翠青　傅一笑　蒙華慶等

[摘要】目的 探索編碼測驗(yàn)、數(shù)字符號編碼測驗(yàn)及符號搜索測驗(yàn)作為認(rèn)知內(nèi)表型的穩(wěn)定性。方法 從重慶市主城區(qū)募集6～16歲的雙生子，共募集122對雙生子，用數(shù)字符號編碼測驗(yàn)及符號搜索測驗(yàn)對雙生子進(jìn)行認(rèn)知功能測定。并采取雙生子頰黏膜標(biāo)本以提取DNA進(jìn)行卵型鑒定。分析三個測試的得分情況，評估雙生子兩個個體分值的相關(guān)系數(shù)。結(jié)果 最終有卵型鑒定結(jié)果的雙生子共102對，同卵雙生子組（以下用MZ表示）和異卵雙生子組（以下用DZ表示）的年齡及性別分布無顯著性差異（P>0.05），MZ組及DZ組編碼測驗(yàn)、cording B及searching B相關(guān)系數(shù)分別為0.687和0.433，0.837和0.820，0.776和0.678，結(jié)果顯示均有顯著相關(guān)（P<0.05），且三個測驗(yàn)結(jié)果相關(guān)系數(shù)MZ組高于DZ組。結(jié)論 韋氏兒童智力測試中編碼測驗(yàn)及韋氏兒童智力測試第三版中的數(shù)字符號編碼測驗(yàn)、符號搜索測驗(yàn)所反應(yīng)的信息處理速度和啟動過程以及隨機(jī)自由回憶和線索性回憶功能受遺傳影響較大，適合作為認(rèn)知內(nèi)表型的指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞】雙生子；神經(jīng)心理；韋氏兒童智力測試編碼測驗(yàn)；韋氏兒童智力測試第三版數(shù)字符號編碼測驗(yàn)；符號搜索測驗(yàn)；認(rèn)知功能；內(nèi)表型

[中圖分類號】R749 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A [文章編號]2095-0616（2016）11-21-04

我國兒童精神衛(wèi)生問題的檢出率約為7.03%～14.89%，內(nèi)表型比疾病的外在表現(xiàn)更接近疾病的生物學(xué)基礎(chǔ)，通過內(nèi)表型研究疾病的遺傳學(xué)基因具有顯著優(yōu)勢，內(nèi)表型的方法包括神經(jīng)生理、生物化學(xué)及認(rèn)知等。目前探討的與精神疾病相關(guān)的認(rèn)知內(nèi)表型包括言語記憶，工作記憶，持續(xù)注意及反應(yīng)抑制等。內(nèi)表型在精神醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用還處于初步探索階段。應(yīng)用雙生子研究探索內(nèi)表型穩(wěn)定性是常用的重要方法之一，現(xiàn)有的雙生子研究多集中于發(fā)達(dá)國家，通過雙生子法探索兒童精神障礙的相關(guān)的認(rèn)知內(nèi)表型穩(wěn)定性具有重要意義。

1資料與方法

1.1一般資料

自2010年開始，以教委-學(xué)校途徑在重慶地區(qū)募集共同生活的6～16歲雙生子，每對雙生子均由同一撫養(yǎng)者撫養(yǎng)。排除嚴(yán)重的上肢殘疾、軀體疾病及精神疾病者。受試者在簽署書面知情同意書后進(jìn)行測定及采集頰黏膜標(biāo)本。共納入雙生子122對，同卵雙生子男童共55例，女童共53例，異卵雙生子男童為44例，女童為52例。

1.2方法

1.2.1神經(jīng)認(rèn)知功能評定工具 韋氏兒童智力測驗(yàn)中的編碼測驗(yàn)、韋氏兒童智力測試第三版的數(shù)字符號編碼測驗(yàn)（WAIS-ⅢDigit Symbol-cording B，以下簡稱為cording B）及符號搜索（WAIS-ⅢSymbol-searching B，以下簡稱為searching B）。韋氏兒童智力測試中編碼測驗(yàn)和第三版中的數(shù)字符號編碼測驗(yàn)均能很好的反應(yīng)信息處理速度和啟動過程，信息處理速度及啟動過程與角回、內(nèi)頂皮層、左側(cè)額下回等腦區(qū)功能相關(guān)，三個神經(jīng)心理測試同時可評定隨機(jī)自由回憶和線索性回憶功能。

1.2.2卵型鑒定 所有受試雙生子均采集頰黏膜拭子，常溫下保存在裝有緩沖液的試管，隨后采用酚2氯仿法進(jìn)行DNA提取，并采用STR分型法進(jìn)行卵型鑒定。采用Promega公司的Power2Plex16系統(tǒng)進(jìn)行16個基因座的同時擴(kuò)增并用三色熒光鏡檢測15個STR基因座性別基因：PentaE，D18S51，D21S11，TH01，D3S1358，F(xiàn)GA，TPOX，D8S 1179，VWA，Amelogenin，Penta D，CSF 1 PO，D16S539，D7S820，D13S317和D5S818。以鑒定雙生子對是同卵還是異卵。若兩同性雙生子在5個STR位點(diǎn)基因型完全一致，則作出MZ判斷的可信度>99%。通過這種遺傳分析，單卵雙生子的可靠性可以達(dá)到0.1999。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1 MZ組和DZ組一般人口學(xué)資料

共納入雙生子122對，有卵型鑒定結(jié)果的共102對。其中同卵雙生子54對，異卵雙生子48對。

對兩組雙生子的性別、年齡分別進(jìn)行X²檢驗(yàn)及t檢驗(yàn)，結(jié)果顯示差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.2 MZ組和DZ組數(shù)字符號編碼測驗(yàn)及symbol-searching B、symbol-cording B測驗(yàn)正態(tài)性檢驗(yàn)

102對雙生子分為同卵組及異卵組，進(jìn)行數(shù)字符號編碼測驗(yàn)及symbol-searching B、symbol-cording B測驗(yàn)，對三個結(jié)果的得分進(jìn)行Shapiro-Wilk正態(tài)性檢驗(yàn)以確定相關(guān)分析統(tǒng)計(jì)方法，結(jié)果示除了DZ組searching B分?jǐn)?shù)不符合正態(tài)分布外，其余均符合正態(tài)分布。見表2。

2.3 MZ組與DZ組編碼測驗(yàn)及符號搜索測驗(yàn)在雙生子問兩個個體之間相關(guān)分析

將102對雙生子按卵型鑒定結(jié)果分為同卵雙生子及異卵雙生子。將兩組同時按大小雙原則再行分組，根據(jù)編碼測驗(yàn)、searching B及cording B分值情況分別對雙生子中兩個個體進(jìn)行雙變量相關(guān)分析，并比較兩組的相關(guān)系數(shù)。根據(jù)上述正態(tài)檢驗(yàn)結(jié)果，由于DZ組searching B的分值不符合正態(tài)分布，故進(jìn)行雙變量的Spearman相關(guān)分析。

用Fisher函數(shù)法將r值轉(zhuǎn)化為Z值。估計(jì)MZ組Z值的95%CI及DZ組的Z值。從表3中可見編碼測驗(yàn)、searching B及cording B的分值在雙生子對大小雙間有顯著相關(guān)，且對比95%的可信區(qū)間發(fā)現(xiàn)兩組相關(guān)系數(shù)具有可比性。三項(xiàng)測驗(yàn)分值的雙生子對間相關(guān)系數(shù)MZ組均大于DZ組。

3討論

迄今為止精神疾病的發(fā)病機(jī)制仍未明確，大量家系研究和雙生子研究顯示遺傳在其中發(fā)揮重要作用。但對疾病的遺傳學(xué)研究尚未得到一致的結(jié)論，如精神分裂癥及雙相情感障礙存在很多交叉基因，多年研究結(jié)果未發(fā)現(xiàn)與疾病相關(guān)的特異性基因。并且現(xiàn)有的精神疾病診斷和分類標(biāo)準(zhǔn)缺少生物學(xué)基礎(chǔ)，傳統(tǒng)的遺傳研究仍未明確病因。內(nèi)表型處于疾病和遺傳基因之間，與遺傳基因的聯(lián)系更密切，內(nèi)表型正在此基礎(chǔ)上提出，目前內(nèi)表型在精神醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用還處于初步階段。

探索內(nèi)表型的穩(wěn)定性除了家系研究以外，雙生子研究也是分析和研究這一問題的重要方法。雙生子研究的創(chuàng)始人Galton認(rèn)為雙生子的研究對探討遺傳因素和環(huán)境對人性格和智能形成的影響。瑞典從1959年即開始開展雙生子研究工作，擁有1886年以來出生23 000對性別相同的雙生子病史資料。英國倫敦精神病研究所于1996年建立研究兒童早期發(fā)育的雙生子研究，15000對雙生子已進(jìn)入該研究登記系統(tǒng)，研究顯示相同基因可能對兒童早期的語言和認(rèn)知功能有重要作用。長期以來我國一直沒有大規(guī)模的雙生子登記系統(tǒng)，近年來該狀況已開始改善，2002年青島地區(qū)建立起有8583對雙生子的信息庫，為評價遺傳、環(huán)境因素與慢性疾病發(fā)生的關(guān)系及易感基因等研究打下基礎(chǔ)。但采用雙生子研究的方法對兒童青少年精神衛(wèi)生問題及認(rèn)知發(fā)育的病因研究還有待啟動。部分研究顯示兒茶酚胺系統(tǒng)的基因DRD4、DAT1、COMT基因可能與一些兒童期的精神障礙發(fā)生有關(guān)，而與這些基因輕度相關(guān)的內(nèi)表型存在異常，雙生子研究探索兒童精神障礙的內(nèi)表型穩(wěn)定性具有重要意義。

本研究采用韋氏兒童智力測試中編碼測驗(yàn)及韋氏兒童智力測試第三版中的symbol-searchingB、symbol-cording B測驗(yàn)測量認(rèn)知加工中信息處理速度和啟動過程，同時測定隨機(jī)自由回憶和線索性回憶功能，通過比較同卵雙生子組和異卵雙生子組中兩個個體的相關(guān)系數(shù)，定性的了解這部分認(rèn)知功能受遺傳因素影響較多。結(jié)果顯示上述測驗(yàn)指標(biāo)所反映的認(rèn)知功能同卵雙生子組及異卵雙生子組的兩個個體問均有顯著相關(guān)，且同卵雙生子組兩個個體間的相關(guān)系數(shù)高于異卵雙生子組。結(jié)果提示symbol-searching B、symbol-cording B測驗(yàn)所評定的認(rèn)知功能受遺傳影響可能性更大，且韋氏兒童智力測試第三版中的symbol-searching B、symbol-cording B測驗(yàn)穩(wěn)定性更佳，可作為具有相對穩(wěn)定及精確的內(nèi)表型指標(biāo)。正如相關(guān)研究顯示多動癥兒童組存在反應(yīng)抑制功能障礙，精神分裂癥患者在持續(xù)性注意，言語記憶和工作記憶方面存在缺陷，后續(xù)相關(guān)研究證實(shí)注意缺陷是精神分裂癥的核心特征，同時Snitz等研究結(jié)果支持信息處理速度、執(zhí)行功能的轉(zhuǎn)換功能以及工作記憶功能受損作為精神分裂癥易感性指標(biāo)的觀點(diǎn)。Milner應(yīng)用威斯康星卡片測驗(yàn)進(jìn)行精神疾病認(rèn)知功能研究，發(fā)現(xiàn)威斯康星卡片測驗(yàn)中的持續(xù)錯誤數(shù)是區(qū)分腦損傷是否累及額葉的最敏感指標(biāo)。

可見雙生子研究對于內(nèi)表型指標(biāo)的探尋具有重要意義。分子遺傳學(xué)研究以及人類基因組學(xué)研究的進(jìn)展為今后研究提出更高要求，對雙生子研究不只局限于單一的表現(xiàn)型變量，而應(yīng)收集相關(guān)的性狀和疾病信息及相關(guān)的環(huán)境因素，對象也不只局限于雙生子本身，也應(yīng)包括他們的家系成員。采用雙生子研究方法對內(nèi)表型進(jìn)行探討，可為尋找精確穩(wěn)定及接近疾病本質(zhì)的內(nèi)表型提供基礎(chǔ)，為精神疾病預(yù)防策略的制定提供一定參考依據(jù)，有助于發(fā)現(xiàn)傳遞疾病易感性的、假定的多基因體系中的可能基因。