趙巖紅　桑志武　曹青青　曹國齋

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·論著·

葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78在妊娠期糖尿病孕婦胎盤滋養(yǎng)細胞中的表達

趙巖紅桑志武曹青青曹國齋

253800河北省故城縣醫(yī)院

【摘要】目的探討研究葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78在妊娠期糖尿病孕婦胎盤滋養(yǎng)細胞中的表達情況,了解其在妊娠糖尿病臨床診斷及預(yù)后觀察方面的臨床意義。方法選取2014年10月至2015年10月收治的妊娠期糖尿病患者85例作為觀察組,選取同時間段收治的健康妊娠期女性100例設(shè)為對照組, 2組孕婦均因不同原因分娩實施剖宮產(chǎn)手術(shù)，檢測所有入組對象葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78在胎盤滋養(yǎng)細胞中的表達情況。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78 mRNA以實時熒光定量PCR檢測，葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78蛋白以免疫組化二步法檢測，分級按照細胞染色強度實施。結(jié)果葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78 mRNA方面：觀察組(16.2±0.6)與對照組(6.9±0.4)比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78蛋白強陽性表達率方面：觀察組(96.47%)與對照組(25.00%)比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。其中觀察組為深棕色、淺棕色、黃色染色強陽性表達，對照組僅25例為淺棕色染色強陽性表達，其他均為黃色染色弱陽性表達。結(jié)論葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78在妊娠期糖尿病孕婦胎盤滋養(yǎng)細胞中為高表達情況，可能和妊娠期糖尿病的發(fā)病存在關(guān)聯(lián)。

【關(guān)鍵詞】葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78；妊娠期糖尿??；孕婦胎盤滋養(yǎng)細胞

妊娠期糖尿病，是指妊娠前其糖代謝正常，或糖耐量減退，妊娠期出現(xiàn)的糖尿病[1]。相關(guān)報道顯示，國內(nèi)妊娠期糖尿病的發(fā)病率在1%～5%，且有上升趨勢。多數(shù)妊娠期糖尿病患者的糖代謝在產(chǎn)后能恢復(fù)正常，但在遠期患上2型糖尿病的風(fēng)險較高。由于妊娠期糖尿病的病程復(fù)雜，且孕婦和胎兒均有一定風(fēng)險，可導(dǎo)致巨大兒、死胎、流產(chǎn)及其他嚴重并發(fā)癥。相關(guān)研究證實[2]，妊娠期糖尿病患者出現(xiàn)不良妊娠結(jié)局和血糖具有重要聯(lián)系，將患者血糖控制在合理范圍內(nèi)，可改善妊娠結(jié)局。因此，應(yīng)預(yù)防并發(fā)癥、合并癥出現(xiàn)。妊娠期糖尿病發(fā)病機制復(fù)雜，現(xiàn)階段，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在糖尿病發(fā)病中的作用逐漸引起人們廣泛關(guān)注，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作為細胞保護機制可對細胞產(chǎn)生一定保護作用，但若其程度過強或長期處于應(yīng)激狀態(tài)則易引發(fā)細胞病變。妊娠期糖尿病患者的病理狀態(tài)和2型糖尿病相同，即出現(xiàn)胰島素分泌不足和胰島素抵抗，但內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在妊娠期糖尿病的發(fā)病中的相關(guān)機制尚不明確。最近研究顯示，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激即會誘導(dǎo)形成胰島素抵抗，也會誘導(dǎo)胰島β細胞出現(xiàn)功能減退。細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)標志物為葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78，在正常情況下，組織中葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78為低表達，參與折疊、轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)。當機體出現(xiàn)應(yīng)激刺激(缺氧、缺血、Ca2+失衡等)時，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)大量的蛋白質(zhì)變性，積聚、引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[3]。本文旨在探討研究葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78在妊娠期糖尿病孕婦胎盤滋養(yǎng)細胞中的表達情況,了解其在妊娠糖尿病臨床診斷及預(yù)后觀察方面的臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料選取本院2014年10月到2015年10月時間段收治的妊娠期糖尿病患者85例設(shè)為觀察組,同時選取本院同時間段收治的健康妊娠期女性100例設(shè)為對照組, 2組孕婦均因不同原因分娩實施剖宮產(chǎn)手術(shù)，2組孕婦均為單胎，未有肝腎疾病、甲狀腺疾病、心臟病、慢性高血壓等病史。觀察組年齡25～39歲，平均(30.0±2.5)歲；初產(chǎn)婦55例，經(jīng)產(chǎn)婦30例；孕周39.0～41.0周，平均(39.5±1.1)周；孕1產(chǎn)0～孕5產(chǎn)2。對照組年齡24～40歲，平均(31.0±2.7)歲；初產(chǎn)婦61例，經(jīng)產(chǎn)婦39例；孕周39.5～42.0周，平均(39.9±1.0)周；孕1產(chǎn)0～孕6產(chǎn)2。2組年齡、產(chǎn)次、孕周等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1收集標本剖宮產(chǎn)術(shù)中，在胎盤娩出5 min后，選取避開出血、壞死、鈣化區(qū)近臍帶根部母體面中央胎盤，在無菌操作下胎盤母體面的蛻膜組織去除，即為絨毛滋養(yǎng)細胞層，之后剪取1 cm×1 cm大小的胎盤小葉組織2份。之后以滅菌0.9%氯化鈉溶液漂洗數(shù)次，并以干紗布吸掉其水分，將其中1份標本在15 s內(nèi)放置在液氮冷凍，之后放在放置在冰箱-80℃低溫保存，為實時熒光定量PCR檢測備用。將其中1份標本放置在中性甲醛(40 g/L)固定，石蠟包埋，連續(xù)切片(4 μm 厚)，為免疫組化二步法檢測備用[4,5]。

1.2.2實時熒光定量PCR檢測葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78 mRNA以實時熒光定量PCR檢測，根據(jù)TRIZOL(總RNA抽提試劑)的提取方法來提取細胞總RNA。依據(jù)《分子克隆實驗指南》[6]，即將RNA(逆轉(zhuǎn)錄)→cDNA→PCR(擴增)。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78為目的基因，312 bp(擴增片段長度)。磷酸甘油醛脫氫酶為內(nèi)參照基因， 221 bp(擴增片段長度)。PCR循環(huán)參數(shù)，3 min預(yù)變性(94℃)，20 s變性(94℃)，20 s退火(55℃)，30 s 延伸(72℃)，共40個循環(huán)，記錄熔解曲線(75℃～95℃范圍內(nèi))，4℃保存。標本均設(shè)平行復(fù)孔2個，以水(無RNA酶)代替cDNA模板陰性對照，反應(yīng)結(jié)束后，其熒光反應(yīng)曲線電腦自動輸出。對結(jié)果處理，根據(jù)內(nèi)參照基因表達量歸一化處理，按照下列公式計算：ΔCt=Ct(目的基因)-Ct(內(nèi)參照基因)，ΔΔCt=ΔCt觀察組-ΔCt對照組，葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78 mRNA相對表達水平=2-ΔΔCt，Ct為循環(huán)閾值[7,8]。

1.2.3葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78蛋白以免疫組化二步法檢測，分級按照細胞染色強度實施[9]。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78多克隆抗體為1抗，稀釋1∶100，胎盤滋養(yǎng)細胞胞質(zhì)內(nèi)有棕黃色、大小數(shù)量不定的染色顆粒即為陽性結(jié)果。標本均設(shè)平行復(fù)孔2個由經(jīng)驗豐富的2位病理科醫(yī)師進行讀片，每張切片觀察視野≥5個，觀察記錄判斷結(jié)果。分級按照細胞染色強度實施：未著色(-)，黃色(+)，淺棕色(++)，深棕色(+++)；強陽性表達為淺棕色、深棕色，弱陽性表達為黃色[10]。

1.3觀察項目檢測所有入組對象葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78在胎盤滋養(yǎng)細胞中的表達情況。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78 mRNA以實時熒光定量PCR檢測，葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78蛋白以免疫組化二步法檢測，分級按照細胞染色強度實施[11]。

2結(jié)果

2.12組葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78 mRNA方面和蛋白強陽性表達率比較葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78 mRNA方面：觀察組和對照組數(shù)據(jù)分別為(16.2±0.6)和(6.9±0.4)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78蛋白強陽性表達率方面：觀察組和對照組數(shù)據(jù)分別為96.47%和25.00%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。其中觀察組為深棕色、淺棕色、黃色染色強陽性表達，對照組僅25例為淺棕色染色強陽性表達，其他均為黃色染色弱陽性表達。見表1。

2.2觀察組與對照組胎盤滋養(yǎng)細胞葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78 mRNA相對表達水平對比本次研究中，觀察組與對照組胎盤滋養(yǎng)細胞中均有葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78 mRNA表達，其中觀察組相對表達水平為(16.4±0.5)，而對照組為(5.8±0.3)，觀察組胎盤滋養(yǎng)細胞葡萄糖蛋白78 mRNA相對表達水平明顯高于對照組，組間對比差異有統(tǒng)計意義(P<0.05)。見表2。

3討論

3.1葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78和細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在病理狀態(tài)下(高糖、缺氧等)，其細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)有錯誤折疊蛋白出現(xiàn)，或積累未折疊蛋白、細胞內(nèi)Ca2+失衡，導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能變化(即細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激)。細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作為一種細胞自我保護的反應(yīng)機制，在保護細胞，穩(wěn)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)方面具有重要作用[11]。但在高強度應(yīng)激持續(xù)出現(xiàn)時，細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)不能恢復(fù)平衡，繼而導(dǎo)致細胞啟動內(nèi)質(zhì)網(wǎng)凋亡程序，出現(xiàn)一系列的病理反應(yīng)。細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)標志物為葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78，主要原因是葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78和熱休克蛋白70家族具有高度同源性，葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78歸屬熱休克蛋白70家族，但和熱休克蛋白70家族相比，葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78的結(jié)構(gòu)域N末端存在肽(內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位信號)，就說明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中存在葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78[12]。在正常情況下，組織中葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78為低表達，參與折疊、轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)。當機體出現(xiàn)應(yīng)激刺激(缺氧、缺血、Ca2+失衡等)時，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)大量的蛋白質(zhì)變性，積聚、引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78出現(xiàn)高表達狀況，機體細胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定需要通過葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78反應(yīng)性上調(diào)來實現(xiàn)，或細胞保持應(yīng)激狀態(tài)下正常合成蛋白質(zhì)。或使細胞對殺傷性T淋巴細胞敏感性降低，或細胞生存期延長，使細胞凋亡受到阻礙，導(dǎo)致細胞損傷。細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，其信號通路為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)超負荷反應(yīng)、固醇調(diào)節(jié)級聯(lián)反應(yīng)、未折疊蛋白反應(yīng)[13]，未折疊蛋白反應(yīng)即內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激所產(chǎn)生的適應(yīng)性細胞保護反應(yīng)，其可有效緩解內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，維持蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)，就目前而言，未折疊蛋白反應(yīng)包含四種類型，如分子伴侶表達上調(diào)、翻譯減少，降低未折疊蛋白聚集；與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白質(zhì)降解可快速實現(xiàn)未折疊蛋白清除，過度損傷功能引起細胞凋亡；而葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78主要參與了未折疊蛋白反應(yīng)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的IRE1、PERK、ATF6蛋白分子均屬于同一類內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號跨膜感受蛋白，在正常情況下，此三類信號感受蛋白均可與葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78結(jié)合從而產(chǎn)生復(fù)合物，無活性，若內(nèi)質(zhì)網(wǎng)未折疊蛋白蓄積增加，則葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78可結(jié)合內(nèi)質(zhì)網(wǎng)新生未折疊蛋白，導(dǎo)致三類信號感受蛋白均可于葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78復(fù)合物中中解離。若IRE1處于游離狀態(tài)，則其于后期可快速發(fā)生二聚化激活磷酸化，而活化IRE1蛋白胞漿側(cè)C末端具核酸內(nèi)切酶活性，剪切胞漿XBP-1mRNA前體分子，此分子于剪切后可編碼有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)活性的XBP-1蛋白，促進葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78基因轉(zhuǎn)錄，EDEM等蛋白質(zhì)于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白折疊與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)性降解過程中可起重要作用，EDEM蛋白質(zhì)于游離狀態(tài)下可通過寡聚化作用激活胞漿側(cè)PERK磷酸激酶區(qū)，后在其催化作用下使elF2α51位上絲氨酸發(fā)生磷酸化，改變elF2α功能使其可于短期內(nèi)實現(xiàn)細胞多數(shù)蛋白質(zhì)合成抑制，破壞蛋白質(zhì)翻譯功能，降低蛋白折疊負荷，但在此過程中，仍有部分少數(shù)特殊性蛋白質(zhì)在此上特殊情況下仍可通過自身mRNA 5非翻譯區(qū)的uORF結(jié)構(gòu)實現(xiàn)優(yōu)先翻譯，如活化轉(zhuǎn)錄因子4。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78高水平表達可導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白折疊能力增強，同時增加內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白折疊能力，同時使內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激效應(yīng)減輕，促進細胞存活，即內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激效應(yīng)同時伴隨葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78變化，可參考葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78變化來分析研究內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激效應(yīng)[14]。

3.2妊娠期糖尿病發(fā)病和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)

3.2.1妊娠期糖尿病與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激分析:妊娠期糖尿病指孕婦于妊娠期檢測首次發(fā)現(xiàn)不同程度糖耐量異常，發(fā)生率約為2%～5%，若未及時治療，則可嚴重影響母嬰安全。目前，妊娠期糖尿病發(fā)病機制尚未實現(xiàn)明確研究，但就以現(xiàn)階段臨床研究而言，醫(yī)學(xué)界多認為其發(fā)病多與胎盤泌乳素、催乳素及糖皮質(zhì)激素等升高而致胰島素抵抗相關(guān)，有家族遺傳機制，多數(shù)孕婦妊娠期糖尿病于產(chǎn)后糖代謝基本可恢復(fù)正常，但于此后5～16年仍有17%～63%孕婦發(fā)展為2型糖尿病?，F(xiàn)階段，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在糖尿病發(fā)病中的作用逐漸引起人們廣泛關(guān)注，胎盤是維系胎兒與母體的重要器官，是胎兒機體獲取養(yǎng)分的重要途徑，妊娠期高血壓患者胎盤細胞功能以及細胞外基質(zhì)等均會現(xiàn)異常變化導(dǎo)致胎兒營養(yǎng)吸收受阻，妊娠期糖尿病患者胎盤雖無明顯特異性結(jié)構(gòu)改變，但若與正常妊娠相比，則在其形態(tài)變化及病變范圍等因素中均存在較大差異。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作為細胞保護機制可對細胞產(chǎn)生一定保護作用，但若其程度過強或長期處于應(yīng)激狀態(tài)則易引發(fā)細胞病變。

3.2.2妊娠期糖尿病發(fā)病和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)性研究:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)與妊娠期糖尿病發(fā)病研究的相關(guān)性主要源于對特殊性糖尿病的研究，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是真核細胞蛋白質(zhì)翻譯合成及細胞內(nèi)鈣離子儲存場所，自身可對細胞應(yīng)激反應(yīng)起相關(guān)調(diào)節(jié)性，而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激則是指在相關(guān)因素影響下，細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)生理功能現(xiàn)紊亂病理狀態(tài)，例如在Wolfram綜合征研究中，若某家族患此類綜合征，則其家族均可現(xiàn)編碼內(nèi)質(zhì)網(wǎng)跨膜蛋白WFS1基因突變，故WFS1極有可能為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣通道，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)定狀態(tài)維持功能中具重要作用，根據(jù)相關(guān)研究表明，WFS1于機體內(nèi)可有效抑制胰島B細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，抑制WFS1自身表達且可引起B(yǎng)細胞慢性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，小鼠若將WFS1基因敲除則B細胞可現(xiàn)凋亡，最終導(dǎo)致糖尿病產(chǎn)生，故可知內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與糖尿病發(fā)病具一定相關(guān)性，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與了糖尿病疾病發(fā)展。而據(jù)相關(guān)研究顯示，妊娠期糖尿病孕婦的胎盤組織中，C/EBP(環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件)、CHOP(結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子同源蛋白)、p-PERK(磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶)均較正常孕婦高，即妊娠期糖尿病孕婦的胎盤組織內(nèi)存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)[15,16]。

本次研究中，觀察組于對照組兩組葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78在mRNA方面和蛋白強陽性表達率方面的比較中，觀察組孕婦的葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78 mRNA、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78蛋白表達均較對照組孕婦高，組間對比差異顯著(P<0.05)，即觀察組孕婦存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標志性分子-葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78，說明觀察組孕婦盤滋養(yǎng)細胞中存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)，這與既往研究報道結(jié)果相同，證實盤滋養(yǎng)細胞中存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)和妊娠期糖尿病發(fā)病存在相關(guān)性。

妊娠期糖尿病患者的病理狀態(tài)和2型糖尿病相同，即出現(xiàn)胰島素分泌不足和胰島素抵抗，但內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在妊娠期糖尿病的發(fā)病中的相關(guān)機制尚不明確。最近研究顯示，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激即會誘導(dǎo)形成胰島素抵抗，也會誘導(dǎo)胰島β細胞出現(xiàn)功能減退[17,18]。研究證實，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號包括IRE-1α-JNK、CHOP、GSK3β3個元件，這3個元件在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)所至的胰島β細胞凋亡中起了重要的作用。另有研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時，肌醇需求激酶等相關(guān)信號分子(內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激)能夠?qū)δ[瘤壞死因子受體相關(guān)因子和細胞凋亡信號的調(diào)節(jié)激酶募集，其形成的復(fù)合物對激活c-Jun氨基末端的激酶信號通路具有誘導(dǎo)作用。這一信號通路可導(dǎo)致胰島β細胞凋亡，這一信號通路是一種重要的調(diào)控哺乳動物體內(nèi)的真核細胞反應(yīng)的信號傳導(dǎo)系統(tǒng)。另有研究顯示，衣霉素誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(干細胞)實驗中，絲氨酸磷-胰島素受體底物1受到胰島素刺激酸化增強，能夠使胰島素的信號傳導(dǎo)受阻，繼而使胰島素敏感性降低，使發(fā)生胰島素抵抗的情況增加。可阻止胰島素信號傳導(dǎo)，從而降低胰島素敏感性，促進胰島素抵抗的發(fā)生[19]。

綜上所述，葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78在妊娠期糖尿病孕婦胎盤滋養(yǎng)細胞中為高表達情況，可能和妊娠期糖尿病的發(fā)病存在關(guān)聯(lián)。具體為妊娠期糖尿病孕婦胎盤滋養(yǎng)細胞中存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與妊娠期糖尿病發(fā)病過程可能通過誘導(dǎo)胰島素抵抗實現(xiàn)。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78 mRNA、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78蛋白這兩種均為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標志性分子，在觀察組妊娠期糖尿病孕婦中為高表達，在對照組中為低表達，即葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78的表達變化和妊娠期糖尿病的出現(xiàn)相關(guān)?？勺鳛橐环N妊娠期糖尿病早期預(yù)測指標，通過監(jiān)測孕婦葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78的表達變化，在早期診斷妊娠期糖尿病，使孕產(chǎn)婦、圍產(chǎn)兒的發(fā)病率、死亡率降低。

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The expression of glucose regulated protein 78 in placenta trophocytes of pregnant women with gestational diabetes mellitus

ZHAOYanhong,SANGZhiwu,CAOQingqing,etal.

GuchengCountyHospital,Hebei,Gucheng253800,China

【Key words】glucose regulated protein 78; gestational diabetes mellitus;pregnant woman; placenta trophocytes

【Abstract】ObjectiveTo observe the expression of glucose regulated protein 78 in placenta trophocytes of pregnant women with gestational diabetes mellitus in order to investigate its significance in clinical diagnosis and prognosis evaluation of gestational diabetes mellitus.MethodsEighty-five patients who were admitted and treated in our hospital from October 2014 to October 2015 were served as observation group,besides,the 100 healthy gestational women were served as control group,the pregnant women in both groups underwent cesarean section due to different causes.The expression levels of glucose regulated protein 78 in placenta trophocytes were detected in both groups.The expression levels of glucose regulated protein 78 mRNA were detected by Real-time fluorescent quantitative PCR and expression levels of glucose regulated protein 78 protein were detected by immunohistochemisty two stage method.ResultsThe expression levels of glucose regulated protein 78 mRNA in observation group (16.2±0.6) were significantly higher than those (6.9±0.4) in control group (P<0.05). The expression levels of glucose regulated protein 78 protein in observation group (96.47%) ) were significantly higher than those (25.00%) in control group (P<0.05), in which the strong positive expression with dark brown, light brown, yellow staining was found in observation group,however, the strong positive expression with light brown was observed only in 25 patients of control group, and weakly positive expression with yellow staining was found in the other patients of control group.ConclusionThe high-expressions of glucose regulated protein 78 exist in placenta trophocytes of pregnant women with gestational diabetes mellitus,which may be correlated to the pathogenesis of gestational diabetes mellitus.

doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2016.12.009

【中圖分類號】R 714.25

【文獻標識碼】A

【文章編號】1002-7386(2016)12-1792-04

(收稿日期：2016-02-19)