王麗巖 劉兆熙

(大慶醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)?？蒲刑?，大慶，163321)

失眠嚴(yán)重影響了人們的身體狀態(tài)和心理健康水平，也成為誘發(fā)諸多疾病發(fā)生的原因[1]。安神藥是中醫(yī)常用藥物，在用于失眠治療時(shí)具有著顯著的療效，且不良反應(yīng)較低[2]。本次研究將針對(duì)中醫(yī)常用的兩類安神藥物在用于失眠治療時(shí)對(duì)睡眠識(shí)相的影響進(jìn)行分析。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 選取Wistar雄性大鼠，平均體質(zhì)量為(220±5)g。日常飼養(yǎng)溫度為(22±2)℃，12 h晝夜光照循環(huán)一次，自由采食和進(jìn)水。

1.1.2 藥物 酸棗仁，柏子仁、遠(yuǎn)志、朱砂、磁石。稱取適量的柏子仁、遠(yuǎn)志和酸棗仁，分別加入5倍量的蒸餾水浸泡約1 h，然后煎煮2次，過濾取液，將濾液濃縮，藥物濃度分別為1 g/mL、1 g/mL、2 g/mL。稱取適量磁石，加入5倍量的蒸餾水后浸泡1 h，重復(fù)煎煮2次后，煎煮時(shí)間分別為60 min和50 min，過濾取液，濃縮濾液至3.5 g/mL。稱取適量的淀粉放入熱水中攪拌均勻后制成2.5%的淀粉糊放涼，將研碎的朱砂加入到制備好的淀粉糊，制成0.12 g/mL的混懸液。

1.1.3 試劑與儀器 戊巴比妥鈉(應(yīng)用時(shí)以蒸餾水制備為濃度1%溶液)、自凝牙托水、注射液青霉素鈉、自凝牙托粉。

ND-97型數(shù)字化腦電圖儀、恒溫恒濕自動(dòng)光控電子屏蔽室、大鼠腦立體定位于、大鼠失眠刺激器、自制有機(jī)玻璃箱。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備 大鼠行戊巴比妥鈉腹腔麻醉，給藥劑量為40 mg/kg，應(yīng)用腦立體定位儀將其固定好后，將頭部剪毛消毒，剪開頭部皮膚后將顱骨暴露，剝離骨膜。與顱骨上(AP-2,R2;AP+2,R2)部位鉆孔后，將直徑1 mm的2個(gè)不銹鋼螺絲置入到大鼠顱腦內(nèi)，在不穿透硬硬膜的基礎(chǔ)上與之接觸，作為皮層電極；在額骨的正中點(diǎn)鉆孔后置入接地電極，將其與螺釘一起做成微型插座，應(yīng)用牙科水泥固定。將手術(shù)大鼠放入到有機(jī)玻璃籠中單獨(dú)飼喂，每天腹腔注射青霉素鈉，連續(xù)給藥3 d，休息7 d待測(cè)。行腦電圖描記前，先給予大鼠適應(yīng)性訓(xùn)練。

選取術(shù)后恢復(fù)效果較好的大鼠50只，分為5組，每組10只，分別為柏子仁組、遠(yuǎn)志組、酸棗仁組、磁石組、朱砂組。術(shù)后第八天給予試驗(yàn)大鼠10 mL/kg蒸餾水灌胃處理，然后記錄各組大鼠每天9:00-17:00的腦電(EEG)信號(hào)。術(shù)后9天大鼠蒸餾水灌胃處理后，在上午9點(diǎn)時(shí)在其籠內(nèi)放置電柵，開啟失眠刺激器，設(shè)備頻率設(shè)置為每30 min刺激30 s，造成失眠大鼠模型。

1.2.2 給藥方法 術(shù)后第10天開始在每天早上灌胃給予模型大鼠藥物干預(yù)，根據(jù)分組分別應(yīng)用制備好的柏子仁、遠(yuǎn)志、酸棗仁、磁石和朱砂灌胃，給藥劑量分別為生藥10 g/kg、10 g/kg、17.5 g/kg、35 g/kg、0.6 g/kg，連續(xù)給藥7 d。最后一次給藥30 min后，給予大鼠電刺激后行腦電描記。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法 參考相關(guān)文獻(xiàn)[3]，將試驗(yàn)大鼠覺醒-睡眠分成4個(gè)識(shí)相，分別為覺醒(Wake)、慢波睡眠I期(SWS1)、慢波睡眠II期(SWS2)和快速動(dòng)眼睡眠(REMS)。沒給獨(dú)立睡眠時(shí)相持續(xù)時(shí)間最少在20 s以上，并以每20 s作為一個(gè)分析單元。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料數(shù)據(jù)以率(%)表示，2組比較用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)電刺激后大鼠Wake、SWS1、TST與電刺激前比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

在應(yīng)用藥物干預(yù)后，各組失眠大鼠的W期減少，TST明顯延長(zhǎng)。與給藥前比較，養(yǎng)心安神要中的柏子仁、遠(yuǎn)志能夠延長(zhǎng)失眠大鼠SWS1期，而酸棗仁能夠延長(zhǎng)大鼠SWS1期和SWS2期，但不會(huì)對(duì)REMS造成現(xiàn)在影響。重鎮(zhèn)安神藥磁石和朱砂都能夠延長(zhǎng)大鼠SWS1期、SWS2期和REMS。重鎮(zhèn)安神藥磁石和朱砂在延長(zhǎng)SWS2期和TST作用強(qiáng)度要高于養(yǎng)心安神藥物(P<0.05)，但這2種藥物的作用無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表1 電刺激前后大鼠各項(xiàng)指標(biāo)水平差異分析

注：與刺激前比較，*P<0.05；同階段，與養(yǎng)心安神藥效果比較，△P<0.05

3 討論

中醫(yī)稱失眠為“不寐”“不得眠”，指機(jī)體內(nèi)在氣血以及腑臟功能失調(diào)，進(jìn)而導(dǎo)致經(jīng)常性的出現(xiàn)入睡時(shí)間不足，無(wú)法獲得正常的睡眠[4-5]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，應(yīng)用腦電圖對(duì)大鼠睡眠識(shí)相進(jìn)行觀察，在其各個(gè)睡眠階段中，以SWS和REMS最重要，其中SWS對(duì)于機(jī)體的發(fā)育和恢復(fù)疲勞有著重要的意義，而REMS則對(duì)于大腦的發(fā)育和智力發(fā)展有著重要意義[6-7]。本文在研究中將失眠模型的大鼠分組，分別給予其柏子仁、遠(yuǎn)志、酸棗仁、磁石、朱砂干預(yù)，研究結(jié)果可以看出，養(yǎng)心安神類藥物與重鎮(zhèn)安神藥物對(duì)于大鼠睡眠識(shí)相有著顯著差異性，養(yǎng)心安神藥對(duì)于REMS影響較低，但重鎮(zhèn)安神藥對(duì)于REMS則具有顯著的影響。同時(shí)通過研究可以看出，研究納入的5種中藥對(duì)于失眠大鼠睡眠識(shí)相的影響與化學(xué)類藥物有著顯著不同，化學(xué)類藥物多以延長(zhǎng)整體睡眠時(shí)長(zhǎng)為主，但嚴(yán)重?fù)p傷了SWS和REMS，其延長(zhǎng)的是淺睡眠時(shí)間，難以在根本上改變睡眠治療，導(dǎo)致失眠患者極易出現(xiàn)藥物依賴性和其他不良反應(yīng)[8]。而安神類中藥在用于失眠干預(yù)治療中，能夠顯著延長(zhǎng)SWS，從根本上改善患者的睡眠質(zhì)量。另外本次研究結(jié)果可以看出，磁石、朱砂對(duì)于SWS的延長(zhǎng)效果要顯著優(yōu)于養(yǎng)心安神類藥物，但對(duì)于其他各項(xiàng)指標(biāo)的干預(yù)效果則與養(yǎng)心安神類藥物基本接近。表明研究納入的5種藥物均具有改善大鼠睡眠識(shí)相的效果。

表2 各組大鼠給藥前后各項(xiàng)指標(biāo)水平分析

注：與給藥前比較，*P<0.05；與磁石給藥后比較，△P<0.05；與朱砂給藥后比較，▲P<0.05

重鎮(zhèn)安神類和養(yǎng)心安神類藥物在用于失眠治療時(shí)具有著良好的效果，雖然各類藥物對(duì)于大鼠睡眠識(shí)相的影響各有不同，但是均能夠在一定程度上提高大鼠睡眠質(zhì)量，但磁石和朱砂在延長(zhǎng)SWS的作用方面要強(qiáng)于柏子仁、遠(yuǎn)志和酸棗仁，進(jìn)而為失眠的臨床治療工作提供了參考依據(jù)。