GC-MS和LC-MS/MS分析麥粉中烷基間苯二酚同系物組成

黃沁沁，樊鳳嬌，李 彭，樊 艷，鄒燕羽，方 勇

（南京財(cái)經(jīng)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，江蘇 南京 210023）

烷基間苯二酚（alkylresorcinols，ARs）是一類存在于植物、藻類以及某些微生物體內(nèi)的酚類脂質(zhì)[1-2]。在人們?nèi)粘Ｉ攀持?，ARs主要存在于小麥、黑麥等麥類作物麩皮中，根據(jù)其飽和度和烷基側(cè)鏈的碳原子個(gè)數(shù)可以分為5-十五烷基間苯二酚（C15:0）、5-十七烷基間苯二酚（C17:0）、5-十九烷基間苯二酚（C19:0）、5-二十一烷基間苯二酚（C21:0）、5-二十三烷基間苯二酚（C23:0）和5-二十五烷基間苯二酚（C25:0）等同系物[3]。ARs因具有抗氧化[4]、抑菌[5]、抑制腫瘤[6]作用等多種生理功能，逐漸受到研究者的關(guān)注。近年來，隨著人們對飲食健康的重視度不斷提高，全谷物產(chǎn)品由于其豐富生理活性物質(zhì)，如膳食纖維、礦物質(zhì)、酚類物質(zhì)、維生素等帶來的健康效應(yīng)，逐漸受到消費(fèi)者的喜愛[7-8]。然而目前麥類作為全谷物加工食品主要來源，其產(chǎn)品缺少可識(shí)別的特征標(biāo)記和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有不法分子將小麥粉冒充全麥粉，嚴(yán)重影響到我國全麥粉市場秩序[9]。已有研究表明ARs特異性地存在于麥類麩皮中，而在小麥胚乳或者無麩皮的膳食中，無法檢測到ARs的存在，可作為判斷全麥粉食品的生物標(biāo)記物[10-11]。因此建立一種快速便捷、靈敏準(zhǔn)確的分析方法測定麥粉中ARs，對規(guī)范我國全麥粉市場具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

目前關(guān)于麥粉中ARs的分析方法主要有比色法、氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜（gas chromatographymass spectrometry，GC-MS）法、高效液相色譜法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）法等[11]。由于麥粉的基質(zhì)復(fù)雜性，需要先對目標(biāo)物ARs進(jìn)行富集，常見的富集方法包括液液萃取[12]和固相微萃取[13]等。Chen Yan等[14]對ARs同系物進(jìn)行衍生化處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)衍生處理可以有效降低ARs同系物的氣化溫度和沸點(diǎn)，使目標(biāo)物（C15:0～C25:0）在60～320 ℃升溫程序過程中均可被檢測出來。隨著質(zhì)譜的應(yīng)用，GC法后期發(fā)展成GC-MS法，靈敏度和檢測限顯著提高。Gambanelli等[15]對脫殼小麥中ARs進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)ARs飽和同系物以C17:0～C25:0為主，3 個(gè)不飽和同系物為C19:1、C19:2、C21:1。Liu Lei等[16]建立了麥麩中ARs定量分析的LC-MS法，結(jié)合使用選擇離子監(jiān)測（selected ion monitor，SIM）模式進(jìn)行測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該方法檢出限為5 ng/g，定量限為15 ng/g，滿足其檢測要求。近年來，質(zhì)譜技術(shù)逐漸由單級(jí)質(zhì)譜向串聯(lián)質(zhì)譜發(fā)展，質(zhì)譜串聯(lián)后選擇性增強(qiáng)，靈敏度和檢測限進(jìn)一步提高。Kn?dler等[17]使用LC-MS/MS對多種小麥中ARs進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)總量為430～1 077 mg/kg。目前相關(guān)文獻(xiàn)主要單獨(dú)應(yīng)用GC-MS或LC-MS/MS檢測技術(shù)對小麥和小麥制品中ARs進(jìn)行測定，鮮見涉及2 種不同方法的對比。因此，如果對2 種方法進(jìn)行比較，明確二者在ARs測定方法的差異，將為后期合理選擇麥粉中ARs的檢測技術(shù)提供理論依據(jù)。

本研究通過比較GC-MS和LC-MS/MS兩種測定ARs同系物的檢測方法，優(yōu)化樣品前處理、儀器條件等參數(shù)并對麥粉制品中ARs同系物組分進(jìn)行定量分析和方法評(píng)估，研究結(jié)果對建立有效、穩(wěn)定的ARs同系物組成的檢測分析技術(shù)、全麥粉產(chǎn)品真?zhèn)闻袆e和麥類全谷物產(chǎn)品品質(zhì)控制方面具有重要的意義。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

麥粉樣品：國內(nèi)不同品牌全麥粉共20 種、小麥粉共15 種，所有國內(nèi)麥粉均購自南京市各大超市及網(wǎng)購品種；國外不同品牌全麥粉20 種、小麥粉15 種，所有國外麥粉均購自美國和加拿大超市（包括來自美國、加拿大、法國、英國等共22 個(gè)麥粉品牌）。

5-十五烷基間苯二酚（C15:0）、5-十七烷基間苯二酚（C17:0）、5-十九烷基間苯二酚（C19:0）、5-二十一烷基間苯二酚（C21:0）和5-二十三烷基間苯二酚（C23:0）標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥95%）、N,O-雙(三甲基硅)三氟乙酰胺（含三甲基氯硅烷） 美國Sigma公司；甲醇、乙腈、正己烷、乙醇、乙酸乙酯（均色譜純） 德國Merck公司；其他試劑均為國產(chǎn)分析純；實(shí)驗(yàn)所用水均為超純水（電阻率≥18.2 MΩ·cm）。

5 種ARs標(biāo)準(zhǔn)品分別準(zhǔn)確稱取5 mg，用5 mL甲醇溶解并定容，分別配制成質(zhì)量濃度為1 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；準(zhǔn)確吸取各ARs標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1 mL至10 mL容量瓶中，使用乙酸乙酯定容，得到質(zhì)量濃度為100 μg/mL混合標(biāo)準(zhǔn)中間液。

1.2 儀器與設(shè)備

7890A-5975氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 美國Agilent公司；H-Class/Xevo TQ-S液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀美國Waters公司；CPA225D分析天平 蘇州賽恩斯儀器有限公司；JY 98-IIIN超聲波細(xì)胞粉碎儀 寧波新芝生物科技股份有限公司；Hei-VAP Precision旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀德國Heidolph公司；SC-3616低速離心機(jī) 安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司；8位干式氮吹儀 博納艾杰爾科技公司；FOTECTOR-02HT全自動(dòng)固相萃取儀 ?？萍瘓F(tuán)股份有限公司；CLEANERT S 500 mg/6 mL高純球型硅膠反相C18固相萃取柱 天津博納艾杰爾科技有限公司；0.22 μm有機(jī)濾膜 天津市科億隆實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。

1.3 方法

1.3.1 GC-MS分析條件

GC條件：DB-17HT毛細(xì)管耐高溫氣相色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；載氣為氦氣，流量為1 mL/min；升溫程序：初始溫度150 ℃，保持2 min，以10 ℃/min升溫到320 ℃，保持7 min，以5 ℃/min升溫至325 ℃，保持8 min；進(jìn)樣方式為分流進(jìn)樣，分流比為10∶1；溶劑延遲2 min；進(jìn)樣口溫度280 ℃。

MS條件：電子電離源；電子能量70 eV；離子源溫度300 ℃；四極桿溫度150 ℃；質(zhì)量掃描范圍m/z35～650。采用RTLPEST3.L和NIST08.L工作站收集數(shù)據(jù)，通過NIST08.L譜庫和化學(xué)結(jié)構(gòu)式進(jìn)行比較。

1.3.2 LC-MS/MS分析條件

LC條件：ACQMITY MPLC BEH C18色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量5 μL；流動(dòng)相：A相為含0.1%（體積分?jǐn)?shù)）的氨水，B相為乙腈；流速0.5 mL/min；洗脫梯度：0～2 min，100%～15% A，0%～85% B；2～4 min，15%～10% A，85%～90% B；4～8 min，10%～5% A，90%～95% B；8～9 min，5%～15% A，95%～85% B。

MS條件：電噴霧離子源，負(fù)離子源；多反應(yīng)監(jiān)測模式；毛細(xì)管電壓1.2 kV；錐孔氣流：氮?dú)猓魉?50 L/h；離子源溫度150 ℃；去溶劑氣溫度200 ℃，流速1 000 L/h。多反應(yīng)監(jiān)測離子對及質(zhì)譜相關(guān)參數(shù)見表1。

表1 ARs同系物的保留時(shí)間、監(jiān)測離子及LC-MS/MS質(zhì)譜采集參數(shù)Table 1 Retention time, monitoring ion and mass spectral acquisition parameters of alkylresorcinols homologues in LC-MS/MS

1.3.3 樣品前處理

1.3.3.1 提取

參考鄒燕羽等[18]的方法，并稍作修改。稱取麥粉樣品1.0 g（精確至0.001 g）于50 mL離心管中，加入40 mL乙酸乙酯，采用超聲細(xì)胞破碎儀進(jìn)行超聲提取實(shí)驗(yàn)，超聲功率600 W提取2 min，3 500 r/min離心5 min。重復(fù)上述操作2 次，合并上清液，將上清液于45 ℃進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入20 mL乙酸乙酯回溶。

1.3.3.2 衍生化處理

準(zhǔn)確吸取1.3.3.1節(jié)回溶溶液5 mL加入10 mL離心管，加入30 μL衍生劑，蓋緊瓶蓋，渦旋混勻后在60 ℃條件下水浴30 min后，將衍生液過0.22 μm有機(jī)濾膜后，轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣小瓶待GC-MS分析（標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)上述步驟進(jìn)行衍生化處理）。

1.3.3.3 固相萃取凈化處理

向C18固相萃取柱中加入4 mL甲醇和4 mL超純水使柱子活化，取1.3.3.1節(jié)濃縮液5 mL，裝載至萃取柱，用4 mL體積分?jǐn)?shù)10%甲醇溶液淋洗，再用5 mL甲醇洗脫，洗脫速率控制為2 mL/min，甲醇洗脫液接收至10 mL離心管中，洗脫液經(jīng)氮?dú)獯到?，用乙腈定容?.0 mL，過0.22 μm有機(jī)濾膜后，轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣小瓶待LC-MS/MS分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取方法的選擇

麥粉中ARs提取溶劑通常選用正丙醇、乙酸乙酯、甲醇和丙酮等多種有機(jī)溶劑[19-21]進(jìn)行提取，因此本研究首先對提取溶劑進(jìn)行優(yōu)化。甲醇、丙酮與水的互溶性較強(qiáng)，通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其回收率較低，這是因?yàn)槠錁O易將麥粉中的水溶性蛋白提取出來，產(chǎn)生較多雜質(zhì)，不利于后續(xù)凈化實(shí)驗(yàn)[22]。而正丙醇實(shí)驗(yàn)對ARs的回收率在80%以下。ARs作為雙親分子，其極性與乙酸乙酯相近，且其萃取液中共提物少，為最佳萃取溶劑，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明待測物回收率達(dá)80%以上，基線干擾小。目前糧食行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[23]對于全麥粉中ARs的提取方式主要采用振蕩48 h。超聲作為一種目前使用廣泛的提取工藝，可以通過空化效應(yīng)，增強(qiáng)功能活性物質(zhì)的提取效果[24]。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室前期超聲提取工藝優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)超聲提取條件的提取率高達(dá)87%，因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)選擇超聲輔助乙酸乙酯進(jìn)行提取。

2.2 GC-MS分析條件的優(yōu)化

2.2.1 衍生條件的選擇

本研究中目標(biāo)化合物ARs含有酚羥基，極性較高，沸點(diǎn)較高，在傳統(tǒng)GC法分離效果較差。如果采用硅烷衍生化，可將酚羥基化合物與硅烷化試劑反應(yīng)生成極性小、熱穩(wěn)定性好、易揮發(fā)的硅烷衍生物，從而進(jìn)行GC分析[14]。N,O-雙(三甲基硅)三氟乙酰胺（含三甲基氯硅烷）試劑作為常見的衍生劑，反應(yīng)條件溫和、反應(yīng)速率高，為了選擇較優(yōu)的衍生化條件，本研究比較了60 ℃條件下經(jīng)不同衍生時(shí)間（0～50 min）和衍生劑體積（0～40 μL）的衍生效果。如圖1A所示，隨著衍生反應(yīng)時(shí)間的延長，峰面積出現(xiàn)先上升后降低的趨勢，而隨著衍生劑體積的增加（圖1B），峰面積出現(xiàn)了上升而趨于穩(wěn)定的結(jié)果。這表明，衍生劑加入過量對衍生產(chǎn)物并沒有促進(jìn)作用，然而衍生時(shí)間產(chǎn)生的作用可能是由于加熱的不斷進(jìn)行，從而導(dǎo)致衍生劑發(fā)生變化。因此，為防止目標(biāo)化合物降解，保障其最佳的衍生化效率，本實(shí)驗(yàn)確定最佳衍生化時(shí)間為30 min，衍生劑體積為30 μL。

圖1 GC-MS法中衍生處理時(shí)間（A）和衍生劑體積（B）對峰面積的影響Fig.1 Effect of derivatization time (A) and derivatization agent volume (B) on peak area in GC-MS

2.2.2 儀器條件的選擇

將5 種目標(biāo)物的衍生物在m/z35～650范圍內(nèi)進(jìn)行全掃描，獲得總離子監(jiān)測模式中各種ARs的保留時(shí)間。根據(jù)各物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)版質(zhì)譜圖，選擇豐度高、質(zhì)荷比大、不與碎片離子相同的離子作為特征離子，各物質(zhì)的保留時(shí)間和定性、定量離子見表2。結(jié)果發(fā)現(xiàn)定性離子為m/z268為所有離子中相對豐度最高的離子。這是因?yàn)楹蟹恿u基的苯環(huán)在經(jīng)過衍生化處理之后，三甲基硅醚基團(tuán)取代苯環(huán)上羥基在通過質(zhì)譜電離的作用下，酚羥基形成了特定的m/z268離子，這與之前文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致[11]，為更好分析目標(biāo)物，后續(xù)實(shí)驗(yàn)測定均采用SIM（m/z268），這也是目前ARs的GC-MS/SIM法測定的主要依據(jù)[25-27]。

表2 GC-MS質(zhì)譜采集參數(shù)Table 2GC-MS acquisition parameters of alkylresorcinols

在優(yōu)化的分離條件下，目標(biāo)化合物衍生物在GC-MS/SIM經(jīng)過檢測后，得到圖2。從圖2可以看出，C15:0～C23:0可以較好分布于12～18 min，目標(biāo)物的峰形較好，分離效果好，適用于目標(biāo)化合物的檢測。

圖25 種ARs同系物標(biāo)準(zhǔn)品GC-MS/SIMFig.2 Selective ion monitoring chromatogram of five homologues of alkylresorcinols in GC-MS

2.3 LC-MS/MS法分析條件的優(yōu)化

2.3.1 色譜條件的優(yōu)化

2.3.1.1 色譜柱的選擇

ARs同系物作為雙親性化合物，含有許多極性基團(tuán)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室前期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果[18]，ARs在色譜柱C18柱中具有較好的保留效果，因此實(shí)驗(yàn)選擇C18柱。

2.3.1.2 流動(dòng)相的選擇

乙腈作為最常見的流動(dòng)相，據(jù)前期研究基礎(chǔ)[18]，可以對ARs同系物進(jìn)行有效分離。在LC-MS/MS中，還需考慮流動(dòng)相對質(zhì)譜離子化效率的影響，本研究選擇了氨水作為流動(dòng)相，以提高負(fù)離子化。當(dāng)氨水濃度過高時(shí)候，易與空氣中CO2結(jié)合，形成碳酸銨沉淀，因此考察氨水體積分?jǐn)?shù)對ARs同系物保留和相應(yīng)情況，當(dāng)選擇氨水體積分?jǐn)?shù)為0.05%時(shí)，ARs類可以有效分離，但峰形較低矮圓潤，峰形對稱不完全，拖尾比較嚴(yán)重；當(dāng)氨水體積分?jǐn)?shù)為0.2%時(shí)，色譜峰有效分離，但峰形對稱尖銳，仍有拖尾現(xiàn)象，最終發(fā)現(xiàn)體積分?jǐn)?shù)0.1%氨水響應(yīng)值、峰形和分離效果比較完美，滿足實(shí)驗(yàn)需求。

2.3.2 質(zhì)譜條件的優(yōu)化

ARs作為雙親性分子，含有酚羥基結(jié)構(gòu)，可以失去質(zhì)子，因此選擇電噴霧離子源負(fù)離子掃描模式，配制質(zhì)量濃度為100 ng/mL的ARs同系物混標(biāo)，對待測物進(jìn)行全掃描（m/z35～650），選擇質(zhì)荷比響應(yīng)最強(qiáng)的碎片離子作母離子，對錐孔電壓進(jìn)行優(yōu)化，母離子的豐度達(dá)到最優(yōu)。通過子離子掃描，篩選2 個(gè)特征碎片離子，優(yōu)化碰撞電壓，并選取豐度較高的子離子作為定量離子（圖3）。

圖3 LC-MS/MS法中ARs同系物的多反應(yīng)監(jiān)測色譜圖Fig.3 MRM chromatograms of alkylresorcinol homologues in LC-MS/MS

2.3.3 固相萃取工藝優(yōu)化

首先考察洗脫溶劑對ARs同系物回收率的影響。如圖4A所示，ARs同系物的甲醇洗脫效率均在84%以上，要高于其他洗脫試劑，后續(xù)進(jìn)一步考察洗脫流速和淋洗比例等對ARs同系物洗脫效果的影響。如圖4B、C所示，隨著流速、體積的增加，ARs同系物的洗脫效率均出現(xiàn)先提高后降低的趨勢，因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)選擇流速2 mL/min和洗脫體積為5 mL。此外，圖4D還發(fā)現(xiàn)甲醇的淋洗比例從0%升至5%，僅有C21:0的洗脫效率出現(xiàn)增加，其他同系物的洗脫效率均出現(xiàn)降低，這可能是低濃度的甲醇難以洗脫ARs，隨著淋洗比例從5%升至10%，ARs洗脫效率均出現(xiàn)迅速增加，當(dāng)淋洗比例從10%升至20%，ARs同系物的回收率出現(xiàn)降低趨于平穩(wěn)的趨勢，因此在2 mL/min的流速下，選擇淋洗比例為10%的甲醇溶液洗脫體積5 mL。

圖4 LC-MS/MS法中洗脫溶劑（A）、洗脫流速（B）、洗脫體積（C）和淋洗比例（D）對ARs的回收率影響Fig.4 Effects of elution solvents (A), flow rate (B), elution volume (C) and washing solvent composition (D) on the recoverites of alkylresorcinols in LC-MS/MS

2.4 GC-MS與LC-MS/MS的方法比較

2.4.1 線性關(guān)系與檢出限

根據(jù)優(yōu)化的GC-MS及LC-MS/MS方法，對系列質(zhì)量濃度ARs各同系物的混標(biāo)溶液進(jìn)行分析。以質(zhì)量濃度作為橫坐標(biāo)，根據(jù)相應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果如表3所示。GC-MS和LC-MS/MS的測定范圍均在0.001～5 μg/mL之間，除了LC-MS/MS的C19:0相關(guān)系數(shù)為0.988 0，其他待測物的相關(guān)系數(shù)均大于0.99，這表明具有良好的線性關(guān)系，檢出限均低于10 μg/g。

表3 GC-MS、LC-MS/MS法測定5 種ARs同系物線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限及定量限Table 3 Linear equations, correlation coefficients, detection limits and quantification limits of GC-MS and LC-MS/MS for five alkylresorcinol homologues

相比較固相萃取-LC-MS/MS，GC-MS的檢出限更低，可能是由于特定離子衍生化掃描的結(jié)果，而固相萃取-LC-MS/MS由于分離和純化的效果較好，使保留時(shí)間更短，完成樣品測量時(shí)間更少。

2.4.2 準(zhǔn)確度及精密度結(jié)果

如圖5所示，樣品中ARs同系物在GC-MS和LC-MS/MS譜圖中峰形較好，分離效果好，2 種方法均可用于樣品檢測。在GC-MS的選擇離子掃描色譜圖中，C19:0和C21:0出峰位置后發(fā)現(xiàn)了相應(yīng)的不飽和同系物（如C19:1和C21:1等），但含量相對偏少，因此本研究不討論不飽和同系物含量變化。后續(xù)按照樣品實(shí)際質(zhì)量濃度設(shè)計(jì)加標(biāo)質(zhì)量濃度，每個(gè)質(zhì)量濃度做6 次平行，使用GC-MS和LC-MS/MS對其測定，計(jì)算出平均加標(biāo)回收率，然后對相對標(biāo)準(zhǔn)偏差進(jìn)行計(jì)算。

圖5 麥粉樣品在GC-MS測定中的選擇離子掃描色譜圖（A）和LC-MS/MS測定中液相色譜圖（B）Fig.5 GC-MS chromatogram (A) and LC-MS/MS liquid chromatogram (B) of wheat flour sample

選取小麥粉和全麥粉進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)。如表4所示，各方法的加標(biāo)回收率均在89.05%～99.15%之間；相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均在5%以下，說明2 種方法的準(zhǔn)確性和精密度良好，但是采用GC-MS中未在樣品中檢測出C15:0同系物，這可能是由于樣品實(shí)際基質(zhì)的復(fù)雜性，超聲難以將其提出，從而使衍生化處理后難以檢測。而在LC-MS/MS測定之前經(jīng)過固相萃取優(yōu)化后，極大程度減少了基質(zhì)對C15:0的影響，從而更易被檢出。

表4 GC-MS、LC-MS/MS法測定ARs同系物的加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）Table 4 Spiked recoveries and RSDs of alkylresorcinol homologues by GC-MS and LC-MS/MS (n= 6)

2.4.3 實(shí)際樣品的測定

后續(xù)采用GC-MS和LC-MS/MS兩種方法對國內(nèi)外70 種麥粉樣品中ARs同系物含量進(jìn)行分析。如表5所示。通過GC-MS測定的國內(nèi)外全麥粉含量最高達(dá)1 043.9 μg/g和1 375.2 μg/g，要低于LC-MS/MS測定的ARs最高含量為1 157.4 μg/g和1 535.2 μg/g，這可能與樣品中C15:0在GC-MS未檢出有關(guān)。國內(nèi)全麥粉ARs總量波動(dòng)較大，最低值要顯著低于國外全麥粉含量，這可能與國內(nèi)全麥粉標(biāo)準(zhǔn)缺少有關(guān)。Ross等[2]報(bào)道稱國外的全麥粉配方中會(huì)明確提及ARs含量及配比，而國內(nèi)缺少相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)，整體國內(nèi)全麥粉中ARs含量低于國外全麥粉，因此有必要對國內(nèi)全麥粉市場進(jìn)行規(guī)范。在LC-MS/MS檢測的小麥粉樣品均未檢測出C15:0，這可能與麥粉產(chǎn)品精加工有關(guān)系。在所有產(chǎn)品中，發(fā)現(xiàn)50%左右ARs含量均為C21:0，這與文獻(xiàn)報(bào)道一致[28-29]，這表明C21:0是ARs主要的同系物。

表5 不同分析方法對實(shí)際小麥樣品中ARs同系物的測定結(jié)果Table 5 Results for determination of alkylresorcinol homologues in actual wheat samples by different analytical methods

3 結(jié) 論

建立GC-MS與LC-MS/MS兩種分析國內(nèi)外麥粉中ARs同系物的方法，對比了2 種方法的差異性。結(jié)果表明，2 種檢測方法線性關(guān)系較好、檢測限較低、靈敏度較高、測定結(jié)果準(zhǔn)確，均可作為麥粉中ARs同系物的定性和定量分析方法。對于GC-MS來說，雖然可以采用選擇離子掃描方式降低方法檢出限，但衍生處理時(shí)間較長，浪費(fèi)試劑；對于LC-MS/MS來說，準(zhǔn)確度高，分析時(shí)間較短，本法可以作為麥粉中ARs含量測定的優(yōu)選方法。