較多，而關(guān)于基因?qū)用娴难芯枯^少。多項(xiàng)研究表明，肺部感染以及疾病的進(jìn)展可能與基因多態(tài)性存在血相關(guān)性[5]。腫瘤壞死因子(TNF)基因決定機(jī)體的TNF釋放水平，具有微衛(wèi)星多態(tài)性，不同的等位基因在一定程度上決定肺部感染的易感程度與預(yù)后情況[6]?；诖?，本研究以2016年4月至2021年4月本院收治的30例食管癌術(shù)后繼發(fā)肺部感染患者為對(duì)象，探究TNF基因微衛(wèi)星多態(tài)性及其與食管癌術(shù)后肺部感染患者預(yù)后的聯(lián)系。結(jié)果示下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2016年4月至2021年4月本院收治的30例食管癌術(shù)后繼發(fā)肺部感染患者設(shè)為觀察組，同期食管癌術(shù)后未發(fā)生感染的120例患者設(shè)為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：食管癌患者均經(jīng)病理檢查證實(shí)，肺部感染經(jīng)影像學(xué)檢查及病原菌培養(yǎng)等綜合檢查確診；患者病歷有關(guān)資料齊全。排除標(biāo)準(zhǔn)：存有其他惡性腫瘤者；預(yù)計(jì)生存期<6個(gè)月；行手術(shù)前存有感染；合并凝血功能異常者；存在免疫系統(tǒng)疾病者；精神障礙或難以進(jìn)行正常交流者；存有嚴(yán)重的腦器質(zhì)性疾病者。同時(shí)依據(jù)肺部感染患者預(yù)后情況(住院28 d是否死亡)分為生存組(n=25)與死亡組(n=5)。研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且研究對(duì)象均簽署知情同意書。對(duì)照組與觀察組一般資料對(duì)比見表1，生存組與死亡組一般資料對(duì)比見表2。

1.2 方法

收集所有患者的年齡、性別、腫瘤部位、臨床分期、血液高凝狀態(tài)、有無(wú)糖尿病史、低蛋白血癥等一般資料。TNFc基因多態(tài)性分析：收集全部患者的2 ml靜脈血，以酚-氯仿法提取白細(xì)胞DNA，于-20 ℃環(huán)境下保存待檢；運(yùn)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)行DNA擴(kuò)增，PCR擴(kuò)增儀(Bio-Rad公司，型號(hào)：CFX96 Deep Well，批準(zhǔn)文號(hào)：20193220316)與其配套試劑盒，同時(shí)以聚丙烯酰胺凝膠電泳-銀染技術(shù)施以微衛(wèi)星分型。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)對(duì)照組與觀察組一般資料對(duì)比。(2)肺部感染患者生存組與死亡組一般資料對(duì)比。(3)對(duì)照組與觀察組TNFc微衛(wèi)星基因型與等位基因分布。(4)肺部感染患者生存組與死亡組TNFc微衛(wèi)星基因型與等位基因分布。(5)肺部感染患者預(yù)后Logistic回歸分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料對(duì)比

觀察組與對(duì)照組年齡、性別、腫瘤部位、臨床分期等資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；觀察組手術(shù)時(shí)間≥6 h、糖尿病史、吞咽困難占比高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組一般資料對(duì)比(例，%)

2.2 生存組與死亡組一般資料對(duì)比

生存組與死亡組性別、腫瘤部位、臨床分期、糖尿病史、吞咽困難等資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；死亡組年齡≥60歲、意識(shí)障礙、低蛋白血癥、血液高凝狀態(tài)占比高于生存組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

2.3 對(duì)照組與觀察組TNFc微衛(wèi)星基因型與等位基因分布

觀察組攜帶TNFc1/1基因型與TNFc1等位基因比例高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

2.4 肺部感染患者生存組與死亡組TNFc微衛(wèi)星基因型與等位基因分布

肺部感染患者中死亡組攜帶TNFc1/1基因型與TNFc1等位基因比例高于生存組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表4。

表2 肺部感染患者生存組與死亡組一般資料對(duì)比(例，%)

表3 對(duì)照組與觀察組TNFc微衛(wèi)星基因型與等位基因分布(例，%)

表4 肺部感染患者生存組與死亡組TNFc微衛(wèi)星基因型與等位基因分布(例，%)

2.5 肺部感染患者預(yù)后Logistic回歸分析

多因素分析顯示：血液高凝狀態(tài)、低蛋白血癥以及攜帶TNFc1/1基因型為造成患者預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素(P<0.05)，見表5。

表5 肺部感染患者預(yù)后Logistic回歸分析

3 討論

肺部感染為食管癌術(shù)后常見并發(fā)癥，會(huì)影響術(shù)區(qū)恢復(fù)，增加患者痛苦，若肺部感染控制不良，會(huì)誘發(fā)多種嚴(yán)重情況，甚至造成患者死亡[7-8]。臨床相關(guān)研究表明，食管癌肺部感染患者內(nèi)能夠檢測(cè)到血漿TNF-α水平明顯提升，TNF-α水平與感染的嚴(yán)重程度及預(yù)后相關(guān)[9-10]。TNF-α為常見的炎癥介質(zhì)，若失控性分泌，且患者機(jī)體內(nèi)源性抗炎癥反應(yīng)代償缺乏，易誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)綜合征，至?xí)斐啥嗥鞴俟δ軗p害，繼而危及患者生命安全。臨床及時(shí)明晰TNF基因的微衛(wèi)星多態(tài)性及其與患者預(yù)后的關(guān)系，對(duì)于指導(dǎo)臨床制定個(gè)體化防范措施、保障患者生命安全意義重大。

微衛(wèi)星DNA序列短，存在遺傳上的較高保守性，在染色體內(nèi)分散均勻，且數(shù)量較多，常被作為重要的遺傳記號(hào)[11-12]。TNF基因的多態(tài)性與TNF信使RNA表達(dá)及蛋白質(zhì)水平具有相關(guān)性，TNF基因多態(tài)性可在一定程度上決定個(gè)體TNF釋放水平，而TNF的水平與個(gè)體對(duì)嚴(yán)重全身感染的易感性與預(yù)后聯(lián)系緊密[13-14]。本研究結(jié)果顯示，觀察組攜帶TNFc1/1基因型與TNFc1等位基因比例高于對(duì)照組；肺部感染患者中死亡組攜帶TNFc1/1基因型與TNFc1等位基因比例高于生存組。提示攜帶TNFc1/1基因與TNFc1等位基因的患者更易發(fā)生肺部感染。原因在于當(dāng)患者經(jīng)歷病原菌入侵、感染、機(jī)體炎癥反應(yīng)時(shí)，攜帶TNFc1等位基因的患者因自身TNF-α分泌缺乏，吞噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞的免疫功能降低，炎癥反應(yīng)發(fā)展更快，且更易失控，故肺部感染發(fā)生率較高，預(yù)后更差[15]。本研究多因素分析顯示：血液高凝狀態(tài)、低蛋白血癥及攜帶TNFc1/1基因型為造成患者預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素。提示對(duì)于存在以上狀況的食管患者術(shù)后更易出現(xiàn)肺部感染，且預(yù)后更差。因此，臨床需對(duì)存在血液高凝狀態(tài)、低蛋白血癥及攜帶TNFc1/1基因型的食管癌患者進(jìn)行高度重視，積極采取針對(duì)性防范措施，以最大程度控制病情，改善患者預(yù)后。

綜上所述，TNF基因微衛(wèi)星多態(tài)性與食管癌術(shù)后肺部感染及患者預(yù)后密切相關(guān)，臨床可依據(jù)患者的TNFc基因分型預(yù)測(cè)術(shù)后肺部感染發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，盡早采取預(yù)防措施，以改善預(yù)后。