苗文萍

摘 要：隨著生物科技水平的提升和畜牧業(yè)轉(zhuǎn)型升級(jí)，國(guó)內(nèi)動(dòng)物疫病防控技術(shù)不斷創(chuàng)新與優(yōu)化，但同時(shí)疫病種類也顯著增多，疫情態(tài)勢(shì)日趨復(fù)雜。應(yīng)用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)，有助于動(dòng)物疫病防控工作合理、規(guī)范和高效開展，推動(dòng)完善科學(xué)防控體系，為我國(guó)畜牧業(yè)高質(zhì)量發(fā)展提供保障。該文簡(jiǎn)述了實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)的分類及主要檢測(cè)技術(shù)，并介紹了實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)在診斷動(dòng)物疫病、評(píng)估動(dòng)物疫病免疫效果、監(jiān)測(cè)動(dòng)物疫病等方面的應(yīng)用，以期為推進(jìn)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)更廣泛地應(yīng)用于動(dòng)物疫病防控工作提供參考。

關(guān)鍵詞：實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù);疫病防控;應(yīng)用

中圖分類號(hào) S852.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 1007-7731（2021）19-0093-02

隨著我國(guó)畜牧業(yè)規(guī)?；⒓s化發(fā)展，動(dòng)物新發(fā)病、外來(lái)病增多，防控形勢(shì)日趨復(fù)雜，傳統(tǒng)的疫病診斷、流調(diào)手段已難以滿足現(xiàn)階段防控需要。同時(shí)，生物科技飛速發(fā)展，技術(shù)水平不斷迭代，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)的重要性愈加凸顯，必將更廣泛應(yīng)用于疫病防控工作。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)是動(dòng)物疫病防控的基礎(chǔ)性工作。檢測(cè)技術(shù)具有標(biāo)準(zhǔn)高、質(zhì)量高要求，需要高水平檢測(cè)人員和高精度檢測(cè)設(shè)備，也需要符合相關(guān)動(dòng)物疫病防控檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)體系和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量體系，以保障檢測(cè)過(guò)程的標(biāo)準(zhǔn)性[1]，因此檢測(cè)結(jié)果具有很高的參考價(jià)值及實(shí)用價(jià)值。在動(dòng)物疫病防控實(shí)踐中合理運(yùn)用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)，能更快確診病例，更全面把握動(dòng)物健康狀態(tài)，更準(zhǔn)確評(píng)估防疫效果，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物疫病的可防可控。

動(dòng)物疫病防控工作的主要作用在于保障動(dòng)物及其產(chǎn)品的質(zhì)量與安全。動(dòng)物疫病檢測(cè)機(jī)構(gòu)運(yùn)用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)，對(duì)照相關(guān)法律法規(guī)、檢驗(yàn)流程和標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)動(dòng)物及其產(chǎn)品開展檢驗(yàn)檢測(cè)，其結(jié)果可為養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）提供參考，為行業(yè)提供預(yù)警信息，為相關(guān)疫情防控管理、方案、規(guī)劃提供依據(jù)，同時(shí)還可為目前動(dòng)物疫病防控工作中動(dòng)物輸出、保健咨詢以及產(chǎn)品無(wú)害保證等工作提供重要幫助[2]。

1 動(dòng)物疫病防控中實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)分類與主要檢測(cè)技術(shù)

1.1 分類 根據(jù)目的不同，動(dòng)物疫病防控中實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)主要?jiǎng)澐譃槊庖呖贵w水平檢測(cè)技術(shù)和病原檢測(cè)技術(shù)。免疫抗體水平檢測(cè)技術(shù)通過(guò)檢查動(dòng)物在接種1種或1種以上疫苗后產(chǎn)生的抗體水平，評(píng)估疫苗的免疫效果，分析動(dòng)物免疫成功或者免疫失敗的原因，確定下一步應(yīng)采取的防疫措施。病原檢測(cè)技術(shù)主要對(duì)疑似患病動(dòng)物所感染的病原如細(xì)菌、病毒等進(jìn)行核酸檢測(cè)[3]，對(duì)寄生蟲感染及野毒感染進(jìn)行抗體檢測(cè)，還包括傳統(tǒng)方法中對(duì)細(xì)菌和寄生蟲的分離與鑒定，及細(xì)菌、病毒的免疫反應(yīng)與凝集試驗(yàn)等。根據(jù)病原檢測(cè)結(jié)果來(lái)決定對(duì)患病個(gè)體的隔離、治療或者無(wú)害化處理，同時(shí)對(duì)相關(guān)動(dòng)物群體進(jìn)行免疫、藥物預(yù)防，對(duì)某些種類的病情上報(bào)相關(guān)部門按規(guī)定處理，同時(shí)可以對(duì)一些疫病能否流行進(jìn)行預(yù)測(cè)或預(yù)警。此外，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)中的動(dòng)物血液生化指標(biāo)、免疫因子等檢測(cè)，可以更好地判斷動(dòng)物的健康狀況，為疫病預(yù)防提供早期預(yù)警。

1.2 主要檢測(cè)技術(shù)

1.2.1 病理學(xué)檢測(cè)技術(shù) 利用病理和免疫病理學(xué)技術(shù)對(duì)染病組織進(jìn)行切片觀察，開展對(duì)動(dòng)物疫病病原的特異性診斷工作，具體包括病理學(xué)診斷技術(shù)和免疫病理學(xué)技術(shù)。病理學(xué)診斷技術(shù)利用疫病引起的動(dòng)物組織發(fā)生特征性的病變和基本病理變化，對(duì)動(dòng)物疫病進(jìn)行診斷。免疫病理學(xué)技術(shù)注重研究抗體對(duì)動(dòng)物體內(nèi)細(xì)胞的影響，具體通過(guò)標(biāo)記的抗體（或抗原）對(duì)細(xì)胞和組織內(nèi)的相應(yīng)抗原（或抗體）進(jìn)行定性、定位或定量檢測(cè)，用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡觀察動(dòng)物組織，并重點(diǎn)觀察抗體對(duì)細(xì)胞的影響[4]。

1.2.2 血清學(xué)檢測(cè)技術(shù) 這是一種基于抗原與相應(yīng)抗體在體外發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的檢測(cè)技術(shù)。近年來(lái)，血清學(xué)抗體的檢測(cè)技術(shù)水平不斷提升，新技術(shù)不斷涌現(xiàn)，檢測(cè)范圍不斷擴(kuò)大，如病毒中和試驗(yàn)、血凝及血凝抑制試驗(yàn)、瓊脂凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)、血清平板和試管凝集試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和免疫膠體金層析技術(shù)等。這些試驗(yàn)方法已被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室熟練掌握應(yīng)用，操作簡(jiǎn)便快速，使抗體監(jiān)測(cè)技術(shù)真正得以推廣，切實(shí)為動(dòng)物疫病防控提供了有力支撐[5]。

1.2.3 分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù) 利用分子生物學(xué)手段對(duì)病毒基因進(jìn)行檢測(cè)，常用于特異性快速診斷，如常用的聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查，可為動(dòng)物疫病防控提供依據(jù)。

1.2.4 病原學(xué)檢測(cè)技術(shù) 利用微生物學(xué)、細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)，開展病毒、細(xì)菌、寄生蟲等致病微生物的分離、培養(yǎng)和鑒定等工作。細(xì)菌診斷包括細(xì)菌分離與接種、培養(yǎng)、鑒定等，病毒診斷包括病毒的分離、鑒定。寄生蟲病檢測(cè)除一般的流行病學(xué)調(diào)查和臨診檢查外，定性的實(shí)質(zhì)性方法有蟲卵檢查法、蟲體檢查法、免疫學(xué)檢測(cè)方法、分子生物學(xué)檢測(cè)等方法[2，5]。

2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)在動(dòng)物疫病防控中的應(yīng)用

2.1 診斷動(dòng)物疫病 病原核酸檢測(cè)和野毒抗體檢測(cè)是目前動(dòng)物疫病診斷中最快捷、準(zhǔn)確的一種方法，但不宜將其作為疫病診斷的唯一依據(jù)，應(yīng)結(jié)合疫苗免疫、流行病學(xué)和病理解剖學(xué)癥狀等進(jìn)行綜合判斷。

2.2 評(píng)估動(dòng)物疫病免疫效果 動(dòng)物接種疫苗后產(chǎn)生的抗體水平與相關(guān)疫病的防控效果具有相關(guān)性。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)能對(duì)動(dòng)物免疫抗體水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)，進(jìn)而評(píng)價(jià)動(dòng)物群體的免疫效果，并以此為依據(jù)評(píng)判疫苗質(zhì)量、接種劑量、疫苗保存與運(yùn)輸方式、免疫途徑和免疫程序的合理性[6]。通過(guò)對(duì)動(dòng)物免疫效果的綜合分析，理想的免疫效果可給養(yǎng)殖者提供合理的免疫程序、優(yōu)秀的疫苗質(zhì)量、可靠的疫苗保存與運(yùn)輸方式、正確的免疫途徑等信息;低劣的免疫效果會(huì)提醒養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)疫苗接種涉及的多個(gè)環(huán)節(jié)加以分析，找到免疫失敗的原因，重建合理的免疫模式，并同時(shí)警示養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)免疫失敗的群體及時(shí)采取防范措施，消除隱患，以防疫病的發(fā)生。在正確免疫接種前提下，免疫程序是否合理直接決定免疫效果的好壞?？赡苓@個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)使用這種免疫程序比較好，但在別的養(yǎng)殖場(chǎng)可能就不適合，因此養(yǎng)殖場(chǎng)必須根據(jù)疫病流行情況、抗體水平、疫病種類、生產(chǎn)需要等因素制定適合本場(chǎng)的免疫程序。在使用疫苗尤其是活疫苗時(shí)，要充分考慮母源抗體影響，通過(guò)血清學(xué)檢測(cè)來(lái)確定該場(chǎng)母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律，確定首免最佳時(shí)機(jī)。在母源抗體下降到臨界值時(shí)進(jìn)行免疫接種，效果最佳;母源抗體水平過(guò)高時(shí)接種，抗原會(huì)被中和，導(dǎo)致免疫失敗;母源抗體過(guò)低甚至已經(jīng)消失都未及時(shí)進(jìn)行免疫，則會(huì)形成免疫空白期，存在感染風(fēng)險(xiǎn)。因此，定期進(jìn)行動(dòng)物群體抗體監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)，據(jù)此制訂適合本場(chǎng)的免疫程序，至關(guān)重要。