復(fù)方中藥組分對胰島素抵抗糖尿病大鼠心肌過氧化的影響

劉永林 于曉婷 楊鑫 馮瑤 吳曉嵐 謝劍 宋光熠 劉文艷

【摘要】目的：證實(shí)復(fù)方中藥組分防治糖尿病及糖尿病心臟損傷的有效性以及探討其作用機(jī)制。方法：腹腔注射糖皮質(zhì)激素的方法復(fù)制大鼠糖尿病模型，對復(fù)方中藥組分進(jìn)行了藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)觀察，并對各組動物的血液和心臟組織相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行了測定。結(jié)果：大劑量復(fù)方中藥組分可升高胰島素抵抗糖尿病大鼠血漿和心臟組織的超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT），降低血漿和心臟組織的丙二（MDA）;小劑量復(fù)方中藥組分對心臟的SOD沒有影響，對血漿SOD以及血漿和心臟的CAT和MDA均可產(chǎn)生與大劑量相同的作用。結(jié)論：復(fù)方中藥組分通過抑制糖尿病大鼠細(xì)胞的脂質(zhì)過氧化而加強(qiáng)對心臟的保護(hù)作用，防治糖尿病及并發(fā)癥。

【關(guān)鍵詞】復(fù)方中藥組分;心肌;過氧化

糖尿病常累及心臟發(fā)病，其發(fā)生發(fā)展除了與代謝相關(guān)外，也與糖尿病神經(jīng)病變有關(guān)，使患者對疼痛的感覺不明顯，經(jīng)常發(fā)生無痛性心絞痛，增加了心肌梗死的發(fā)病率，病因的復(fù)雜性使得糖尿病心臟病缺乏有效的治療藥物。目前中藥及其有效組分對糖尿病及其并發(fā)癥的防治作用受到廣泛的關(guān)注，本實(shí)驗(yàn)研究旨在證實(shí)復(fù)方中藥組分防治糖尿病及糖尿病心臟病的有效性以及探討其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

8周齡（適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，體重190～210g）SPF級SD種系大鼠、繁育鼠全價(jià)固體顆粒飼料，由遼寧省長生生物技術(shù)有限公司提供（實(shí)驗(yàn)動物許可證為遼寧省科學(xué)技術(shù)廳簽發(fā)，許可證號：SCXK（遼）2010-0010）。地塞米松磷酸鈉注射液（國藥準(zhǔn)字號H410203272010241）購自鄭州羚銳制藥股份有限公司。黃芪、麥冬、三七皂苷等中藥多糖由北京普惠天悅生物技術(shù)有限公司提供。SOD、CAT，MDA等測定試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。酶標(biāo)儀（型號318C）為上海三科儀器有限公司產(chǎn)品。分光光度計(jì)（型號SPECORD plus200）為德國耶拿分析儀器股份公司產(chǎn)品。

1.2 方法

將應(yīng)用生理鹽水配制成濃度為0.2mg/ml的地塞米松溶液以1mg/Kg體重的標(biāo)準(zhǔn)對大鼠進(jìn)行腹腔注射制作胰島素抵抗大鼠糖尿病模型。1次/2日，連續(xù)注射1周后測定其空腹血糖，取血糖水平超過7.6mmol/L的大鼠為合格大鼠，隨機(jī)分為模型組和中藥組分干預(yù)組，共3組，每組10只、雌雄各半，分別為：模型對照組、大劑量干預(yù)組、小劑量干預(yù)組。大劑量組和小劑量組大鼠每天分別灌胃復(fù)方中藥組分500mg/Kg體重、50mg/Kg體重;模型對照組大鼠每天同樣體積生理鹽水灌胃，灌胃體積各組均為10ml/kg體重。另取10只大鼠、雌雄各半作為空白對照組，腹腔注射與實(shí)驗(yàn)組地塞米松同體積的生理鹽水，連續(xù)注射一周后每天以生理鹽水灌胃。各組大鼠連續(xù)給藥8周后斷頭采血栓測SOD、CAT、MDA;取心臟，10%組織勻漿后，3000r/min離心15min取上清液檢測SOD，CAT、MDA。指標(biāo)檢測按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

結(jié)果以x±s表示，采用SPSS12.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 心臟SOD、CAT、MDA的變化

連續(xù)給藥8周后糖尿病模型對照組心肌SOD、CAT含量明顯低于空白對照組，MDA活性明顯高于空白對照組;復(fù)方中藥組分大劑量組心肌SOD、CAT含量明顯高于糖尿病模型對照組，對MDA活性無明顯影響;小劑量可升高CAT、降低MDA，對SOD無影響。低詳見表1。

2.2 血漿SOD、CAT、MDA的變化

連續(xù)給藥8周后各組大鼠血漿SOD，CAT、MDA的檢測結(jié)果表明，糖尿病模型對照組SOD和CAT明顯低于空白對照組、MDA明顯高于正常對照組;復(fù)方中藥組分治療組無論是大劑量組還是小劑量組的大鼠，SOD和CAT均高于糖尿病模型對照組、MDA低于糖尿病模型對照組。詳見表2。

3 討論

糖尿病性心臟病死亡率較高，但可怕的不是糖尿病性心臟病，而是至今還有2/3以上的糖尿病患者不知道糖尿病與冠心病的密切關(guān)系。糖尿病患者往往會有胰島素抵抗，為了保證血糖的水平正常，胰島β細(xì)胞必須分泌較正常人高幾倍甚至幾十倍的胰島素，形成高胰島素血癥，最終導(dǎo)致血糖升高，長期的高血糖狀態(tài)又可導(dǎo)致代謝紊亂，使甘油三酷水平升高，而高密度脂蛋白卻降低，這些均增加動脈粥樣硬化的危險(xiǎn)性。且高血糖、高血脂、胰島素抵抗使心肌缺血氧化應(yīng)激增強(qiáng)，影響心肌細(xì)胞應(yīng)對再灌注損傷的能力，不斷變化的葡萄糖水平可降低抗氧化防御，使脂質(zhì)過氧化的狀態(tài)加劇，加重對心肌的損傷，使脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物MDA增多。

機(jī)體內(nèi)的SOD、CAT等酶系統(tǒng)具有抗氧化反應(yīng)能力[1]。SOD可對抗和阻斷氧自由基引起的細(xì)胞損害，并能對受損傷的細(xì)胞及時進(jìn)行修復(fù)[2];H₂O₂可與O₂反應(yīng)生成-OH，毒害細(xì)胞和組織。CAT能催化過氧化氫分解成O₂和H₂O，清除體內(nèi)的H₂O₂，保護(hù)細(xì)胞免受H₂O₂的損傷[2，3];

本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究表明由黃芪、麥冬、三七皂苷等中藥多糖組成的復(fù)方制劑對胰島素抵抗糖尿病大鼠的心臟有保護(hù)作用，其作用機(jī)制與升高SOD和CAT水平、降低MDA水平，抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)密切相關(guān)。

參考文獻(xiàn)

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