■ 張 偉 段佳燚 馬銘環(huán) 郭振環(huán) 馬 霞
(1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)海都學(xué)院,山東萊陽(yáng) 265200;2.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院,山東濰坊 261061;3.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,山東青島 266109;4.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院動(dòng)物醫(yī)藥學(xué)院,河南鄭州 450046)
茵陳為菊科植物濱蒿或茵陳蒿的干燥地上部分[1],性味苦、辛,微寒;歸脾、胃、肝、膽經(jīng);主治清濕熱,利膽退黃。大黃為蓼科植物掌葉大黃、唐古特大黃或藥用大黃的干燥根及根莖[1],性味苦,寒;歸胃、大腸、肝、脾經(jīng);主治清熱瀉下,利腸通便,涼血止血,解毒活血,逐瘀通經(jīng)?!耙痍?大黃”作為利濕退黃的經(jīng)典藥對(duì),最早出自茵陳蒿湯,兩藥合用,利濕與泄熱同行,二便通利,濕熱得行,瘀熱得下,黃疸自退[2-3]。茵陳和大黃作為藥對(duì),在許多古方和中成藥制劑中被使用,例如茵陳蒿湯、茵陳膽道湯、黃疸茵陳顆粒、柴胡茵陳湯、茵陳四苓顆粒等,且其不同的配伍規(guī)律展現(xiàn)出不同的藥效[4-5]。
綠原酸類(lèi)物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜,合成成本高昂。在自然界中綠原酸卻來(lái)源廣泛,主要被發(fā)現(xiàn)存在于高等雙子葉植物和蕨類(lèi)植物中,例如菊科蒿屬植物(如向日葵)、忍冬科忍冬屬(如金銀花)、杜仲科杜仲屬(如杜仲)。研究發(fā)現(xiàn),不同植物所含綠原酸種類(lèi)不同,而在茵陳中含量較高的則為1,5-二咖啡??鼘幩?,隨后才是綠原酸和異綠原酸A。其具有抗氧化活性、抗菌抗病、進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)以及調(diào)節(jié)糖脂代謝的功能[6]。
茵陳含有多種化學(xué)成分,主要類(lèi)型為黃酮、香豆素、有機(jī)酸、稀炔、色原酸、醛酮、膽堿等[7]。研究發(fā)現(xiàn),茵陳具有顯著的保肝利膽作用、抗炎、抗氧化、抗腫瘤、抑菌和抗病毒等作用。相關(guān)藥理機(jī)制為茵陳及其單體化合物可調(diào)控PI3KIAktNF-κB等信號(hào)通路,影響caspase-1、Smad3等蛋白和iNOS、COX-2、TNF-α等細(xì)胞因子的表達(dá),發(fā)揮其保肝利膽、退黃利濕、抗炎、抗病毒、抗腫瘤和神經(jīng)系統(tǒng)等藥理活性[8]。大黃含有蒽醌、鞣質(zhì)類(lèi)、有機(jī)酸、苷類(lèi)化合物和揮發(fā)油等化學(xué)物質(zhì)。在臨床用藥過(guò)程中,大黃發(fā)揮主要藥理作用的活性成分為蒽醌,包括游離及結(jié)合型大黃素、大黃酸、大黃素甲醚等[9-10]。大黃酸可通過(guò)調(diào)節(jié)腸道菌群,間接改變腸道嘌呤代謝,從而減輕結(jié)腸炎。大黃提取液干預(yù)腦出血模型大鼠后,可以顯著上調(diào)IL-4、IL-10 表達(dá),下調(diào)TNF-α、IL-6、IFN-γ表達(dá),發(fā)揮抗炎作用[11]。本試驗(yàn)探討茵陳-大黃不同配比對(duì)綠原酸和蒽醌類(lèi)成分的影響,篩選出二者最佳配伍比例。旨在為開(kāi)發(fā)新藥提供理論依據(jù)。
大黃(亳州藥材市場(chǎng))、茵陳(亳州藥材市場(chǎng))、綠原酸(長(zhǎng)沙上禾生物科技有限公司,CAS 號(hào):327-97-9,純度:HPLC>98%)、大黃酸(長(zhǎng)沙上禾生物科技有限公司,CAS 號(hào):478-43-3,純度:HPLC>98%)、蘆薈大黃酸(上海詩(shī)丹德標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)有限公司,CAS 號(hào):481-72-1,純度:HPLC>98%)、大黃素甲醚(長(zhǎng)沙上禾生物科技有限公司,CAS 號(hào):521-61-9,純度:HPLC>98%),色譜級(jí)甲醇、色譜級(jí)乙腈(天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司)。
高效液相色譜儀(Agilent Technologies)、高速離心機(jī)(賽默飛世爾科技有限公司)、超聲波清洗機(jī)(鄭州生元儀器有限公司)、色譜柱(常熟市雙杰機(jī)器測(cè)試儀器)、循環(huán)水真空泵(鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司)。
1.2.1 茵陳與大黃配伍的提取方法
1.2.1.1 水煎法
大黃后下:按茵陳-大黃質(zhì)量比1∶1、1∶2、2∶1 稱(chēng)取藥材,分別加入清水適量,浸泡30 min,茵陳先煎煮20 min,再加入大黃煎煮15 min,二煎后濃縮至溶液中藥材含量約為1 g/mL,濃縮藥液放入-20 ℃冷凍保存。
茵陳-大黃同時(shí)下:混合浸泡茵陳與大黃30 min,煎煮40 min,過(guò)濾,濾液備用;濾渣中加入適量清水,煎煮20 min,過(guò)濾,合并兩次濾液,濃縮至溶液中藥材含量約為1 g/mL濃縮藥液放入-20 ℃冷凍保存。
茵陳、大黃單味藥的煎煮方法同茵陳-大黃同時(shí)下的煎煮方法。
1.2.1.2水煎醇沉法
取上述水煎法中大黃后下,茵陳、大黃同時(shí)下的全部水煮液各一半,分成兩份置于燒杯中,加入95%乙醇溶液適量,使溶液中乙醇最終濃度一份為70%,一份為80%;靜置48 h,抽濾,回收乙醇,沉淀放入-20 ℃冷凍保存。
1.2.2 茵陳與大黃配伍中綠原酸與蒽醌類(lèi)成分的含量測(cè)定
1.2.2.1 綠原酸含量的測(cè)定
參照中華人民共和國(guó)獸藥典二部茵陳項(xiàng)下含量測(cè)定方法[12]。
① 色譜條件:采用十八烷基硅烷鍵合硅膠柱;流動(dòng)相:乙腈∶0.1%磷酸溶液=20∶80;檢測(cè)波長(zhǎng):327 nm;柱溫:30 ℃;流速:1.00 mL/min;
② 對(duì)照品溶液的制備:稱(chēng)取綠原酸對(duì)照品適量,50%甲醇制成每毫升含綠原酸70 μg的溶液。
③ 供試品溶液的制備:將原藥液按1∶5加入50%甲醇,超聲處理30 min,3 000 r/min 離心10 min;吸取1 mL 上清液置于5 mL 容量瓶中,50%甲醇定容,搖勻,過(guò)濾,即得供試品溶液。
④含量測(cè)定:將對(duì)照品及供試品溶液注入液相色譜儀檢測(cè),根據(jù)對(duì)照品峰面積和濃度計(jì)算含量。
1.2.2.2 蒽醌類(lèi)成分的含量測(cè)定
參照中華人民共和國(guó)獸藥典中大黃項(xiàng)下含量測(cè)定方法[12]。
① 色譜條件:采用十八烷基硅烷鍵合硅膠柱;流動(dòng)相:甲醇∶0.1%磷酸溶液=85∶15;檢測(cè)波長(zhǎng):254 nm;柱溫:30 ℃;流速:1.00 mL/min。
② 對(duì)照品溶液的制備:稱(chēng)量大黃素甲醚、大黃酸及蘆薈大黃素對(duì)照品加入50%甲醇充分溶解,制備成混合對(duì)照品溶液(含大黃酸、蘆薈大黃素32 μg/mL,大黃素甲醚16 μg/mL)。
③ 含量測(cè)定:供試品溶液制備同綠原酸含量測(cè)定樣品處理方法,將樣品注入液相色譜儀,根據(jù)樣品所測(cè)峰面積與對(duì)照品峰面積計(jì)算各成分含量。
1.2.3 統(tǒng)計(jì)與分析
所得試驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用GraphPad Prism 7 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理。**表示差異顯著(P<0.05),ns表示差異不顯著(P>0.05)。
圖1所示,水煎法提取液中,茵陳-大黃1∶1、1∶2、2∶1 三種不同配伍比例按照大黃同時(shí)下以及大黃后下中測(cè)定的綠原酸含量均高于茵陳單味藥中折算后綠原酸含量的理論值,且茵陳-大黃1∶1 提取出綠原酸的含量相較于其他組顯著升高(P<0.05)。
圖1 水煎原藥液中綠原酸含量的測(cè)定結(jié)果
如圖2(A)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為70%時(shí)的上清液中,茵陳-大黃1∶1、茵陳-大黃1∶2后下兩種配伍測(cè)定的綠原酸含量高于茵陳單味藥折算后綠原酸的含量的理論值;其余配伍所測(cè)定的綠原酸含量則均低于茵陳單味藥折算后綠原酸的含量的理論值,且茵陳-大黃1∶1 提取的綠原酸含量顯著高于茵陳-大黃2∶1 以及茵陳-大黃1∶1 后下、1∶2 后下、2∶1 后下(P<0.05)。如圖2(B)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為70%時(shí)的沉淀中,茵陳-大黃1∶1、1∶2、2∶1 三種不同配伍比例按照大黃同時(shí)下以及大黃后下測(cè)定的綠原酸含量均高于茵陳單味藥折算后綠原酸含量的理論值,且茵陳-大黃1∶1 提取的綠原酸含量顯著高于其余組(P<0.05)。如圖2(C)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為80%時(shí)的上清液中,茵陳-大黃1∶1 后下配伍測(cè)定的綠原酸含量低于茵陳單味藥折算后綠原酸的含量的理論值;其余配伍所測(cè)定的綠原酸含量則均高于茵陳單味藥折算后綠原酸的含量的理論值,且茵陳-大黃1∶1提取的綠原酸含量顯著高于茵陳-大黃2∶1以及茵陳-大黃1∶1 后下、1∶2 后下、2∶1 后下(P<0.05)。如圖2(D)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為80%時(shí)的沉淀中,茵陳-大黃1∶2、2∶1后下兩種配伍測(cè)定的綠原酸含量低于茵陳單味藥折算后的綠原酸含量的理論值;其余配伍所測(cè)定的綠原酸含量均高于茵陳單味藥折算后綠原酸的含量的理論值,且茵陳-大黃1∶1提取的綠原酸含量顯著高于茵陳-大黃1∶2 以及茵陳-大黃1∶1后下、1∶2后下、2∶1后下(P<0.05)。
圖2 綠原酸含量的測(cè)定結(jié)果
2.2.1 水煎原藥液中蒽醌類(lèi)成分含量測(cè)定
如圖3(A)所示:水煎法提取液中,茵陳-大黃1∶1 后下和1∶2 后下兩種配伍測(cè)定的大黃酸的含量低于大黃單味藥折算后大黃酸的含量的理論值;其余4 種配伍中所測(cè)定的大黃酸的含量均高于大黃單味藥折算后大黃酸的理論值,且茵陳-大黃1∶2 提取出大黃酸含量顯著高于其余組(P<0.05)。圖3(B)所示:水煎法提取液中,茵陳-大黃1∶1、1∶2、2∶1 三種不同配伍比例按照大黃同時(shí)下以及大黃后下中測(cè)定的蘆薈大黃素含量均高于茵陳單味藥中折算后蘆薈大黃素含量的理論值,且茵陳-大黃1∶1 后下、1∶2 后下以及茵陳-大黃1∶2 提取出蘆薈大黃素含量顯著高于茵陳-大黃1∶1(P<0.05)。圖3(C)所示:水煎法提取液中,茵陳-大黃1∶1 后下、1∶2 后下兩種配伍測(cè)定的總蒽醌成分含量低于大黃折算后總蒽醌成分含量的理論值;而其余4 種配伍測(cè)定的總蒽醌成分含量均高于大黃折算后總蒽醌含量的理論值,且茵陳-大黃1∶2提取出總蒽醌含量顯著高于除菌陳-大黃1∶3之外的其余組(P<0.05)。
圖3 水煎原藥液中蒽醌類(lèi)成分含量測(cè)定結(jié)果
2.2.2 大黃酸結(jié)果測(cè)定
如圖4(A)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為70%時(shí)的上清液中,茵陳-大黃1∶1、1∶2、2∶1 三種不同配伍比例按照大黃同時(shí)下以及大黃后下測(cè)定的大黃酸含量均高于大黃單味藥折算后大黃酸含量的理論值,且茵陳-大黃1∶1 提取出大黃酸含量顯著高于其余組(P<0.05)。圖4(B)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為70%時(shí)沉淀中,茵陳-大黃1∶1 時(shí)測(cè)定的大黃酸的含量高于大黃單味藥折算后的大黃酸的含量理論值;其余配伍比例所測(cè)定的大黃酸的含量則低于大黃單味藥折算后大黃酸含量的理論值,且茵陳-大黃1∶1 提取出大黃酸含量顯著高于其余組(P<0.05)。圖4(C)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為80%時(shí)的上清液中,茵陳-大黃1∶1、1∶2、2∶1 三種配伍測(cè)定的大黃酸含量高于大黃單味藥折算后大黃酸含量的理論值;而其余3 種配伍所測(cè)定的大黃酸的含量則均低于大黃單味藥折算后大黃酸含量的理論值,且茵陳-大黃1∶2提取出大黃酸含量顯著高于其余組(P<0.05)。圖D所示:茵陳-大黃1∶1、1∶2 后下兩種配伍測(cè)定的大黃酸含量低于大黃單味藥折算后大黃酸含量的理論值;而其余4 種配伍測(cè)定的大黃酸含量則均高于大黃單味藥折算后大黃酸含量的理論值,且茵陳-大黃1∶2提取出大黃酸含量顯著高于其余組(P<0.05)。
圖4 大黃酸含量的測(cè)定結(jié)果
2.2.3 蘆薈大黃素結(jié)果測(cè)定
如圖5(A)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為70%時(shí)的上清液中,茵陳-大黃1∶1 后下、1∶2 后下兩種配伍測(cè)定的蘆薈大黃素含量低于大黃單味藥折算后蘆薈大黃素含量的理論值;而其余配伍所測(cè)定的蘆薈大黃素的含量則均高于大黃單味藥折算后蘆薈大黃素含量的理論值,且茵陳-大黃1∶1 提取出蘆薈大黃素的含量顯著高于除茵陳-大黃1∶2 外的其余組(P<0.05),與茵陳-大黃1∶2 無(wú)顯著差異(P>0.05)。圖5(B)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為70%時(shí)的沉淀中,茵陳-大黃1∶1、1∶2、2∶1 3種不同配伍比例按照大黃同時(shí)下以及大黃后下測(cè)定的蘆薈大黃素的含量均高于大黃單味藥折算后蘆薈大黃素含量的理論值,且茵陳-大黃2∶1 提取出蘆薈大黃素的含量顯著高于其余組(P<0.05)。圖5(C)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為80%時(shí)的上清液中,茵陳-大黃1∶1、1∶2、2∶1 3 種不同配伍比例按照大黃同時(shí)下以及大黃后下測(cè)定的蘆薈大黃素含量均低于大黃單味藥折算后蘆薈大黃素含量的理論值,且茵陳-大黃1∶2 提取出蘆薈大黃素的含量顯著高于其余組(P<0.05)。圖5(D)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為80%時(shí)的沉淀中,茵陳-大黃1∶1、1∶2、2∶1 三種不同配伍比例按照大黃同時(shí)下以及后下測(cè)得的蘆薈大黃素含量均高于大黃單味藥折算后蘆薈大黃素含量的理論值,且茵陳-大黃2∶1提取出蘆薈大黃素的含量顯著高于其余組(P<0.05)。
圖5 蘆薈大黃素含量的測(cè)定結(jié)果
2.2.4 總蒽醌成分含量測(cè)定
如圖6(A)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為70%時(shí)的上清液中,茵陳-大黃1∶1、1∶2、2∶1 3 種不同配伍比例按照大黃同時(shí)下以及大黃后下測(cè)定的總蒽醌成分的含量均高于折算后總蒽醌成分含量的理論值,且茵陳-大黃1∶1 提取出總蒽醌含量顯著高于其余組(P<0.05)。圖6(B)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為70%時(shí)的沉淀中,茵陳-大黃1∶1和2∶1兩種配伍測(cè)定的總蒽醌成分的含量高于折算后總蒽醌成分的含量的理論值;而其余4 種配伍測(cè)定的總蒽醌成分的含量均低于折算后總蒽醌成分的含量的理論值,且茵陳-大黃1∶1提取出總蒽醌含量顯著高于其余組(P<0.05)。圖6(C)所示:水煎醇沉法醇沉濃度為80%時(shí)的上清液中,茵陳-大黃1∶2、2∶1 兩種配伍測(cè)定的總蒽醌成分的含量均高于折算后總蒽醌成分含量的理論值;而其余四種配伍測(cè)定的總蒽醌成分含量均低于折算后總蒽醌成分的含量的理論值,且茵陳-大黃1∶2 提取出總蒽醌含量顯著高于其余組(P<0.05)。圖D所示:水煎醇沉法醇沉濃度為80%時(shí)的沉淀中,茵陳-大黃1∶1、1∶2、2∶1 三種不同配伍比例按照大黃同時(shí)下以及大黃后下測(cè)定的總蒽醌成分的含量均高于折算后總蒽醌成分的含量的理論值,且茵陳-大黃1∶2提取出總蒽醌含量顯著高于茵陳-大黃2∶1的其余組(P<0.05),與茵陳-大黃2∶1無(wú)顯著差異(P>0.05)。
圖6 總蒽醌成分含量的測(cè)定結(jié)果
綠原酸(chlorogenic acid,CGA)是一種酚酸類(lèi)化合物,由咖啡酸的1 位羧基和奎尼酸的3 位羥基縮合而成,是植物細(xì)胞通過(guò)有氧呼吸經(jīng)莽草酸途徑合成的一種苯丙素類(lèi)物質(zhì),具有抗氧化、抗炎、抗菌、保護(hù)肝臟的作用。眾多研究發(fā)現(xiàn),添加CGA 在提高豬的生長(zhǎng)性能、抗氧化能力、增強(qiáng)其機(jī)體免疫力以及腸道屏障等方面有重要作用[6]。王宇等[13]研究發(fā)現(xiàn),日糧中添加250、500、1 000 mg/kg CGA 后,斷奶仔豬的小腸指數(shù)和小腸絨毛/隱窩比均有所增加,腸道形態(tài)得到改善。Chen 等[14]研究表明,在日糧中添加600 mg/kg CGA可以通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)、提高抗氧化能力和改變盲腸微生物群組成來(lái)改善急性熱應(yīng)激損傷。
試驗(yàn)得出,在水煎提取法中,茵陳-大黃1∶1、1∶2、2∶1三個(gè)不同配比按照大黃同時(shí)下以及大黃后下測(cè)定的綠原酸含量均高于茵陳單味藥的含量,且茵陳-大黃配伍比例為1∶1 時(shí)測(cè)定的綠原酸含量最高。韓晉等[15]試驗(yàn)得出茵陳與大黃合煎后,綠原酸的含量提高,本試驗(yàn)結(jié)果與此結(jié)果相似。因此,可以說(shuō)明,在水煎法提取工藝中,茵陳與大黃兩者配伍后,對(duì)綠原酸的溶出率均有促進(jìn)作用,且最佳配比為茵陳-大黃1∶1。
在水煎醇沉提取方法中,醇沉濃度為70%時(shí)的沉淀中,測(cè)定的綠原酸含量均高于茵陳單味藥的含量,且茵陳-大黃配伍比例為1∶1 時(shí)測(cè)定的綠原酸含量最高。劉麗清等[16]研究得出,綠原酸的最佳醇沉濃度為70%,該試驗(yàn)的結(jié)果顯示醇沉濃度為70%,提取綠原酸的含量最高。因此,在水煎醇沉法提取工藝中,茵陳與大黃兩者配伍后,對(duì)綠原酸的溶出率均有促進(jìn)作用,且最佳配比為茵陳-大黃1∶1。
蒽醌類(lèi)成分是目前大黃中研究最多的活性成分,同時(shí)也是大黃中的主要活性成分。蘆薈大黃素是蒽醌類(lèi)成分之一。劉美艷等[17]研究發(fā)現(xiàn),蘆薈大黃素可抑制大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌等生長(zhǎng)。
在水煎提取法中,茵陳與大黃配伍比例為1∶1、1∶2、2∶1時(shí)總蒽醌成分的含量高于大黃單味藥的含量,且茵陳-大黃配伍比例為1∶2 時(shí)總蒽醌成分含量最高;而茵陳-大黃配伍比例為1∶1后下和1∶2后下時(shí)總蒽醌成分含量低于大黃單味藥的含量,可能由于大黃后下煎煮時(shí)間過(guò)短,蒽醌類(lèi)成分沒(méi)有完全溶出。有研究表明,大黃中的結(jié)合型蒽醌及鞣質(zhì)等成分均既溶于水又溶于醇,但大黃中的游離型蒽醌及茵陳中具有保肝活性的香豆素類(lèi)成分極性較小,易溶于醇難溶于水[18],因此我們要考慮后期的提取工藝。
在水煎醇沉提取方法中,醇沉濃度為70%時(shí)的上清液中,茵陳-大黃的配伍為1∶1 時(shí)總蒽醌成分測(cè)定的含量最高。醇沉濃度為70%時(shí)的沉淀中,茵陳-大黃1∶1時(shí)總蒽醌成分測(cè)定的含量最高。
醇沉濃度為80%時(shí)的上清液中,茵陳-大黃1∶2時(shí)總蒽醌成分測(cè)定的含量最高。在醇沉濃度為80%時(shí)的沉淀中,茵陳-大黃的配伍為1∶2 時(shí)總蒽醌成分測(cè)定的含量最高。
由于在醇沉濃度為80%時(shí),沉淀中的6 個(gè)全部配伍比例及上清液中同時(shí)下的3 個(gè)配伍比例中的總蒽醌成分的含量均增高,可以說(shuō)明不同配伍比例及大黃的加入時(shí)間對(duì)大黃蒽醌類(lèi)成分的含量具有一定的影響性,劉永濤等[19]試驗(yàn)研究數(shù)據(jù)表明:大黃的瀉下成分蒽醌類(lèi)成分在15~20 min達(dá)到最大值;因此,大黃加入的時(shí)間也決定了蒽醌類(lèi)成分的釋放量。試驗(yàn)表明,茵陳-大黃的配伍比例為1∶2 時(shí),提取到蒽醌類(lèi)成分的含量最高,這與張永紅[20]實(shí)驗(yàn)得出,大黃蒽醌類(lèi)成分的最佳醇沉濃度為80%,與試驗(yàn)結(jié)果相一致。
上述的試驗(yàn)結(jié)果表明,茵陳-大黃配伍后,無(wú)論是采用水煎法亦或是水煎醇沉法,所得到的綠原酸和蒽醌類(lèi)成分的含量均高于單味藥所得到的。由于傳統(tǒng)中藥復(fù)方湯劑在使用上的不便等原因,近年來(lái)單味中藥精制顆粒開(kāi)始用于臨床。單味中藥精制顆粒是將批量的單味中藥飲片分別加水煎煮、濃縮、干燥、分裝。使用時(shí)按處方混合;開(kāi)水沖服即得,相當(dāng)于中藥湯劑的分煎。傳統(tǒng)中藥湯劑是按方配藥,加水共煎而得,即合煎。分煎與合煎制得的湯劑,在其化學(xué)組成、藥效和療效等方面有什么差別,是單味中藥精制顆粒廣泛用于臨床基礎(chǔ)。分煎與合煎制得湯劑的藥效學(xué)、臨床療效方面已經(jīng)有了一些報(bào)道。但有關(guān)其化學(xué)組成方面的報(bào)道較少。本試驗(yàn)研究證明,茵陳-大黃配伍后,其內(nèi)部的有效成分均得到提高,但要注意二者的配伍比例,這也間接地反映出配伍在中藥方劑中的重要作用。
茵陳、大黃配伍后綠原酸含量均有所提高,且水煎法與水煎醇沉法的最佳配伍比例均為1∶1;茵陳與大黃配伍后蒽醌類(lèi)成分含量也均有所提高,其中大黃酸含量提高最為顯著,且水煎法與水煎醇沉法的最佳配伍比例均為1∶2。