劉靜 劉燦仿

RP-HPLC法測定牡荊片中牡荊素的含量

劉靜 劉燦仿

牡荊片；RP-HPLC；牡荊素

1 儀器與試藥

LC-2010AH型高效液相色譜儀(日本島津)；HS10260D型超聲波清洗器(天津市恒奧科技發(fā)展有限公司)；AUW 120D型電子天平(日本島津)；UV-2450型紫外一可見分光光度計(日本島津)。牡荊素(Viterxin)對照品(中國藥品生物制品檢定所,編號 111687-200701,供含量測定用)；牡荊片(河北國金藥業(yè)提供,批號為 080615,080717,080728,080810,080818)。乙腈為色譜純；水為娃哈哈純凈水；其他試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 方法 取牡荊片,研碎,精密稱定,置 250ml圓底燒瓶中,加甲醇-25%鹽酸(4∶1)[2]150ml,水浴加熱 20min,放冷至室溫,揮干,殘渣加流動相溶解,移入 250ml容量瓶中,稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。

2.2 最大吸收波長的確定 取對照品牡荊素適量,用流動相稀釋后在 UV-7501紫外-可見分光光度計測定,測得牡荊素的最大吸收波長為 270 nm。本實驗選用 270 nm為檢測波長。

2.3 色譜條件 色譜柱為 Diamonsil C18柱(250 mm×4.6mm),柱溫為 25℃ ,流動相為甲醇-乙腈-0.025mol/L磷酸水(5∶15∶80),流速為 1.0ml/min,檢測波長 270nm。

2.4 標準曲線的繪制 取牡荊素對照品,精密稱定 11.10mg,置 50m l容量瓶中,加甲醇超聲溶解,定容,搖勻,精密吸取5ml,置 100 m l量瓶中,加甲醇稀釋,定容,制成每毫升含0.0111mg牡荊索的溶液,精密吸取 2.0,4.0,6.0,8.0,10.0μl注入高效液相色譜儀中,測定色譜峰的峰面積。見表 1。

表1 線性范圍考察

可得回歸方程:Y:2242239X-1619.7,r=0.9997,結果顯示牡荊索進樣量在 0.0222～0.1110μg范圍內線性關系良好。

2.5 穩(wěn)定性考察 取本品 4片,取約 0.3 g,精密稱定,按供試品制備的方法操作,制成供試品溶液。精密吸取供試品溶液10μl,按 0,2,4,6,8 h時間間隔,分別進樣分析,測定牡荊素的色譜峰面積。分別為 124124,124116,123142,123587,123698,平均值為 123733,RSD=0.33%。結果表明,供試品溶液制備后8 h內測定,牡荊素的峰面積無明顯變化,說明在此時間內,供試品溶液化學性質穩(wěn)定。

2.6 精密度考察 精密吸取同一供試品溶液 10μl,按確定色譜條件,連續(xù)進樣 5次,測定色譜峰面積分別為 124689,124551,124876,123171,123456,平均值為 124148,RSD=0.63%。結果提示,本實驗精密度符合要求。

2.7 重現性考察 取本品 4片,取約 0.3 g,精密稱定,分別按供試品溶液的制備方法制備供試品溶液,測定含量,結果分別為 1.18,1.17,1.17,1.20,1.18,1.17 mg/片,平 均 值 為1.18mg/片,RSD=1.03%。結果表明,本實驗重現性符合規(guī)定。

2.8 加樣回收率 實驗精密稱取本品(批號 080615,含量1.1796mg/片)0.3 g,共稱取 5份,置 250ml容量瓶中,精密加入濃度為 0.2496mg/ml的牡荊素對照品溶液 5ml,按樣品測定方法測定。結果提示,本方法的回收率在97.54%～100.42%之間,RSD為 1.08%,符合有關規(guī)定。見表 2。

表2 加樣回收率

2.9 樣品含量測定 按供試品溶液的制備方法,對 5批樣品進行含量。結果各批次樣品(批號為 080615,080717,080728,080810,080818)中牡荊素的含量分別為 1.17、1.20、1.21、1.15、1.16mg/片。

3 討論

HPLC法測定牡荊片中牡荊素的含量未見報道。本文采用HPLC法測定牡荊片中牡荊素的含量,結果不同廠家、不同批次產品的牡荊素含量相差較大,建議通過測定牡荊素的含量來控制牡荊片的質量。

1 衛(wèi)生部藥典委員會.衛(wèi)生部藥品標準中藥成方制劑(第 10冊).北京:人民衛(wèi)生出版社,1997.124.

2 仲英.高效液相色譜法測定山楂葉總黃酮中牡荊素含量.時珍國醫(yī)國藥,2000,11:10.

R 917

A

1002-7386(2011)03-0448-01

10.3969/j.issn.1002-7386.2011.03.078

053200 河北省冀州市醫(yī)院(劉靜)；邢臺醫(yī)學高等?？茖W校藥劑教研室(劉燦仿)

牡荊片是由牡荊子制成的制劑,具有平喘,鎮(zhèn)咳,祛痰的功能。主要用于慢性氣管炎,支氣管哮喘。本方源自《中華人民共和國藥品標準?中藥成方標準》第 10冊[1],原標準項下無含量測定的方法,為有效控制其質量,筆者用RP-HPLC法對其中的牡荊素的含量進行了測定,經方法學考察認為本法簡便,準確,可用于該制劑的質量標準。

2010-10-13)