裂褶菌優(yōu)良菌株的初步篩選

馬布平 羅祥英 劉書暢 李榮春

（云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食用菌所，云南昆明650100）

裂褶菌（Schizophyllum commune）隸屬于真菌門（Eumycophyta），擔子菌綱（Basidiomycetes），傘菌目（Agaricales），裂褶菌科（Schizophyllaceae），裂褶菌屬（Schizophyllum）[1]。在云南，裂褶菌俗稱白參，野生種形似扇形貝殼，顏色偏黑灰，菇體韌性大；人工栽培種形似菊花，顏色偏白，質(zhì)嫩味美，商品價值高，是一類珍貴的食藥用菌。其具有特殊濃郁香味，性平，具有滋補強壯、鎮(zhèn)靜作用，對精神不振、頭昏耳鳴也有顯著功效[2]。裂褶菌多糖除了是抗腫瘤的重要藥物外，其多糖還能作為護膚保濕產(chǎn)品添加物，保濕能力較常見的保濕劑成分燕麥β-葡聚糖強，可以開發(fā)作為日用化妝品中保濕劑[3]。國外學(xué)者FERRETTIR[4]等研究表明，裂褶菌多糖還能作為新型生物絮凝劑材料，成為研究的新熱點。裂褶菌還含有纖維素酶，可以產(chǎn)生蘋果酸，現(xiàn)廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥工業(yè)及生物化學(xué)等方面。目前我國對于裂褶菌栽培研究較國外多，但規(guī)?；⒐S化栽培技術(shù)仍未見報道，其原因主要有：菌株選育存在困難，用于栽培的菌株大多是經(jīng)野生分離馴化而來，產(chǎn)量和質(zhì)量未得到確切的保證；裂褶菌栽培條件的探究力度不夠，對于傳統(tǒng)的栽培模式而言，最大問題就是環(huán)境控制。筆者研究比較6個菌株裂褶菌性狀，為裂褶菌規(guī)?；⒐S化栽培提供了參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試菌株 裂褶菌菌株LZJ-1、LZJ-2、LZJ-3、LZJ-4、LZJ-5、LZJ-6由云南菌視界生物科技有限公司提供，均為人工馴化栽培菌株。

1.1.2 試驗培養(yǎng)基 母種培養(yǎng)基（PDA）：土豆200 g、葡萄糖20 g，瓊脂18 g，KH2PO43 g，MgSO41.5 g，加水1 L。原種培養(yǎng)基：麥粒60%，木屑23%，麩皮15%，石灰1%，石膏1%。栽培種培養(yǎng)基：木屑55%，麩皮25%，棉子殼10%，玉米粉8%，輕質(zhì)碳酸鈣1%，石膏1%。

1.2 試驗方法試驗在云南菌視界生物科技有限公司進行。

1.2.1 菌絲培養(yǎng) 將保存在4℃冰箱中的6個菌株轉(zhuǎn)接在PDA培養(yǎng)基進行活化，25℃條件避光培養(yǎng)7 d。采用平板十字交叉法測量菌落直徑，并計算菌絲日長速。

將培養(yǎng)料精確稱量拌勻、加水至含水量為58%，裝瓶（規(guī)格7 cm×10 cm）。121℃滅菌2 h，冷卻到常溫備用。選取菌絲潔白、長勢好的母種轉(zhuǎn)接到原種培養(yǎng)基中（接種塊大小為1 cm×1 cm），25℃條件避光培養(yǎng)至菌絲滿瓶（13～15 d）。

栽培料各材料加水，攪拌機拌勻，含水量58%～60%，裝袋機裝袋（規(guī)格15 cm×55 cm），每袋可裝濕料為2.6 kg，123℃滅菌1.5 h，冷卻備用。選取菌絲強壯、潔白的原種轉(zhuǎn)接到栽培料袋中。接種方法：打孔機打4個孔，孔間距為6 cm，接種量8～10 g，膠帶封口，每個菌株接200袋。溫度25℃、相對濕度50%的條件下避光培養(yǎng)10～11 d，菌絲不必滿袋，待長滿接種孔外延半徑6～7 cm時即可轉(zhuǎn)入出菇房。期間觀察記錄菌絲萌發(fā)時間及長勢，發(fā)現(xiàn)有污染須及時處理。

1.2.2 出菇管理 菌絲培養(yǎng)10～11 d移進出菇房，撕開膠帶，挑出污染包，計算污染率。將菌包整齊擺放在出菇架上，接種面向上。在出菇溫度23℃，相對濕度90%，光照500 lx，二氧化碳濃度500%條件下刺激裂褶菌從營養(yǎng)生長階段轉(zhuǎn)向生殖生長階段。

按照鮮銷采收標準，子實體七八分成熟、孢子尚未彈射時采收，鮮菇以朵型、顏色、質(zhì)量進行分級銷售。試驗均為采收一次，采收后的廢菌包進行堆肥處理。

1.2.3 指標測定 觀察并記錄出菇相關(guān)指標，包括原基出現(xiàn)時間、接種到子實體成熟時間、葉片長度及厚度、顏色、生物學(xué)轉(zhuǎn)化效率及各品種污染率等指標。菌絲日平均生長速率（mm/d）=菌落直徑/總天數(shù)；生物學(xué)轉(zhuǎn)化率（%）=鮮菇重/培養(yǎng)料干重×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試菌株母種長速比較6個菌株日長速、長勢見表1、圖1。菌絲長速LZJ-2與LZJ-4、LZJ-1無顯著性差異，三者均與LZJ-4、LZJ-5、LZJ-6存在極顯著差異，LZJ-5與LZJ-3無顯著性差異，兩者均與LZJ-6存在顯著性差異。其中菌株LZJ-5無氣生菌絲，基生菌絲粗壯；LZJ-1、LZJ-2 、LZJ-3、LZJ-4、LZJ-6均有氣生菌絲，集中出現(xiàn)在靠培養(yǎng)皿的邊緣位置。

圖1 供試菌株母種菌絲生長形態(tài)

2.2 子實體性狀測量比較LZJ-1出現(xiàn)原基時間最短，原基數(shù)量多但小，一般發(fā)生在搬進出菇房的第2天，但由于該菌株本身菌絲成熟較快，原基發(fā)生同時整個菌包分泌黃色物質(zhì)，老化情況嚴重。LZJ-1的子實體葉片小，菌肉薄，邊緣呈細鋸齒狀，口感偏柴，味濃。LZJ-2菌絲長速快，原基發(fā)生少，但可能是出菇條件不適合其原基生長，導(dǎo)致部分原基不能存活，產(chǎn)量低，朵型松散。LZJ-2單片子實體肥，邊緣呈鋸齒狀分化。LZJ-3的原基發(fā)生時間為進入出菇房的第4天，相比其他菌株最晚，其原因可能是由于其菌絲長速慢，菌絲成熟慢，在刺激出菇時，形成原基較晚，原基數(shù)量少而肥，成型后單個葉片肥厚，邊緣有稀疏鋸齒分布，菇體乳白色，有細小白色絨毛密集分布，朵型較差。LZJ-3菌絲也出現(xiàn)一定程度的老化現(xiàn)象。LZJ-4原基發(fā)生時間在進入出菇房的第2天，原基發(fā)生好，菇蕾較多較大，子實體成熟時間為10～11 d，葉片平展成型后較大較肥，菇型較大，菊花形，灰白色，產(chǎn)量最高。LZJ-5原基發(fā)生時間與LZJ-4相同，原基分化好，成熟后菇型較好，產(chǎn)量僅次于LZJ-4。LZJ-6原基發(fā)生時間約為進入出菇房后的兩天半，原基分化較少，子實體成熟后菇型相對較小，菇型好。各菌株子實體見圖2。

表1 供試裂褶菌菌株母種菌絲生長情況比較

圖2 供試裂褶菌菌株子實體形態(tài)

2.3經(jīng)濟效益根據(jù)培養(yǎng)料（棉子殼、木屑、麩皮、玉米粉、石灰和石膏的市場價格分別是3000、600、2000、2300、880、880元/噸）核算每袋培養(yǎng)料成本為1.41元，再結(jié)合市場上鮮裂褶菌批發(fā)價格（50元/kg），收入與支出如表3。出菇房大小18 m2，可擺放菌包1100袋，在出菇房時間12 d；單次滅菌成本1000元，可滅大袋菌包3600袋。核算運行成本包括滅菌成本（0.28元/袋）、人工成本（0.2元/袋）和出菇房運行成本（0.15元/袋），共0.63元/袋。

表2 供試裂褶菌菌株生長性狀

表3 供試裂褶菌菌株生產(chǎn)經(jīng)濟效益

由表3可知，LZJ-4每個菌包一次出菇118 g，價格為5.9元，盈余3.86元；LZJ-1每個菌包一次出菇均重68 g，價格為3.4元，盈余1.36元；LZJ-2每個菌包一次出菇均重37.46 g，可售1.873元，虧損0.17元。由此可見，除了LZJ-3不能產(chǎn)生利潤外，其他5個菌株均能達到盈余，其中LZJ-4效益最好，生長周期最短，從接種到子實體采收僅需21 d，并且菇型類似菊花，與市場需求相符，可向農(nóng)戶及工廠推廣。

3 小結(jié)與討論

對于食用菌栽培來說，菌株選育至關(guān)重要。試驗對6個裂褶菌菌株進行菌絲長速及出菇試驗。試驗結(jié)果表明，LZJ-4從菌絲長速、出菇產(chǎn)量、生長周期、菇型、肉質(zhì)等綜合指標來看表現(xiàn)突出，為優(yōu)良菌株，其次是LZJ-5，其余依次為 LZJ-6，LZJ-1，LZJ-2，LZJ-3。其中LZJ-2的菌絲長速雖然較快，但在出菇過程中表現(xiàn)出大多原基發(fā)生在開孔處的背面，對于適合其生長的溫度、濕度、通風等條件還需要不斷優(yōu)化。LZJ-3在顏色及菌肉上表現(xiàn)優(yōu)異，但產(chǎn)量低，菇型較差，為保留其優(yōu)質(zhì)特性，對于其栽培條件極其栽培培養(yǎng)基的篩選上還需要做進一步研究。研究為裂褶菌規(guī)模化、規(guī)范化栽培提供參考。