王磊 吳學(xué)忠

Rh血型系統(tǒng)是一種重要且復(fù)雜的血型系統(tǒng)，由于紅細(xì)胞膜上Rh復(fù)合物的多樣性，形成了多種具有強(qiáng)抗原性的Rh血型抗原表位，其臨床重要性僅次于ABO血型系統(tǒng)[1]。與臨床密切相關(guān)的Rh血型抗原主要有D、C、c、E、e，輸血或妊娠可導(dǎo)致相應(yīng)不規(guī)則抗體的產(chǎn)生，引起不同嚴(yán)重程度的Rh系統(tǒng)溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血性疾?。℉DN）[2，3]。目前，我國(guó)現(xiàn)行的《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》[4]對(duì)受血者和供血者要求進(jìn)行ABO、Rh（D）血型檢測(cè)，但對(duì)Rh血型系統(tǒng)C、c、E、e抗原尚未要求，受血者可能存在Rh（C、c、E、e）不相容性輸血。江曉明[5]、史恩祥[6]等研究表明，C、c、E、e抗原不相容性輸血導(dǎo)致了受血者產(chǎn)生相應(yīng)不規(guī)則抗體，增加了患者再次輸血時(shí)配血相合的難度，影響患者的及時(shí)治療。近年來(lái)諸多文獻(xiàn)報(bào)道[7-9]受血者Rh（C、c、E、e）血型不規(guī)則抗體產(chǎn)生，致使交叉配血不合。為了解我院受血者與其供血者Rh（D、C、c、E、e）抗原相容情況，本研究收集ABO、Rh（D）、交叉配血均相合的受血者和供血者血樣，在保存期內(nèi)進(jìn)行Rh（D、C、c、E、e）抗原檢測(cè)，回顧性分析受、供者Rh（D、C、c、E、e）抗原和表型分布差異及Rh（D、C、c、E、e）抗原相合、相容和不相容性輸血的比率并探討其臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

材料與方法

1 樣本來(lái)源及分組 收集我院2019年6月9日～2020年1月6日期間ABO、Rh（D）、交叉配血均相合的418例受血者、710例供血者的儲(chǔ)存血樣。

Rh（D、C、c、E、e）抗原相容情況分為以下三種：相合，即受血者與供血者Rh（D、C、c、E、e）表型完全一致；相容，即受血者與供血者表型不完全一致，且受血者具有的Rh抗原包含供血者具有的全部Rh抗原；不相容，即受血者與供血者表型不完全一致，且供血者具有的Rh抗原包含受血者不具有的Rh抗原。

2 試劑與儀器 ABO及RhD血型檢測(cè)卡（伯樂(lè)生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品），抗-C、抗-c、抗-E、抗-e試劑（IgM型）（上海血液生物醫(yī)藥），抗人球蛋白試劑（上海血液生物醫(yī)藥），抗體篩選紅細(xì)胞試劑盒及抗體鑒定紅細(xì)胞試劑盒（上海血液生物醫(yī)藥），凝聚胺介質(zhì)試劑盒（珠海貝索），抗人球蛋白微柱凝膠卡（伯樂(lè)生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品）。

孵育器（ID-Incubator 37 S Ⅰ），離心機(jī)（IDCentrifuge 12 S Ⅱ），血清學(xué)低速離心機(jī)（安徽中科中佳）。

3 檢測(cè)方法 RhD抗原檢測(cè)采用微柱凝膠法，Rh（C、c、E、e）抗原檢測(cè)采用試管鹽水法，交叉配血試驗(yàn)采用鹽水法+凝聚胺法（或抗人球蛋白微柱凝膠卡式法），不規(guī)則抗體篩選和鑒定采用試管鹽水法+抗人球蛋白微柱凝膠卡式法。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 25.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料之間的比較采用卡方檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 受、供者Rh（D、C、c、E、e）抗原及表型的分布比較 418例受血者中Rh（D、C、c、E、e）抗原陽(yáng)性比例分別為99.52%、90.67%、62.68%、49.76%和93.30%，710例供血者中Rh（D、C、c、E、e）抗原陽(yáng)性比例分別為99.30%、89.86%、55.63%、44.37%和93.52%，受、供者相應(yīng)Rh（D、C、c、E、e）抗原分布無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 受、供者Rh（D、C、c、E、e）抗原分布比較

418例受血者中Rh表型以CcDEe和CCDee為主，分別占比40.67%和37.32%；710例供血者中Rh表型以CCDee和CcDEe為主，分別占比43.80%和34.23%。受血者CcDEe表型分布比例高于供血者，供血者CCDee表型分布比例高于受血者，受、供者CcDEe和CCDee表型分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

2 供血者與相應(yīng)受血者Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容情況 710例供血者與相應(yīng)受血者Rh（D、C、c、E、e）抗原相合、相容和不相容例數(shù)分別為229例、237例和244例，比例分別為32.25%、33.38%和34.37%。244例供、受者不相容以cE雙抗原不合占比最高（50.00%），其余依次為Ce雙抗原、E抗原、c抗原、C抗原和e抗原不合，見(jiàn)表3。

表2 受、供者Rh（D、C、c、E、e）表型分布比較

表3 供血者與相應(yīng)受血者Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容情況

3 不同表型受血者Rh（D、C、c、E、e）不相容性輸血的概率 不同表型受血者Rh（D、C、c、E、e）不相容的概率不同，ccDEE、ccDEe和CcDEE表型的受血者不相容性輸血概率較高，見(jiàn)表4。

4 輸注不同個(gè)數(shù)供者血液的受血者Rh（D、C、c、E、e）不相容性輸血概率 418例輸注單個(gè)供者、兩個(gè)供者和多個(gè)供者血液的受血者中Rh（D、C、c、E、e）抗原相合（容）性輸血例數(shù)分別為143例、74例和24例，不相容性輸血例數(shù)分別為80例、71例和26例，輸注多個(gè)不同供者血液的受血者發(fā)生Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容性輸血的概率最高（P＜0.05），見(jiàn)表5。

表4 不同表型受血者Rh（D、C、c、E、e）不相容性輸血概率

表5 輸注不同個(gè)數(shù)供者血液的受血者與供血者Rh（D、C、c、E、e）匹配情況分析

討 論

Rh血型系統(tǒng)抗原是人類紅細(xì)胞抗原家族的重要成員之一，具有重要的臨床意義。不同人群Rh抗原的表達(dá)與分布不完全相同，了解Rh抗原的表達(dá)與分布情況對(duì)于患者臨床輸血治療具有重要的參考價(jià)值[10]。本結(jié)果顯示，418例受血者中Rh（D、C、c、E、e）抗原陽(yáng)性比例分別為99.52%、90.67%、62.68%、49.76%和93.30%，710例供血者中Rh（D、C、c、E、e）抗原陽(yáng)性比例分別為99.30%、89.86%、55.63%、44.37%和93.52%，與江曉明[5]等的研究結(jié)果接近；受血者CcDEe表型比例高于供血者而供血者CCDee表型比例高于受血者，受血者輸注與自身Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容性血液的可能性大，受血者受到異體抗原免疫刺激從而增加產(chǎn)生不規(guī)則抗體的風(fēng)險(xiǎn)[11]。但是，本研究中受血者與供血者CcDEe和CCDee表型分布的差異可能與研究樣本量較少有關(guān)，后續(xù)我們將進(jìn)一步增加研究樣本以做分析比較。

目前，我國(guó)《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》[4]未要求常規(guī)檢測(cè)受、供者Rh（C、c、E、e）抗原，雖然受、供者交叉配血試驗(yàn)相合，但受、供者之間Rh（D、C、c、E、e）抗原可能存在不相容，這無(wú)疑增加了受血者不相容性輸血的概率。本結(jié)果顯示，供血者與相應(yīng)受血者之間Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容輸血的比例較高（244例/710例）；受血者中ccDEE、ccDEe和CcDEE表型者輸注供者血液時(shí)，發(fā)生抗原不相容性輸血的概率高。這主要是由于供血者C和e抗原陽(yáng)性頻率高達(dá)89.86%和93.52%，因此C或e抗原陰性患者輸注相應(yīng)抗原陽(yáng)性供者血液的概率較高，從而增加受到異體抗原免疫刺激的可能，這與邱芳等的研究結(jié)論相近[12]。此外，本研究結(jié)果顯示，輸注單個(gè)、兩個(gè)或多個(gè)供者血液的受血者發(fā)生Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容性輸血的概率存在差異；受血者輸注多個(gè)供者的血液時(shí)，其Rh（D、C、c、E、e）不相容性輸血的概率最高，表明受血者在輸注多個(gè)供者的血液時(shí)更容易受到異體抗原的免疫刺激，產(chǎn)生相應(yīng)的同種抗體[13，14]。

另外，本研究期間還遇到4例患者因不規(guī)則抗體陽(yáng)性致交叉配血困難，經(jīng)抗體型特異性鑒定結(jié)果為3例抗-E、1例抗-cE。其中2例患者明確有輸血史，這可能因既往輸注了Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容的供者血液，進(jìn)而刺激機(jī)體產(chǎn)生了不規(guī)則抗體。因此，Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容性輸血對(duì)患者具有潛在的風(fēng)險(xiǎn)，可能導(dǎo)致患者產(chǎn)生不規(guī)則抗體而無(wú)相容性血液可輸。上述4例患者通過(guò)檢測(cè)供血者Rh（D、C、c、E、e）抗原，選擇Rh表型一致且交叉配血相合的血液供患者輸注，均未發(fā)生輸血不良反應(yīng)，血紅蛋白濃度得到有效提升。

綜上所述，受、供者Rh（D、C、c、E、e）抗原檢測(cè)在交叉配血試驗(yàn)和臨床患者多次輸血治療中具有重要意義。實(shí)施Rh（D、C、c、E、e）相合性或相容性配血，一方面，可避免受血者輸注Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容的血液，降低異體抗原對(duì)機(jī)體免疫刺激產(chǎn)生不規(guī)則抗體的風(fēng)險(xiǎn)；另一方面，遇到因Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體致使交叉配血不合且需輸血的患者時(shí)，篩檢出Rh（D、C、c、E、e）表型相合或相容的供者血液，可有效縮短發(fā)血時(shí)間，提高患者血液輸注的安全性和有效性[15]。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突