鄭州市第六人民醫(yī)院(450000)馮煦
祖國醫(yī)學(xué)中,慢性肝病被納入“膨脹”、“脅痛”以及“黃疸”等范疇之中,可對人類的身體健康造成較大損害[1]。并且,慢性肝病還具有一定的傳染性,病情往往較為嚴(yán)重,其發(fā)病通常和瘀、毒、熱以痰等因素密切相關(guān)[2]。因慢性肝病的危害性比較大,能夠嚴(yán)重?fù)p害患者的身心健康,所以,臨床醫(yī)師應(yīng)當(dāng)重視本病患者的早期診斷工作,讓患者能夠盡早得到正確的診治,從而有助于抑制其病情進(jìn)展,降低傳染率,促進(jìn)病情早日恢復(fù),提高預(yù)后效果。目前,PCR檢測法和膠體金層析法等手段在慢性肝病中都有著比較廣泛的應(yīng)用,但不同的檢測手段有其各自的優(yōu)缺點(diǎn)。為此,筆者將以90例慢性肝病患者為對象,著重分析3種不同的檢驗(yàn)方法在慢性肝病中的應(yīng)用價值,現(xiàn)作出如下報(bào)道。
1.1一般資料 90例慢性肝病患者,擇取自2017年2月~2018年6月本院收治的病例。按照奇偶數(shù)字分組的方式將所選病例分成3組,A、B、C各組均有30例。當(dāng)中,A組男性患者17例,女性患者13例;年齡在24~67歲之間,平均(45.26±10.17)歲。B組男性患者16例,女性14例;年齡在23~66歲之間,平均(45.02±10.36)歲。C組男性患者18例,女性患者12例;年齡在24~66歲之間,平均(45.37±10.62)歲?;颊呷朐汉蠼?jīng)臨床檢查確診符合《慢性乙肝防治指南(2005年)》[3]中的慢性肝病診斷標(biāo)準(zhǔn),有完整的病歷資料,依從性良好,能夠積極配合完成檢查,且簽署知情同意書。此研究通過醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn),對3組的年齡和就診時間等基線資料進(jìn)行比較,P>0.05,具有可比性。
1.2方法 A組采用PCR檢測法,詳細(xì)如下:取待測樣本,100ul,利用核酸提取液A(100ul)進(jìn)行稀釋,然后再以13000r/min的速率進(jìn)行離心處理,15min后,棄去上清液,并加入核酸提取液B(25ul),充分搖勻,并加熱至100℃,保持10min。此后,再以13000r/min的速率進(jìn)行離心處理,2min后,取HBV-cDNA反應(yīng)液(18ul)、Taq酶(2ul)、氯化鎂(3ul)以及熒光探針(3ul),并將之加入到離心管中,充分搖勻后進(jìn)行離心處理,并以26ul/管的量進(jìn)行分裝。分別取樣本以及標(biāo)準(zhǔn)品適量,并將之加入到反應(yīng)管中,待充分混勻后,利用熒光PCR儀完成PCR擴(kuò)增反應(yīng)處理,流程為:首先,于50℃環(huán)境下保持1min,然后于94℃環(huán)境下保持5min,此后于93℃環(huán)境下保持30s,最后于60℃環(huán)境下保持1.5min。根據(jù)上述溫度以及時間反復(fù)進(jìn)行40次。若D值<38,即可判定為陽性[4]。
B組采取膠體金層析法,詳細(xì)如下:對膠體金進(jìn)行制備,利用蒸餾水將氯金酸進(jìn)行充分的溶解,控制濃度為0.01%左右,然后取液體約100ml,并加熱至沸騰,此后,再加入1%檸檬酸三鈉(1ml),繼續(xù)加熱,待液體的顏色從白色轉(zhuǎn)變成為藍(lán)色直至紅色時,提示膠體金溶液制作成功。于室溫下保存膠體金溶液,使之冷卻。將IgM抗體均勻鋪在測試條上,并將之和吸水濾紙以及硝酸纖維素膜進(jìn)行重疊放置,同時粘貼于白色塑料片上。以1∶10的比例混合患者的血清以及生理鹽水,將測試條加樣端浸入血清當(dāng)中,待5~10min之后對結(jié)果進(jìn)行仔細(xì)的觀察。判斷標(biāo)準(zhǔn)[5]:陽性為紅色“+”,硬性為紅色“-”。未顯示紅色,提示測試失敗,需重新進(jìn)行檢測。
C組采用免疫化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)法,即:選擇cobas e601型的全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀,由“瑞士羅氏公司”提供,對樣品進(jìn)行規(guī)范化的檢測,需嚴(yán)格按照相關(guān)說明書中的內(nèi)容進(jìn)行。
1.3評價指標(biāo) 對3組的檢測結(jié)果進(jìn)行綜合分析,并比較各組的陽性檢出率。采取問卷調(diào)查法評估3組對檢測結(jié)果的滿意程度,分值為0~100分,比較滿意≥90分,一般滿意60~89分,不滿意<60分。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析研究數(shù)據(jù),t用于檢驗(yàn)計(jì)量資料,即(±s),χ2用于檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料,即[n(%)],P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1陽性檢出率分析 A組的肝病陽性檢出率為96.67%,比B組的73.33%以及C組的80.0%高,組間差異顯著(P<0.05)。B組的陽性檢出率和C組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
2.2患者滿意度分析 A組的患者滿意度為96.67%,比B組的80.0%以及C組的83.33%高,組間差異顯著(P<0.05)。
目前,慢性肝病在我國臨床上比較常見,可對患者的身心健康造成嚴(yán)重?fù)p害。對于大多數(shù)慢性肝病患者來說,其在發(fā)病后都不會表現(xiàn)出明顯癥狀,只有少數(shù)患者存在頭暈?zāi)垦?、面黃肌瘦、惡心嘔吐、身體疲勞以及發(fā)燒等癥狀。因部分患者的癥狀和感冒類似,所以,極容易被人們所忽視,導(dǎo)致本病早期診斷的準(zhǔn)確率明顯降低。相關(guān)資料中提及,慢性肝病具有虛實(shí)相兼的這一臨床特點(diǎn),并以肝功能損傷與肝纖維化等為主要病理改變,若為女性患者,比較容易發(fā)生月經(jīng)不調(diào)以及低熱的情況,而男性患者則比較容易出現(xiàn)性功能減退亦或者是紊亂的情況。因慢性肝病具有傳染性,且患者在發(fā)病后病情往往較為嚴(yán)重,不僅能夠損害其身心健康,同時還會影響日常生活以及工作,所以,臨床應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)對慢性肝病患者進(jìn)行早期正確診治的力度。
對于慢性肝病的檢測方法,臨床比較常用的有PCR檢測法、免疫化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)法和膠體金層析法等。當(dāng)中,PCR檢測法能夠利用病毒的DNA片段于體外進(jìn)行擴(kuò)增,同時結(jié)合電泳技術(shù)等,具有敏感性高、操作簡便、特異性強(qiáng)與快捷等特點(diǎn),能夠顯著提高慢性肝病患者的陽性檢出率,且有助于為臨床醫(yī)師診斷患者的病情提供重要指導(dǎo)。在劉欣的研究[6]中,選擇了慢性肝病患者共108例,將之隨機(jī)分成3組,每組36例,分別采取膠體金層析法、免疫化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)法和PCR檢測法進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示,膠體金層析法檢出陽性79例(73.15%)、PCR檢測法檢出陽性102例(94.44%)、免疫化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)法檢出陽性91例(84.26%),通過比較發(fā)現(xiàn),患者PCR檢測的陽性檢出率最高。表明,在慢性肝病中采用PCR檢測法可取得比膠體金層析法和免疫化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)法更顯著的成效,有助于提高陽性檢出率。此研究中,A組的陽性檢出率比B組和C組高,組間差異顯著(P<0.05),這和劉欣的研究結(jié)果相似。A組的患者滿意度同B、C兩組比較有顯著差異,P<0.05。提示PCR檢測法的運(yùn)用,可顯著提高慢性肝病患者的陽性檢出率,比膠體金層析法和免疫化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)法具有更高的應(yīng)用價值。
綜上所述,積極采取PCR檢測法對慢性肝病患者進(jìn)行檢驗(yàn),可有效提高其陽性檢出率,并且此法還具有敏感性高、操作簡便以及特異性強(qiáng)等特點(diǎn),能夠?yàn)槁愿尾〉脑缙谠\斷提供重要的指導(dǎo),建議采納。