范張姣 景曉琦 蔡翠芳

苦參炭薄層色譜鑒別研究

范張姣 景曉琦 蔡翠芳

目的研究苦參炭的薄層色譜鑒別。方法選用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)為展開劑, 濃氨水飽和, 碘化鉍鉀試液為顯色劑, 以苦參堿、槐定堿、氧化苦參堿為對照品進行薄層鑒別。結果選用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)為展開劑, 碘化鉍鉀試液為顯色劑進行薄層鑒別, 色譜斑點清晰, 能有效提供鑒別特征。結論方法可行, 為建立完整、科學的苦參炭質量標準提供了參考依據(jù)。

苦參炭；薄層色譜；展開劑

苦參為豆科植物苦參(Sophora flavescens Ait.)的干燥根［1］。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》, 列為中品, 在《雷公炮炙論》即有關于其炮制的記載, “凡使苦參, 先用糯米濃泔汁浸一宿, 其腥穢氣并浮在水面上, 須重重淘過, 即蒸, 從巳至申”等。歷代醫(yī)藥文獻中, 有關苦參炮制品的記述不多, 計有生苦參、炒苦參、麩炒苦參、煨苦參、苦參炭、醋苦參、酒苦參、米泔制苦參等, 現(xiàn)今常用的為生苦參［2］。苦參炭是現(xiàn)代發(fā)展的炮制品, 在《全國中藥炮制規(guī)范》和《山西省中藥炮制規(guī)范》均載有苦參炭的炮制方法和成品性狀［3,4］?！吨腥A人民共和國藥典》2010版中對苦參質量標準的記載以苦參堿、氧化苦參堿作為指標, 未收錄苦參炭。本實驗旨在研究苦參炭的薄層色譜鑒別方法, 為建立完整、科學的苦參炭質量標準提供參考依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1儀器 KQ-500B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；HH-2型數(shù)顯恒溫水浴鍋(金壇市科析儀器有限公司)；QE-100二兩裝高速中藥粉碎機(武漢市屹立工具有限公司)；92SM-202A-DPR-SCS型電子分析天平；薄層層析硅膠G(青島海洋化工廠)；薄層層析硅膠G(青島基億達硅膠試劑廠)。

1.2藥材 苦參飲片10批分別購自山西省相關醫(yī)藥公司、河北安國藥市、安徽省亳州藥市, 經(jīng)山西藥科職業(yè)學院中藥系裴慧榮副教授鑒定所購藥材為豆科植物苦參(Sophora flavescens Ait.)的干燥根；苦參炭飲片由本實驗室按苦參炭炮制方法炮制所得。

1.3試劑 苦參堿(中國食品藥品檢定所；110805-200508)；氧化苦參堿(中國食品藥品檢定所；110780-201007)；槐定堿(中國食品藥品檢定所；110784-200804)；其它試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1供試品制備 取苦參炭粉末0.5 g, 加濃氨試液0.3 ml、三氯甲烷25 ml, 放置過夜, 濾過, 濾液蒸干, 殘渣加三氯甲烷0.5 ml使溶解, 作為供試品溶液。

2.2對照品液制備 取苦參堿、槐定堿、氧化苦參堿對照品各10 mg, 分別加乙醇5 ml使溶解, 制成每1 ml含2 mg的溶液, 作為對照品溶液。

2.3展開劑和顯色劑選擇 照薄層色譜法(附錄Ⅵ B)試驗, 吸取上述供試品和對照品兩種溶液各4 μl (對照品濃度為1 ml含0.2 mg), 分別點于噴以2%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上(青島海洋化工廠)。采用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)為展開劑, 展距8 cm, 取出, 晾干, 再以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(2:4:2:1)10℃以下放置的上層溶液為展開劑, 展開, 取出,展距8 cm展開, 噴以碘化鉍鉀試液所得斑點清晰、分離度較差, 對照品斑點不明顯。再噴亞硝酸鈉乙醇試液, 斑點立刻消失。

采用三氯甲烷-甲醇-濃氨試液(5:0.6:0.3)10℃以下放置的下層溶液為展開劑(《中華人民共和國藥典》2010年版一部苦參薄層色譜法)展開, 噴以碘化鉍鉀試液所得斑點清晰、分離度較差, 對照品斑點不明顯。再噴亞硝酸鈉乙醇試液,斑點立刻消失。

針對以上問題, 一是將對照品與供試品點樣量均改為5 μl；二是調整展開劑, 選用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)為展開劑展開, 濃氨水飽和；三是僅噴碘化鉍鉀試液。同樣選用青島海洋化工廠分廠生產(chǎn)的薄層板進行試驗, 所得斑點清晰、分離度好, 3種生物堿可在同一塊薄層板上檢識。

圖1

圖2

圖3

2.4耐用性試驗 采用噴以2%氫氧化鈉溶液制備的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G板(青島基億達硅膠試劑廠),作為固定相, 選用每1 ml含2 mg的對照品溶液, 點樣量為5 μl, 供試品點樣量為5 μl；用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)為展開劑展開, 濃氨水飽和, 噴碘化鉍鉀試液顯色。所得斑點清晰、分離度好。結果見圖3。結果所得斑點均顯色清晰且分離度好。

3 討論

根據(jù)藥典中記錄的苦參薄層色譜鑒別方法, 所得斑點不明顯, 分離不佳。可能有如下原因：一是樣品和對照品濃度偏低, 點樣量??；二是展開劑展開效果不理想, 且檢識方法繁瑣, 三種生物堿不能在同一塊薄層板上檢識；三是噴亞硝酸鈉乙醇試液后, 斑點消失達不到展開效果。經(jīng)對比, 最終選擇甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)為展開劑, 濃氨水飽和, 碘化鉍鉀試液為顯色劑, 得到的斑點清晰, 分離度佳。

炭藥炮制強調“炒炭存性”, “太過”或“不及”均會影響有效成分的含量及藥效發(fā)揮。有學者對苦參飲片的最佳炮制工藝進行了研究［5］, 但對于苦參炭的炮制工藝鮮有研究。本實驗所用苦參炭飲片為教師根據(jù)藥典要求及個人經(jīng)驗炮制所得, 為規(guī)范苦參炭炮制工藝, 指導飲片企業(yè)進行生產(chǎn), 需進一步進行相關實驗研究。

參考資料

［1］ 藥典委員會.中華人民共和國藥典一部.北京：醫(yī)藥科技出版社, 2010:122.

［2］ 楊巨奎, 顧茂書, 楊兆兵。中藥炮制技術匯編.太原:山西科學技術出版社, 1997:78-79.

［3］ 中華人民共和國衛(wèi)生部藥政管理局.全國中藥炮制規(guī)范.北京：人民衛(wèi)生出版社, 1988(9):66-67.

［4］ 山西省衛(wèi)生廳.山西中藥炮制規(guī)范, 1984:70.

［5］ 鄧捷圓, 胡馨, 張英華, 等.正交設計法優(yōu)選苦參炮制工藝的研究.中成藥, 2011(07):1206-1208.

Identification research on sophora carbon TLC

FAN Zhang-jiao, JING Xiao-qi, CAI Cui-fang.
Shanxi Pharmaceutical Vocational College, Taiyuan 030031, China

ObjectiveTo study identification of sophora carbon TLC.MethodsSelecting toluenepain-methanol (8:3:1.5) as developing agent,using saturation strong aqua,taking bismuth potassium iodide solution as the chromogenic agent, and setting matrine, huaialkali,bitter and alkali oxide TLC identification for reference substance.ResultsSelects the toluene - acetone - methanol (8:3:1.5) as developing solvent, Bismuth potassium iodide solution for TLC identification as the chromogenic agent,the chromatographic spots were clear, and can effectively provide identification features.ConclusionThe method is feasible, and can be a reference to establish a complete, scientific sophora charcoal for quality standards.

Sophora carbon; TLC identification; Developing solvent

030031 太原, 山西藥科職業(yè)學院