吳曉玲 李力強(qiáng) 吳偉斌 張貴鋒

摘要：目的? 為了闡明活血消癥益氣中藥復(fù)方干預(yù)肝硬化的作用機(jī)制，探討該復(fù)方對(duì)肝硬化模型大鼠肝功能、糖脂代謝紊亂、氧化損傷的影響。方法? SD大鼠40只適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為空白組10只、造模組30只?？瞻捉M自由喂養(yǎng)，造模組采用四氯化碳復(fù)合法誘導(dǎo)構(gòu)建肝硬化大鼠模型。選擇24只造模成功的肝硬化模型大鼠隨機(jī)分為模型組、吡非尼酮組、活血消癥益氣方組，每組8只。模型組自由喂養(yǎng)，吡非尼酮組、活血消癥益氣方組分別以吡非尼酮原藥粉、活血消癥益氣方中藥配方顆粒懸濁液灌胃，每日1次，干預(yù)治療8周。取大鼠肝臟組織和下腔靜脈血，肝組織切片后采用HE及Masson染色電鏡下觀察肝組織纖維化情況，采用試劑盒檢測(cè)大鼠血清AST、ALT、TP、ALB、TBil、GLU、Tg，SOD、MDA、GSH、GSH-Px水平。結(jié)果? （1）空白組大鼠肝細(xì)胞大小均勻、排列整齊，未見(jiàn)明顯壞死、變性及炎細(xì)胞浸潤(rùn)；模型組大鼠肝臟匯管區(qū)、小葉間可見(jiàn)大量膠原纖維增生，肝小葉結(jié)構(gòu)破壞明顯并伴有明顯假小葉生成；吡非尼酮組、活血消癥益氣方組大鼠肝組織纖維化、肝細(xì)胞炎性浸潤(rùn)程度均較輕，結(jié)締組織增生少，肝細(xì)胞索排列比較整齊。（2）模型組大鼠血清AST、ALT、TP、ALB、TBil、GLU、Tg，SOD、MDA、GSH、GSH-Px與空白組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。經(jīng)過(guò)8W的干預(yù)治療，吡非尼酮組、活血消癥益氣方組大鼠的AST、ALT、TBil、GLU、Tg，MDA水平顯著低于模型組（P<0.01），ALB、SOD、GSH、GSH-Px水平顯著高于模型組（P<0.01），TP水平與模型組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P≥0.05）；活血消癥益氣方組AST、ALT水平顯著低于吡非尼酮組（P<0.01），TG顯著高于吡非尼酮組（P<0.01），ALB、TBil、GLU、SOD、MDA、GSH、GSH-Px水平與吡非尼酮組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P≥0.05）。結(jié)論? 活血消癥益氣中藥復(fù)方能有效改善肝硬化模型大鼠肝功能損傷、肝纖維化，作用機(jī)制可能與調(diào)控糖脂代謝紊亂及SOD、MDA、GSH、GSH-Px等氧化應(yīng)激因子有關(guān)。

關(guān)鍵詞：活血消癥益氣方；肝硬化；糖脂代謝；過(guò)氧化物歧化酶；丙二醛；谷胱甘肽

中圖分類(lèi)號(hào)：R657.3+1????? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B????? 文章編號(hào)：1007-2349（2023）06-0076-06

肝硬化（hepatic cirrhosis，HC）是慢性肝病進(jìn)展到以肝臟彌漫性纖維化、假小葉形成及肝內(nèi)外血管增殖為主要特征的病理階段^［1］，我國(guó)約有700萬(wàn)肝硬化患者，目前除了肝移植尚無(wú)有效治療方法。肝纖維化是慢性肝病發(fā)展到肝硬化階段的必經(jīng)階段，有逆轉(zhuǎn)的可能性，阻斷肝纖維化向肝硬化轉(zhuǎn)變是治療各種慢性肝病的重要手段^［2］。研究表明，目前臨床經(jīng)過(guò)有效驗(yàn)證并得到公認(rèn)的抗纖維化西藥很少，而中醫(yī)藥對(duì)抗肝纖維化發(fā)揮著重要作用^［3］。鱉甲消癥丸是廣東省名中醫(yī)李力強(qiáng)教授發(fā)明的一種治療肝病的中藥院內(nèi)制劑（粵藥制字Z20070356，ZL20150670167.3），具有活血消癥益氣之功效，已在臨床應(yīng)用30余年，能有效抗肝纖維化和改善乙型病毒性肝炎患者肝功能^［4］，為探索其作用靶點(diǎn)和療效機(jī)制，進(jìn)一步提高臨床療效，課題組觀察了活血消癥益氣方（鱉甲消癥丸原方）的中藥配方顆粒劑對(duì)肝硬化模型大鼠肝功能損害、糖脂代謝紊亂、氧化損傷的影響，結(jié)果報(bào)告如下。

1? 材料與方法

1.1? 材料

1.1.1? 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物? 選擇SD大鼠40只（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào)SYXK（鄂）2017-0065）為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，雌雄各半，適應(yīng)性飼養(yǎng)1w，隨機(jī)分為空白組（Blank group）10只、造模組（Module building group）30只。造模成功后的大鼠24只，隨機(jī)分為模型組（Model group）、吡非尼酮組（Pirfenidone group）、活血消癥益氣方組（Huoxue Xiaozheng Yiqi recipe group，HXXZYQ group），每組8只?？瞻讓?duì)照組8只入組觀察。

1.1.2? 藥物與試劑? 中藥配方顆粒（批號(hào)1808001w，華潤(rùn)三九醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)）、吡非尼酮原料藥粉（EB03028，購(gòu)于上海士鋒生物科技有限公司），高脂飼料（購(gòu)自湖北省疾控中心動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心），四氯化碳（貨號(hào)C805332，購(gòu)自上海麥克林生化科技有限公司），谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、總膽紅素（TBil）試劑盒（貨號(hào)C010-2-1、C009-2-1、A045-2-2、A028-2-1、C019-1-1，購(gòu)自南京建成生物工程研究所），葡萄糖（GLU）/甘油三酯（TG）試劑盒（貨號(hào)F006-1-1、A110-1-1，購(gòu)自南京建成生物工程研究所），總過(guò)氧化物歧化酶（SOD）試劑盒和丙二醛（MDA）、總谷胱甘肽（GSH）/谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）試劑盒（貨號(hào)S0101M、S0131、S0056，購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司）

1.2? 方法

1.2.1? 動(dòng)物造模? 參考相關(guān)文獻(xiàn)^［5］采用四氯化碳復(fù)合法誘導(dǎo)造模：造模組大鼠給予高脂飼料+5%食用白酒溶液進(jìn)行飼養(yǎng)，空白組用普通飼料及蒸餾水進(jìn)行飼養(yǎng)。造模組第1～2 W按0.2mL/100 g體重給予40%（v/v）四氯化碳橄欖油溶液灌胃，第3～12W按0.2mL/100 g體重給予50%（v/v）的四氯化碳橄欖油溶液灌胃?？瞻捉M給予等量的橄欖油溶液。每周一、周四各灌胃1次，每周一大鼠稱(chēng)重1次，給藥劑量根據(jù)體重調(diào)整。在第12W末，隨機(jī)選擇正常組、造模組大鼠各2只，烏拉坦麻醉后取下腔靜脈血，檢測(cè)血清AST、ALT含量，觀察大鼠肝臟腫脹度，取肝組織HE染色及Masson染色后觀察肝纖維化情況。將造模組與空白組進(jìn)行對(duì)比，確定造模是否成功。

1.2.2? 干預(yù)方法? 大鼠每日給藥劑量參考《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》進(jìn)行換算。吡非尼酮組按照120mg/kg劑量給予吡非尼酮原藥粉進(jìn)行灌胃干預(yù)治療，用小量溫水將藥物研磨為混懸液，加入適當(dāng)體積的溫水配置為灌胃液，再按照1mL/200 g體重灌胃。醋鱉甲1.5 g（相當(dāng)于飲片15 g）、醋莪術(shù)1.5 g（飲片15 g）、醋三棱1.5 g（飲片15 g）、西洋參4.5 g（飲片15 g）、炙黃芪1 g（飲片10 g）、醋白芍1.5 g（飲片15 g）、炒白術(shù)1.67 g（飲片10 g）、茯苓1 g（飲片10 g）、生大黃7.5 g（飲片5 g）、生甘草1.25 g（飲片7.5 g）、人工麝香0.5 g，配方顆粒融入120mL沸水中震蕩搖勻?yàn)榛鞈乙豪鋮s備用，按照1.23mL/100 g體重給活血消癥益氣方組大鼠灌胃?？瞻讓?duì)照組和模型對(duì)照組的大鼠給予等量生理鹽水灌胃。每日干預(yù)1次，連續(xù)干預(yù)8周^［6-7］。

1.2.3? 標(biāo)本采集及指標(biāo)檢測(cè)? 大鼠肝臟HE及Masson染色：將肝臟置于4%的多聚甲醛中固定24h以上，再制備成石蠟切片，HE染色及Masson染色后鏡下觀察肝組織損傷情況及纖維化程度。肝功能檢測(cè)：大鼠下腔靜脈血以肝素抗凝，血樣3000轉(zhuǎn)低溫離心30min，再按照試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟對(duì)血樣進(jìn)行檢測(cè)，所得檢測(cè)結(jié)果換算為酶活力卡門(mén)氏單位。GLU/TG檢測(cè)：取大鼠下腔靜脈血置于滅菌的EP管內(nèi)，斜放于冰浴中，待血液自然凝固后3000轉(zhuǎn)低溫離心5min，取血清用GLu/TG試劑盒對(duì)血樣進(jìn)行檢測(cè)。SOD檢測(cè)：用抗凝管收集大鼠下腔靜脈血，顛倒混勻，3000轉(zhuǎn)低溫離心10min，取上清根據(jù)總SOD活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟對(duì)血樣進(jìn)行檢測(cè)。MDA檢測(cè)：取大鼠下腔靜脈血置于滅菌過(guò)的EP管內(nèi)，斜放于冰浴中，待血液自然凝固后4℃600 g低溫離心10min，取血清使用試劑盒對(duì)血樣進(jìn)行檢測(cè)。GSH/GSH-Px檢測(cè)：取大鼠下腔靜脈血以肝素抗凝，根據(jù)總GSH/GSH-Px檢測(cè)試劑盒要求處理血樣后，按說(shuō)明書(shū)步驟對(duì)血樣進(jìn)行檢測(cè)^［8］。

1.3? 統(tǒng)計(jì)分析? 結(jié)果數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示（x±s），采用SPSS 22.0 for windows進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間比較采用one-ANOVA進(jìn)行分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 各組大鼠肝組織病理切片結(jié)果的比較

2.1.1? HE染色結(jié)果? 空白對(duì)照組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)正常，未見(jiàn)假小葉形成；肝細(xì)胞大小基本一致，細(xì)胞核居中，圍繞-中央靜脈呈條索狀排列，未見(jiàn)肝細(xì)胞脂肪變性、壞死；匯管區(qū)無(wú)明顯的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及纖維組織增生。模型組大鼠肝組織內(nèi)可見(jiàn)大量的寬厚纖維增生，將肝小葉分割成大小不等的肝細(xì)胞結(jié)節(jié)，形成假小葉，肝索結(jié)構(gòu)模糊；匯管區(qū)可見(jiàn)明顯的纖維組織增生。吡非尼酮組和活血消癥益氣方組可見(jiàn)纖細(xì)的纖維組織增生，部分區(qū)域可見(jiàn)假小葉形成；匯管區(qū)有少量纖維組織增生。見(jiàn)圖1。

2.1.2? Masson染色結(jié)果? 空白對(duì)照組的纖維組織位于匯管區(qū)周邊，未見(jiàn)假小葉形成。模型對(duì)照組匯管區(qū)周邊大量的纖維組增生，寬厚纖維組織向周邊肝組織延伸，形成假小葉。吡非尼酮組和活血消癥益氣方組可見(jiàn)染成藍(lán)色的纖維組織增生，厚度中等并形成假小葉，但假小葉較模型對(duì)照組顯著減少。見(jiàn)圖2。

2.2? 各組大鼠血清AST、ALT、TP、ALB、TBil結(jié)果的比較? 模型組大鼠血清AST、ALT、TP、ALB、TBil與空白組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。經(jīng)過(guò)8W的干預(yù)治療，吡非尼酮組、活血消癥益氣方組大鼠血清AST、ALT、TBil水平顯著低于模型組（P<0.01），ALB水平顯著高于模型組（P<0.01），TP水平與模型組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P≥0.05）；活血消癥益氣方組大鼠血清AST、ALT水平顯著低于吡非尼酮組（P<0.01），而ALB、TBil水平與吡非尼酮組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P≥0.05）。結(jié)果見(jiàn)表1。

2.3? 各組大鼠血清GLU、TG結(jié)果的比較? 模型組大鼠血清GLU、TG顯著高于空白組（P<0.01）。經(jīng)過(guò)8W的干預(yù)治療，吡非尼酮組、活血消癥益氣方組大鼠血清GLU、TG水平顯著低于模型組（P<0.01）；活血消癥益氣方組大鼠血清GLU水平與吡非尼酮組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P≥0.05），TG顯著高于吡非尼酮組（P<0.01）。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.4? 各組大鼠血清SOD、MDA、GSH、GSH-Px結(jié)果的比較? 模型組大鼠血清SOD、MDA、GSH、GSH-Px與空白組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。經(jīng)過(guò)8W的干預(yù)治療，與模型組比較，吡非尼酮組、活血消癥益氣方組大鼠血清SOD、GSH、GSH-Px水平顯著增高（P<0.01），MDA水平顯著降低（P<0.01）；活血消癥益氣方組大鼠血清SOD、MDA、GSH、GSH-Px水平與吡非尼酮組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P≥0.05）。結(jié)果見(jiàn)表3。

3? 討論

肝纖維化是肝臟細(xì)胞外基質(zhì)的彌漫性過(guò)度沉積以及異常分布，是肝臟對(duì)各種慢性損傷的病理性修復(fù)反應(yīng)，為各類(lèi)慢性肝病向肝硬化發(fā)展過(guò)程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)和影響慢性肝病預(yù)后的重要因素^［9］。由于肝纖維化是肝損傷后機(jī)體整體參與的一種修復(fù)反應(yīng)，臨床研究發(fā)現(xiàn)針對(duì)單一靶標(biāo)的藥物效果普遍不佳，目前尚無(wú)療效明確的化學(xué)藥物或生物藥物，近幾十年的研究和實(shí)踐證實(shí)中醫(yī)藥在肝纖維化防治領(lǐng)域顯示出療效優(yōu)勢(shì)。我國(guó)已經(jīng)批準(zhǔn)的多個(gè)抗肝纖維化中藥制劑在臨床得到廣泛應(yīng)用，療效確切，未見(jiàn)不良反應(yīng)報(bào)道^［10］。廣東省名中醫(yī)李力強(qiáng)教授以《太平圣惠方》鱉甲丸為基礎(chǔ)，研制了活血消癥益氣的中藥復(fù)方鱉甲消癥丸，用于治療肝硬化、肝炎等，30余年的臨床應(yīng)用表明，該中藥復(fù)方對(duì)預(yù)防肝硬化門(mén)靜脈高壓食管胃靜脈破裂出血、抗肝纖維化等有顯著效果^［11-12］，能明顯改善肝硬化患者肝區(qū)疼痛、黃疸、腹水、蜘蛛痣、肝掌、舌邊瘀斑、脾腫大等癥狀；顯著降低門(mén)靜脈壓力和食管靜脈壓力，改善食管靜脈曲張，預(yù)防食管胃靜脈出血；改善肝纖維化，降低肝內(nèi)血管和門(mén)體側(cè)支血管阻力。

本研究發(fā)現(xiàn)，模型組大鼠血清AST、ALT、TP、ALB、TBil、GLU、Tg，SOD、MDA、GSH、GSH-Px與空白組比較有顯著差異，模型組大鼠肝組織內(nèi)大量寬厚纖維增生并分割正常的肝小葉，形成大小不等的肝細(xì)胞結(jié)節(jié)即假小葉；假小葉內(nèi)肝細(xì)胞肝索結(jié)構(gòu)模糊，肝細(xì)胞未見(jiàn)異型性；匯管區(qū)大量纖維組織增生?；诟闻K在糖脂代謝中的核心地位，各種病因所致肝硬化都可能影響肝臟調(diào)控糖脂代謝的功能，糖脂代謝紊亂可以繼發(fā)于肝硬化，也可以是肝硬化的病因，或與肝硬化伴隨發(fā)生^［13］。高琦等^［14］發(fā)現(xiàn)，肝硬化患者干預(yù)治療后血糖及TC顯著降低，提示隨著病情的好轉(zhuǎn)糖脂代謝紊亂得到了改善；宋健等^［15］發(fā)現(xiàn)，肝硬化患者糖脂代謝異常隨著肝功能Child-Pugh分級(jí)增高而更加明顯。氧化應(yīng)激在肝纖維化的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要作用，在各種疾病所致的肝纖維化過(guò)程中均有不同程度的氧化應(yīng)激參與^［16-17］。SOD是一種抗氧化的酶，主要功能是保護(hù)氧化性損傷；MDA由多不飽和脂肪酸過(guò)氧化分解產(chǎn)生，被用來(lái)間接反應(yīng)機(jī)體的自由基代謝變化及細(xì)胞的損傷程度^［18］；肝硬化患者血清中普遍存在SOD低表達(dá)、MDA高表達(dá)情況^［19-20］。GSH是重要的細(xì)胞抗氧化劑，能有效清除氧自由基，解毒脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的親電性產(chǎn)物，維持蛋白質(zhì)的巰基狀態(tài)，增強(qiáng)抗氧化能力，從而減輕肝纖維化^［21］。GSH-Px以GSH為底物和SOD、過(guò)氧化氫酶等一起清除機(jī)體活性氧，從而減輕和阻止活性氧的過(guò)氧化作用，研究顯示肝硬化患者肝組織GSH-Px較正常人顯著降低^［22-23］。臨床研究證實(shí)吡非尼酮具有廣譜抗肺、心、肝、腎纖維化及抗炎、抗氧化作用^［24］。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)^［25-26］，吡非尼酮能有效改善大鼠肝纖維化，作用機(jī)制可能與抑制脂質(zhì)過(guò)氧化、減輕炎性反應(yīng)、抑制肝星狀細(xì)胞的活化及增殖、調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)的合成與降解等有關(guān)，可通過(guò)抑制氧化應(yīng)激產(chǎn)物MDA含量、增加SOD活性而減輕肝纖維化。在本研究中，吡非尼酮組大鼠較模型組大鼠肝纖維化、肝細(xì)胞炎性浸潤(rùn)程度均較顯著減輕，結(jié)締組織增生減少，肝細(xì)胞索排列比較整齊，血清AST、ALT、TBil、GLU、Tg，MDA水平顯著低于模型組，血清ALB、SOD、GSH、GSH-Px水平顯著高于模型組，這與既往研究結(jié)果一致，進(jìn)一步證實(shí)了吡非尼酮治療肝纖維化的有效性。

活血消癥益氣方由醋鱉甲、醋三棱、醋莪術(shù)、人工麝香、西洋參、炙黃芪、醋白芍、炒白術(shù)、茯苓、生大黃、生甘草等組成；醋鱉甲入肝消積、軟堅(jiān)散結(jié)，麝香通竅活絡(luò)、活血消癥，為君藥；醋莪術(shù)與醋三棱活血行氣、消癥止痛，為臣藥；西洋參和炙黃芪補(bǔ)益氣血、扶益正氣，醋白芍柔肝止痛，炒白術(shù)和茯苓健脾益氣、利水祛濕，共為佐藥；生大黃活血化瘀、蕩滌濕熱，生甘草緩急止痛、調(diào)和諸藥，共為使藥。諸藥合用，共奏益氣活血、化瘀消癥之功效，標(biāo)本同治。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)8W的活血消癥益氣方干預(yù)治療，病理切片顯示活血消癥益氣方組大鼠肝組織纖維化、肝細(xì)胞炎性浸潤(rùn)程度明顯減輕，結(jié)締組織增生顯著減少，肝細(xì)胞索基本排列整齊，血清AST、ALT、TBil、GLU、Tg，MDA水平顯著低于模型組，血清ALB、SOD、GSH、GSH-Px水平顯著高于模型組。表明活血消癥益氣方可以顯著改善肝硬化大鼠的肝纖維化和肝功能，作用機(jī)制可能與調(diào)控糖脂代謝紊亂及SOD、MDA、GSH、GSH-Px等氧化應(yīng)激因子相關(guān)?；钛Y益氣方組血清AST、ALT水平低于吡非尼酮組，TG高于吡非尼酮組，而TP、ALB、TBil、GLU、SOD、MDA、GSH、GSH-Px水平與吡非尼酮組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明血消癥益氣方改善肝硬化模型大鼠肝纖維化、糖代謝紊亂、氧化損傷的效果與吡非尼酮相當(dāng)，而在改善肝功能、脂代謝紊亂方面的效果比吡非尼酮略差。

綜上所述，經(jīng)過(guò)8W的干預(yù)治療，吡非尼酮組、活血消癥益氣方組大鼠AST、ALT、ALB、TBil、GLU、Tg，SOD、MDA、GSH、GSH-Px與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，病理切片結(jié)果提示肝纖維化、肝細(xì)胞損害明顯好轉(zhuǎn)，表明吡非尼酮、活血消癥益氣方對(duì)肝硬化大鼠肝功能損傷、肝纖維化、糖脂代謝紊亂、氧化應(yīng)激反應(yīng)均能有效抑制或一定程度逆轉(zhuǎn)?；钛Y益氣方值得在臨床用于肝硬化的治療。

參考文獻(xiàn)：

［1］徐小元，丁惠國(guó)，李文剛，等.肝硬化診治指南［J］.實(shí)用肝臟病雜志，2019，22（6）：770-786.

［2］潘洋，鞏淑萍.中西醫(yī)結(jié)合治療慢性乙型肝炎肝纖維化的臨床研究［C］.第二十九屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集，2017：846-848.

［3］徐小元.解讀肝硬化診治指南難點(diǎn)與新穎之處［J］.實(shí)用肝臟病雜志，2020，23（1）：4-6.

［4］黃勝英，吳鐵，李力強(qiáng)，等.鱉甲消癥丸抗大鼠肝纖維化的實(shí)驗(yàn)研究［J］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2004（5）：56-58+96.

［5］林文健，李婕，郭芬芬，等.大鼠肝硬化模型建立探討［J］.嶺南急診醫(yī)學(xué)雜志，2017，22（4）：310-3.

［6］吳曉玲，李力強(qiáng)，吳偉斌，等.活血消癥益氣方對(duì)肝硬化模型大鼠肝功能與血管內(nèi)皮功能及炎性因子的影響［J］.實(shí)用中醫(yī)藥雜志，2021，37（5）：719-723.

［7］吳偉斌，張貴鋒，李力強(qiáng)，等.活血消癥益氣方對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1誘導(dǎo)的AML12細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制研究［J］.中藥新藥與臨床藥理，2021，32（9）：1276-1283.

［8］吳曉玲，李力強(qiáng)，段文彪，等.活血消癥益氣方對(duì)肝硬化門(mén)靜脈高壓癥大鼠肝功能及血清PDGF、TGF-β1、CTGF的影響［J］.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2021，59（13）：37-41+45+193.

［9］陸倫根，尤紅，謝渭芬，等.肝纖維化診斷及治療共識(shí)（2019年）［J］.臨床肝膽病雜志，2019，35（10）：2163-2172.

［10］徐列明，劉平，沈錫中，等.肝纖維化中西醫(yī)結(jié)合診療指南（2019年版）［J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2019，39（11）：1286-1295.

［11］李力強(qiáng)，黃勝芙，賓建平，等.鱉甲消癥丸治療慢性乙型肝炎的臨床觀察［J］.實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志，1998（3）：43-46.

［12］李力強(qiáng)，黃勝英，賓建平，等.鱉甲消癥丸預(yù)防肝硬變患者食道胃底靜脈曲張破裂出血的臨床研究［J］.中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志，2000（S1）：75-77.

［13］薛飛玥，李光明.肝硬化相關(guān)糖脂代謝紊亂研究進(jìn)展［J］.胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2018，27（12）：1452-1455.

［14］高琦.腸道益生菌輔治對(duì)非酒精性脂肪性肝硬化患者糖脂代謝、氧化損傷和肝功能的影響［J］.微量元素與健康研究，2019，36（2）：20-21.

［15］宋健，李紅亮，戚旭飛，龔建德.酒精性肝硬化患者糖脂代謝與肝功能Child-Pugh分級(jí)關(guān)系的研究［J］.國(guó)際消化病雜志，2019，39（2）：128-131.

［16］趙杰，齊永芬，魚(yú)艷榮.氧化應(yīng)激在肝纖維化發(fā)生發(fā)展中的作用［J］.臨床肝膽病雜志，2019，35（9）：2067-2071.

［17］Zhang J N，Qu H Y，Zhang J M，et al.Polysaccharide from Phellinus igniarius alleviates oxidative stress and hepatic fibrosis in Schistosoma japonicum-infected mice［J］.Zhongguo xue xi chong bing fang zhi za zhi，2019，31（6）：4405-4418.

［18］白劍，肖漓，韓永，等.?；撬釋?duì)肝纖維化模型小鼠肝組織超氧化物歧化酶和丙二醛的影響［J］.中國(guó)組織工程研究，2015，19（27）：4379-4383.

［19］黃國(guó)孟.奧曲肽治療肝硬化消化道出血的療效及對(duì)血清膽堿酯酶、氧化應(yīng)激水平的影響［J］.黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2018，41（6）：131-132.

［20］Qin Dong-Mei，Wang Xin-Bing，Zou Nan，et al.Gas Chromatography-Mass Spectrometry（GC-MS）Analysis of the Volatile Oil of Cichorium Glandulosum Boiss et Huet and its Effects on Carbon Tetrachloride-Induced Liver Fibrosis in Rats［J］.Medical science monitor：international medical journal of experimental and clinical research，2019，25（8）：3432-3445.

［21］董亞芬，申風(fēng)俊.肝纖維化形成過(guò)程中血清ROS和GSH的水平變化［J］.山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，50（11）：1552-1555.

［22］蔡曉波，陸倫根.谷胱甘肽過(guò)氧化物酶與肝臟疾?。跩］.世界華人消化雜志，2009，17（32）：3279-3282.

［23］Farouk K.El-Baz，Abeer A.A.Salama，Rehab A.Hussein.Dunaliella salina microalgae oppose thioacetamide-induced hepatic fibrosis in rats［J］.Toxicology Reports，2020，7（4）：1721-1736.

［24］李麗，陽(yáng)惠湘.吡非尼酮抗肝纖維化機(jī)制［J］.國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志，2010，30（3）：220-225.

［25］Mostafa M.Salah，Ahmed A.Ashour，Tamer M.Abdelghany，et al.Pirfenidone alleviates concanavalin A-induced liver fibrosis in mice［J］.Life Sciences，2019，12（2）：2391-2403.

［26］Ullah Aftab，Wang Kaikai，Wu Pengkai，et al.CXCR4-targeted liposomal mediated co-delivery of pirfenidone and AMD3100 for the treatment of TGFβ-induced HSC-T6 cells activation［J］.International journal of nanomedicine，2019，6（1）：2927-2944.

（收稿日期：2022-11-10）