董自艷 戴翚

氯霉素滴眼液的抑菌效力評價

董自艷 戴翚

目的 測定氯霉素滴眼液中抑菌劑對大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉的抑菌效力。方法 采用微生物學方法, 根據各間隔時間的菌數1 g值相對于初始值減少程度評價氯霉素滴眼液對細菌、真菌的抑菌效力。結果 氯霉素滴眼液對細菌和真菌的抑菌效力均符合規(guī)定。結論 該方法可有效控制產品的內在質量。

氯霉素滴眼液；抑菌劑；抑菌效力

2010版《中國藥典》規(guī)定, 在制劑通則中要求具有抗菌活性的制劑應驗證最終容器中的抑菌劑效力不因貯藏條件而降低［1］。氯霉素(chloroamphenicol)滴眼液主要用于眼科沙眼、角膜炎、結膜炎、眼瞼緣炎, 不僅本身具有抑菌效力, 制劑中也添加抑菌劑, 而且為眼用多劑量包裝制劑, 貯藏和使用過程中容易發(fā)生微生物污染和繁殖, 對藥物的質量以及療效產生影響, 而氯霉素滴眼液抑菌效力研究尚未見報道, 因此本文對市售氯霉素滴眼液的抑菌效力進行了測定。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥 全封閉無菌試驗過濾培養(yǎng)器(北京牛牛基因技術有限公司, 批號20120801)；SteritestTM智能集菌儀(Milliproe)。沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基(SDB, 批號：120305)；沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA, 批號：1203062)；胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA, 批號：120730)；胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB,批號：100114), 均來自北京三藥科技開發(fā)公司；氯化鈉(北京化學試劑公司, 批號：050223)；氯霉素滴眼液(遼寧某藥廠,規(guī)格8 ml：12.5 g)。

1.2 菌種 大腸埃希菌(escherichia coli)［CMCC(B) 44 102］；銅綠假單胞菌(pseudomonas aeruginosa)［CMCC(B) 10 104］；金黃色葡萄球菌(staphylococcus aureus) ［CMCC(B) 26 003］；白色念珠菌(candida albicans) ［CMCC(F) 98 001］；黑曲霉(aspergillus niger) ［CMCC(F)98 003］。

1.3 方法

1.3.1 菌液制備 接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養(yǎng)物至胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基中, 34℃培養(yǎng)24 h；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中, 24℃培養(yǎng)48 h；分別用TSA、SDA培養(yǎng)基劃線培養(yǎng), 采用比濁法制成含菌數108 cfu/ml的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中, 24℃培養(yǎng)1周,加入5 ml含0.05%聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液洗下孢子, 用含0.05%聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液病采用比濁法制成含孢子數108 cfu/ml的孢子懸液［2,3］。

1.3.2 測定方法 取供試品5份, 8 ml/份, 每份接種一個試驗菌, 接種菌液80 μl, 充分混合, 每種試驗菌平分2份, 將接種的供試品室溫保存并防止被污染。在供試品剛接種(0 h)、24 h、7、14、28天分別從上述每個容器中取供試品1 ml, 用0.9%無菌氯化鈉溶液以l0倍量稀釋, 采用薄膜過濾法貼膜培養(yǎng), 測定每份供試品中所含的菌數。根據菌數測定結果計算1 ml供試品各試驗菌所加的菌數及各間隔時間的菌數并換算成1 g值。

2 結果

按照抑菌劑抑菌效力判斷標準, 本品抑菌效力對細菌和真菌能夠達到1類產品的要求, 該滴眼液抑菌效力符合規(guī)定。見表1。

表1 抑菌效力實驗數據

3 小結

3.1 計數時間點的選擇 由于該氯霉素滴眼液試驗菌加入后的7 d以后計數均已降為0, 計數時間點增加了24 h的計數。

3.2 抑菌劑使用的量一直都界限模糊, 過了則容易導致人體受損, 不足則增加微生物污染的可能性。因此, 在眼用制劑中添加抑菌劑, 必須進行充分的試驗研究, 權衡利弊, 保證用藥安全。

［1］ 國家藥典委員會.中國藥典(二部).北京:化學工業(yè)出版杜, 2010:附錄215, 1031.

［2］ 王衛(wèi)平.人工淚液氯霉素滴眼液中防腐劑防腐效力的測定.中國實用醫(yī)藥, 2010, 5(6):62-63.

［3］ 丁勃, 鞏麗萍, 謝元超.阿奇霉素滴眼液抑菌劑篩選與抑菌效力研究.中國藥品標準, 2012, 13(4):281-284.

Evaluation of bacteriostatic effect of chloramphenicol eye drops

DONG Zi-yan, DAI Hui.
Liaoning Fushun City Institute for Food and Drug Control, Fushun 113006, China

Objective To detect bacteriostatic effect of chloramphenicol eye drops for escherichia coli, pseudomonas aeruginosa, staphylococcus aureus, candida albicans, and aspergillus niger.Methods The microbiological method and various time-gap colony counting 1 g, compared with original value, were applied to evaluate bacteriostatic effects of chloramphenicol eye drops for bacteria and fungus.Results Bacteriostatic effects of chloramphenicol eye drops for bacteria and fungus were up to specification.Conclusion This method can effectively control immanent quality of products.

Chloramphenicol eye drops； Bacteriostatic agent； Bacteriostatic effect

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.13.181

2014-12-19］

113006 遼寧省撫順市食品藥品檢驗所(董自艷)；中國食品藥品檢定研究院(戴翚)