自體DC-CIK免疫療法治療非小細胞肺癌患者的效果及對肺功能的影響

鄢清元 熊巍 楊文平

【摘要】 目的：探討自體DC-CIK免疫療法治療非小細胞肺癌患者的效果及對患者肺功能的影響。方法：選取2019年12月-2020年12月于本院治療的非小細胞肺癌患者74例。隨機分為對照組和研究組，每組37例。對照組應用NP化療，研究組在此基礎上應用自體DC-CIK免疫療法。比較兩組免疫功能、肺功能和凝血功能情況。結果：治療后，研究組CD4+、CD3+、NK均高于對照組，CD8+低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。治療后，兩組的FEV1/FVC比較，差異無統計學意義（P>0.05）;治療后，研究組FVC、FEV1均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。治療后，研究組PLT、PT、FIB均低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。結論：非小細胞肺癌患者應用自體DC-CIK免疫療法治療效果較好，可以有效提高患者的機體免疫力，改善凝血功能和肺功能，有利于疾病的控制，從而提高治療效果。

【關鍵詞】 非小細胞肺癌 自體DC-CIK免疫療法 肺功能

The Effect of Autologous DC-CIK Immunotherapy on Patients with Non-small Cell Lung Cancer and Its Influence on Lung Function/YAN Qingyuan， XIONG Wei， YANG Wenping. //Medical Innovation of China， 2021， 18（16）： 0-082

[Abstract] Objective： To explore the effect of autologous DC-CIK immunotherapy in the treatment of patients with non-small cell lung cancer and its influence on the lung function of patients. Method： Select 74 patients with non-small cell lung cancer who were treated in our hospital from December 2019 to December 2020. They were randomly divided into control group and study group， with 37 cases in each group. The control group was treated with NP chemotherapy， and the study group was treated with autologous DC-CIK immunotherapy on this basis. The immune function， lung function and blood coagulation function of the two groups were compared. Result： After treatment， the CD4+， CD3+ and NK of the study group were higher than those of the control group， and CD8+ was lower than the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. After treatment， there was no significant difference in FEV1/FVC between the two groups （P>0.05）. After treatment， FVC and FEV1 in the study group were higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. After treatment， the PLT， PT and FIB of the study group were lower than those of the control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion： The effect of autologous DC-CIK immunotherapy for patients with non-small cell lung cancer is better， which can effectively improve the patient’s immunity， improve coagulation function and lung function， and help control the disease， thereby improving the therapeutic effect.

[Key words] Non-small cell lung cancer Autologous DC-CIK immunotherapy Lung function

First-author’s address： Fengcheng People’s Hospital， Fengcheng 331100， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.16.019

臨床中常見的一種惡性腫瘤就是肺癌，其中發(fā)病率占比最高的就是非小細胞肺癌（NSCLC），此類患者疾病癥狀不明顯，容易忽視，因此確診時通常已經處于中晚期，主要的治療方法即放化療，但在延長生存期方面效果不佳[1]。腫瘤的治療在臨床中的重視程度越來越高，如今治療的方法較多，而免疫治療成為腫瘤治療的首選方式，效果較好[2]。樹突狀細胞（DC）是機體中主要的且功能最強大的一種抗原遞呈細胞，可以誘導淋巴細胞反應，與此同時對β細胞的增殖有抑制作用，將免疫應答活化;而細胞因子誘導殺傷細胞（CIK）是高效且新型的免疫效應細胞，有廣譜殺瘤活性，可以有效改善機體的免疫功能，具有較強的腫瘤殺傷力[3]。本文主要探討NSCLC患者應用DC-CIK免疫療法治療的效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年12月-2020年12月于本院治療的非小細胞肺癌患者74例。（1）納入標準：確診為NSCLC者[4];依從性好者;體力狀況評分（KPS）≥60分者;身體其他指標處于正常范圍內的患者。（2）排除標準：肝腎功能異常者;合并其他惡性腫瘤者;有免疫疾病史者;有血液系統疾病者;有精神病史者;臨床資料不完整者;有嚴重感染者;有放、化療史或手術史者;身體重要器官存在嚴重疾患者。隨機分為對照組和研究組，每組37例?；颊呔炗喼橥鈺狙芯拷泜惱砦瘑T會批準。

1.2 方法 對照組應用NP化療治療，第1天和第8天時為患者靜脈滴注奈達鉑（生產廠家：吉林恒金藥業(yè)股份有限公司，批準文號：國藥準字H20051481，規(guī)格：50 mg）100 mg/m2和注射用酒石酸長春瑞濱（生產廠家：春雷允上藥業(yè)有限公司，批準文號：國藥準字H20041927，規(guī)格：10 mg）25 mg/m2，1個周期為21 d，共治療2個周期。研究組在此基礎上應用自體DC-CIK免疫療法，首先制備DC細胞，采集單個核細胞≥1 109個，通過淋巴分離液分離后對PBMC進行收集，加入BPMI-1640培養(yǎng)液（內含10%FBS），對細胞濃度進行調整，時間為120 min，貼壁細胞中加入IL-4等半定量的細胞因子和腫瘤抗原進行DC培養(yǎng)，每3天進行1次換液，在第6天時將100 ng/mL的CD40L和500 U/mL的TNF-α加入其中進行細菌培養(yǎng)和表型分析，在第7天的時候進行收集和回輸。制備CIK細胞，通過懸浮細胞培養(yǎng)，加入100 ng/mL的CD3+單抗以及100 U/mL的IL-1細胞因子，1 d后再次加入500 U/mL的IL-2和21 000 U/mL的IFN-γ繼續(xù)進行培養(yǎng)，每3天進行1次換液，在第7天的時候送檢抽樣，第14天的時候收集和回輸。共治療2個周期。

1.3 觀察指標及判定標準 （1）比較兩組治療前后的免疫功能指標變化情況，其中包含T淋巴細胞群CD8+，CD4+和CD3+以及自然殺傷（NK）細胞，分別在治療前后抽取患者的外周血3 mL，通過流式細胞儀進行檢測。（2）比較兩組治療前后的肺功能指標變化情況，其中包含FEV1/FVC、FVC、FEV1。（3）比較兩組治療前后的凝血功能指標變化情況，其中包含血小板（PLT）、血漿凝血酶原時間（PT）、纖維蛋白原（FIB）。

1.4 統計學處理 采用SPSS 18.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，組內比較采用配對t檢驗;計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較 對照組37例，病理類型：6例大細胞癌，12例鱗癌，19例腺癌;臨床分期：11例ⅢA期，15例ⅢB期，11例Ⅳ期;年齡41～77歲，平均（56.3±2.1）歲;女14例，男23例。研究組37例，病理類型：6例大細胞癌，11例鱗癌，20例腺癌;臨床分期：12例ⅢA期，16例ⅢB期，9例Ⅳ期;年齡41～77歲，平均（55.9±2.4）歲;女17例，男20例。兩組一般資料比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組治療前后免疫功能指標變化情況比

較 治療后，研究組CD4+、CD3+、NK均高于對照組，CD8+低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.3 兩組治療前后肺功能指標變化情況比較 治療后，兩組的FEV1/FVC比較，差異無統計學意義（P>0.05）;治療后，研究組FVC、FEV1均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表2。

2.4 兩組治療前后凝血功能指標變化情況比較 治療前，兩組的PLT、PT、FIB比較，差異均無統計學意義（P>0.05）;治療后，研究組PLT、PT、FIB均低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表3。

3 討論

肺癌是常見的一種惡性腫瘤，主要癥狀為呼吸困難，干咳，低熱以及腹痛，嚴重時會咳出血絲，引發(fā)阻塞性肺炎等并發(fā)癥，威脅患者的生命健康，此病進展快，且預后效果差[5]。其中最常見的一種肺癌類型就是非小細胞肺癌（NSCLC），針對晚期腫瘤，常用的治療方法即放化療和手術，雖然可以直接殺傷腫瘤細胞，但無法徹底清除，容易復發(fā)、轉移[6]。近幾年，人們的生活方式和作息習慣發(fā)展改變，外加大氣污染嚴重，導致此病的發(fā)病率不斷提高，降低患者的生存質量[7]。相關研究指出，針對晚期NSCLC患者應用常規(guī)治療方法效果不佳，無法有效阻止疾病的進展[8]。隨著基因序列和分子分型研究的不斷深入，較多靶向藥物應用于肺癌患者的臨床治療中，可以有效提高患者的生存周期，但針對NSCLC患者效果不佳[9]。腫瘤治療的方法之一就是細胞免疫治療，在臨床中，相對于其他治療方法，其已被證實可以提高患者的免疫功能，對腫瘤細胞有明顯的殺傷作用，可以提高患者的生活質量，延長生存時間，且不良反應少，安全性高，能降低放化療所產生的毒副作用[10]。

機體免疫力降低是導致腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要因素，機體無法及時有效地將突變、惡變的腫瘤細胞清除，DC是機體中重要的一種抗原提呈細胞，能有效識別腫瘤抗原，其含有豐富的共刺激分子（B7-2）和細胞黏附分子（TCAM-1），可以刺激T細胞，促使機體產生抗腫瘤反應[11]。另外其還可以將識別的信號傳送給CIK細胞，從而保證CIK能及時將腫瘤細胞殺傷[12]。CIK有較強的殺傷腫瘤細胞的作用，其活化后可以產生較多細胞因子，活化、增殖T細胞，有利于腫瘤細胞的殺滅[13]。DC、CIK是組成細胞免疫治療的重要部分，兩者聯合具有高效的免疫反應，目前醫(yī)學技術不斷完善，DC-CIK免疫療法在臨床中廣泛應用，相關研究指出，共同培養(yǎng)DC和CIK，可以提高其免疫和增殖功能[14]。DC-CIK免疫療法可以單獨應用，也可以輔助用于放化療或手術治療后，可以提高生存質量和療效，有研究表明，化療后給予DC-CIK免疫療法可以對腫瘤細胞的增殖進行抑制，甚至可以將腫瘤細胞完全殺滅，且應用后不會危害機體自身的免疫功能[15]。其成為首選治療腫瘤的有效方法之一，在消除腫瘤，預防復發(fā)，改善患者生存質量方面提供了新途徑[16]。

目前臨床中認為DC-CIK免疫療法的抗腫瘤機制主要和以下幾點有關：（1）可以增加細胞因子的釋放量，共培養(yǎng)時會增加DC表面的CD86、B7-1、HLA-DR、B7-2等，同時高分泌IFN-γ、IL-12以及IL-2等細胞因子，從而促進CIK的增殖;另外，DC可以增加CIK對IFN的分泌量，同時延長分泌IFN的時間[17]。（2）可以強化細胞毒性，共培養(yǎng)時DC會高分泌IL-12因子，從而增加CD56+的分泌，提高CIK的抗腫瘤活性和細胞毒作用，另外CIK細胞分泌的CD40L會結合DC分泌的CD40，從而直接對腫瘤的增殖進行抑制[18]。（3）提高了細胞增殖的活性，較多研究表明共培養(yǎng)后的CIK相較于同源細胞增殖活性更強，提高了其抗腫瘤的活性[19]。較多研究指出，應用DC-CIK免疫療法治療NSCLC患者，可以有效改善患者的一般狀況和免疫功能，副作用小，安全性高，抗腫瘤效果好，聯合化療可以延長患者的生存期，改善其生活質量[20]。

CD8+、CD4+、NK是重要的預后評估觀察療效和免疫狀態(tài)的指標，其中CD8+的增多是導致免疫降低的主要原因[21]。本次研究，對照組應用NP化療，研究組在此基礎上應用自體DC-CIK免疫療法治療，結果顯示：治療后，研究組CD4+、CD3+、NK均高于對照組，CD8+低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），表明其具有調節(jié)機體免疫功能的作用，有利于免疫功能和生活質量的提高。分析原因在于單獨應用NP雖然可以殺傷腫瘤細胞，但也會對其他的正常細胞造成損傷，從而降低機體的免疫力，增加并發(fā)癥發(fā)生的概率[22]。而聯合應用自體DC-CIK免疫療法，可以改善免疫功能，提高抗腫瘤的能力，從而提高患者的生存質量[23]。腫瘤的侵襲，生長和遷移均與凝血纖溶的紊亂息息相關，而相關研究指出，應用DC-CIK免疫療法可以有效抑制腫瘤的侵襲，改善機體的凝血功能[24]。本研究結果顯示：治療后，兩組的FEV1/FVC比較，差異無統計學意義（P>0.05）;治療后，研究組FVC、FEV1均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。治療后，研究組PLT、PT、FIB均低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），表明DC-CIK可以有效改善患者的肺功能和凝血相關指標，有利于疾病的控制，從而提高治療效果，延長生存周期，改善生存質量。

綜上所述，非小細胞肺癌患者應用自體DC-CIK免疫療法治療效果較好，可以有效提高患者的機體免疫力，改善凝血功能和肺功能，有利于疾病的控制，值得推廣和應用。

參考文獻

[1]艾星浩，蔡勇，褚倩，等.放療聯合免疫治療非小細胞肺癌：前沿學術問題專家交流共識[J].中國肺癌雜志，2020，23（6）：132-140.

[2]王鑫，鐘殿勝.EGFR突變非小細胞肺癌免疫治療相關研究進展[J].中國肺癌雜志，2019，22（8）：71-75.

[3] Morgan R L L，Ryan D N，Alona M，et al.Impact of Age on Outcomes with Immunotherapy in Patients with Non-Small Cell Lung Cancer[J].J Thorac Oncol，2019，14（3）：547-552.

[4]金佳男，徐裕金，陳夢圓，等.放療聯合免疫檢查點抑制劑治療非小細胞肺癌研究進展[J].中華放射腫瘤學雜志，2020，29（6）：477-481.

[5] Azkona E，Carrera S，Rubio I，et al.EP1.04-07 Influence of Radiotherapy in Second-Line Treatment with Immunotherapy in Patients with Non-Small Cell Lung Cancer[J].Journal of Thoracic Oncology，2019，14（10）：S969.

[6]李穎佳，陳輝，廖金鳳，等.循環(huán)腫瘤細胞用于監(jiān)測非小細胞肺癌新輔助免疫綜合治療療效的臨床研究[J].中華預防醫(yī)學雜志，2021，55（2）：233-238.

[7]趙磊，林濤.K-ras基因突變與吉非替尼治療晚期非小細胞肺癌療效的關系[J].中華實驗外科雜志，2019，36（3）：445.

[8] Ghysen K，Vansteenkiste J.Immunotherapy in patients with early stage resectable nonsmall cell lung cancer[J].Current Opinion in Oncology，2019，31（1）：13-17.

[9]王麗萍.非小細胞肺癌的靶向和免疫治療進展[J].鄭州大學學報（醫(yī)學版），2020，55（2）：176-182.

[10]溫少迪，沈波.非小細胞肺癌免疫治療作用機制及臨床研究現狀[J].南京醫(yī)科大學學報（自然科學版），2020，40（11）：175-182.

[11]姚舒洋，張毅.可手術的局部晚期非小細胞肺癌的新希望：新輔助免疫治療[J].中國肺癌雜志，2020，23（1）：55-59.

[12] Galli G，Toma A D，Pagani F，et al.P1.04-38 Efficacy and Safety of Immunotherapy in Elderly Patients with Non-Small Cell Lung Cancer[J].Journal of Thoracic Oncology，2019，14（10）：S454.

[13]張露，劉相良，陳曉.EGFR突變型非小細胞肺癌腦轉移的靶向治療和免疫治療進展[J].中國腫瘤生物治療雜志，2019，26（9）：1035-1041.

[14]李向敏，樊再雯.免疫檢查點抑制劑在非小細胞肺癌治療中面臨的問題[J].腫瘤防治研究，2019，46（6）：64-68.

[15]周彩存，王潔，步宏，等.中國非小細胞肺癌免疫檢查點抑制劑治療專家共識（2019年版）[J].中國肺癌雜志，2020，23（2）：7-18.

[16] Ramdani H O E K，Falk M，Schatz S，et al.Evaluation of combined biomarkers for tumor response to immunotherapy （I/O） in patients with advanced non-small cell lung cancer （NSCLC）[J].Journal of Clinical Oncology，2019，37（15 suppl）：e14269.

[17]孟騰，徐美林，耿華，等.長鏈非編碼RNA BC200在非小細胞肺癌患者組織中的表達及作用[J].中國腫瘤臨床，2019，46（5）：223-227.

[18]劉夏，鐘殿勝.BRAF突變型非小細胞肺癌免疫檢查點 抑制劑治療進展[J].中國肺癌雜志，2019，22（9）：583-589.

[19]李悅，尹秀艷，劉婉露，等.腎癌DC-CIK免疫治療對相關細胞因子的影響[J].中國免疫學雜志，2020，36（9）：1075-1079.

[20]張智博，李曄，袁方，等.免疫檢查點抑制劑治療EGFR-TKI耐藥晚期非小細胞肺癌的療效及不良反應[J].中國腫瘤臨床，2020，47（1）：24-28.

[21]李茹恬，朱正飛，王立峰，等.放療聯合免疫檢查點抑制劑治療Ⅲ期不可切除非小細胞肺癌研究進展[J].中華放射腫瘤學雜志，2019，28（11）：872-875.

[22]錢磊，馮繼鋒.晚期非小細胞肺癌抗血管生成聯合免疫治療的理論基礎及臨床應用研究進展[J].山東醫(yī)藥，2020，60（15）：95-98.

[23]徐嵩，趙世康，任凡，等.非小細胞肺癌新輔助靶向及免疫治療研究進展和展望[J].中國腫瘤臨床，2020，47（6）：299-303.

[24]沈珠，曹國文，王吉，等.非小細胞肺癌合并甲狀腺功能亢進患者的免疫治療及藥學監(jiān)護[J].中國醫(yī)學科學院學報，2020，42（1）：132-135.

（收稿日期：2021-03-17） （本文編輯：姬思雨）