肖兆愛
(江蘇省建湖縣疾病預(yù)防控制中心,江蘇 建湖 224700)
沙門氏菌是一種病原體,不僅能夠引發(fā)疾病還會(huì)使食物受到污染,是人類食物中毒的重要原因之一[1],為了能夠有效找到沙門氏菌的檢驗(yàn)、分離、鑒定技術(shù),我院對(duì)其進(jìn)行了不斷的研究,因此,本文主要針對(duì)在不同培養(yǎng)基中對(duì)沙門氏菌檢出效果進(jìn)行分析。研究如下。
1.1 一般資料 在2013年6月1日-2018年6月1日期間,選取500例病毒樣本,分布采用SS、HE、XLD三種培養(yǎng)基,在相同溫度(37oC)和相同時(shí)間(24 h)下分析沙門氏菌的檢出效果。SS培養(yǎng)基的主要原料為:牛肉膏、脙胨、三號(hào)膽鹽、瓊脂、乳糖、檸檬酸鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鐵溶液、中性紅溶液、煌綠溶液,加熱溶化該培養(yǎng)基,備用。HE培養(yǎng)基的主要原料為:牛肉膏、蛋白胨、乳糖、氯化鈉、瓊脂、酸性復(fù)紅、去氧膽酸鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鐵銨,加熱溶化該培養(yǎng)基,備用。XLD培養(yǎng)基的主要原料為:酵母浸粉、氯化鈉、乳糖、苯酚紅、去氧膽酸鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鐵銨、瓊脂、苯酚紅,加熱溶化該培養(yǎng)基,備用。
1.2 方法 制作相關(guān)的培養(yǎng)基,在CB4789.4-2010標(biāo)準(zhǔn)下進(jìn)行相關(guān)的培養(yǎng)操作和鑒定。首先用緩沖蛋白胨水BPW將5支無菌棉簽進(jìn)行潤(rùn)濕,涂抹在每片病毒上,并將處理后的病毒樣本放入BPW增菌液中,在37oC對(duì)病毒樣本進(jìn)行恒溫培養(yǎng)6 h,然后加入SC、TTB兩種增菌液,在同一溫度下繼續(xù)培養(yǎng)18 h-24 h,然后將樣本分別放入SS、HE、XLD培養(yǎng)基中,37oC下恒溫培養(yǎng)24 h。觀察沙門氏菌的檢出效果。
1.3 觀察指標(biāo) 觀察三種培養(yǎng)基出現(xiàn)的現(xiàn)象,一般為無色的透明菌落,若有黑色中心的菌落就為沙門氏菌陽性,通過采用沙門氏菌鑒定法,對(duì)沙門氏菌的陽性和假陰性進(jìn)行鑒定[2]。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0分析數(shù)據(jù),計(jì)數(shù)和計(jì)量資料比較分別行χ2和t檢驗(yàn),P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
在本次研究中,一共入選了500份病毒樣本,其中SS培養(yǎng)基的假陽性為5%(25/500)、陽性21.6%(108/500),HE培養(yǎng)基的假陽性為8.8%(44/500)、陽性15.6%(108/500),XLD培養(yǎng)基的假陽性為8.2%(41/500)、陽性10.2%(51/500)。在本次研究中,HE培養(yǎng)基的假陽性率最高,其次是SS培養(yǎng)基,假陽性率最低的是XLD培養(yǎng)基,沙門氏菌檢出率依此為SS>HE>XLD(χ2=9.627, 7.814, 9.054;P=0.005, 0.012, 0.009)。
就目前而言,在檢驗(yàn)沙門氏菌的過程中,由于沙門氏菌結(jié)構(gòu)與革蘭陰性桿菌相似,且分布較廣、類型較多,導(dǎo)致沙門氏菌分解和鑒定的過程中效果較差。目前在進(jìn)行沙門氏菌檢驗(yàn)的時(shí)候,最常采用的方法為平板分離培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基具有操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn),能夠有效節(jié)約檢驗(yàn)材料,且在檢驗(yàn)過程中能夠有效促進(jìn)沙門氏菌的生長(zhǎng),提高沙門氏菌的檢驗(yàn)效果。但是由于沙門氏菌類型較多,同一種培養(yǎng)基在檢測(cè)不同類型的沙門氏菌的過程中,檢驗(yàn)效果有所不同。因此,在實(shí)際檢驗(yàn)過程中需要采用兩種或多種培養(yǎng)基對(duì)沙門氏菌進(jìn)行培養(yǎng)、檢測(cè),防止出現(xiàn)漏檢的情況,從而有效提高沙門氏菌檢出率[3]。其中,SS瓊脂是一種選擇性較強(qiáng)的培養(yǎng)基,主要成分為胨、牛肉膏、氮、碳源外還包括一定的選擇劑、抑制劑以及緩沖劑。HE賀氏菌屬培養(yǎng)基主要內(nèi)容包括緩沖蛋白胨水(BPW)、四硫磺酸鈉、增菌液以及亞硒酸鹽胱氨酸增菌液等,這些成分能夠使沙門菌和志賀菌有效分離。XLD是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于分離志賀氏菌,也可用于分離沙門氏菌,其成分主要為酵母浸粉,從而提供培養(yǎng)基所必須的氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。在本次研究中,通過對(duì)500份病毒樣本進(jìn)行檢測(cè),采用SS、HE、XLD三種培養(yǎng)基對(duì)其進(jìn)行培養(yǎng)以后,可以發(fā)現(xiàn)SS培養(yǎng)基的檢出率最高,假陽性最低,另外,SS的抑制效果要大于HE、XLD,因此,SS培養(yǎng)基由于具有良好的檢出效果。
綜上所述,針對(duì)在不同培養(yǎng)基中沙門氏菌檢出效果進(jìn)行分析后,SS的抑制效果大于HE、XLD,且HE、XLD的差異不大,沙門氏菌檢出率依此為SS、HE、XLD,在檢測(cè)沙門氏菌的時(shí)候,可優(yōu)先采用SS培養(yǎng)基。