胎牛
- 基于細胞體外培養(yǎng)篩選最適胎牛血清
紀50年代以來,胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)作為最常用、最有效的添加物,在世界范圍內(nèi)被廣泛應用于體外細胞培養(yǎng)[5]．胎牛血清富含血漿蛋白、多肽、激素、生長因子等活性成分,能改變培養(yǎng)基的黏度、滲透壓、緩沖能力等理化性質[6],可促進細胞的生長與增殖[7]．細胞生長的好壞與胎牛血清密切相關,在細胞體外培養(yǎng)過程中,若血清選擇不當,不僅會導致實驗結果不可用,還造成人力、物力等資源的浪費．胎牛血清是一種成分復雜的混合物,雖然其組份大部分已
西南大學學報（自然科學版） 2023年11期2023-11-16
- miR-223-3p在老年結腸癌組織和癌旁組織中的表達水平及其生物學功能作用機制
0細胞置于10%胎牛血清RPMI1640培養(yǎng)基(廣州沛瑜生物制品有限公司，貨號AAPR123)中，37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)；顯微鏡觀察細胞生長情況，當細胞匯合度達到80%及以上時加入0.25%胰酶消化細胞制成單細胞懸液；吸取單細胞懸液移至離心管中，置于離心儀上800 r/min離心5 min；棄去上清液，加入10%胎牛血清RPMI1640培養(yǎng)基重懸細胞移至培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)；待細胞生長狀態(tài)良好時用于后續(xù)試驗。1.4實時熒光定量聚合酶鏈反應(RT-PCR) 按
中國老年學雜志 2023年3期2023-02-11
- 首次產(chǎn)犢月齡對中國荷斯坦牛生產(chǎn)性能的影響
影響，尤其對1 胎牛影響最大。1 胎牛AFC 從20 月齡增至23月齡時，泌乳曲線變化明顯且逐漸優(yōu)化，23 月齡以后，泌乳曲線變化不明顯。經(jīng)產(chǎn)牛AFC 為23 月齡時，泌乳曲線最優(yōu)。圖2 各胎次AFC 為20～27 月齡時泌乳曲線2.3.2 高峰奶產(chǎn)量 對AFC 為20～27 月齡牛各胎次高峰奶產(chǎn)量作圖，如圖3 所示。1 胎牛高峰奶產(chǎn)量低于經(jīng)產(chǎn)牛，1 胎時高峰奶產(chǎn)量隨AFC 的增加而增加，AFC 為23 月齡牛與AFC 為24～27 月齡牛高峰奶產(chǎn)量差異較
中國畜牧雜志 2022年4期2022-04-15
- 人造肉新銳生產(chǎn)不含胎牛血清的細胞培養(yǎng)基，細胞生長速度更快，生產(chǎn)成本更低
物細胞培養(yǎng)基是用胎牛血清（FBS）配置的，胎牛血清中含有生長因子等蛋白質，且抗體含量少，但胎牛血清的組成復雜多變，研究人員一般將其視作成分不明的混合物，可能增加實驗結果的不確定性?；诖嗽颍n國人造肉公司CellMEAT推出了不含胎牛血清 (FBS) 的細胞培養(yǎng)基CSF-A1，該產(chǎn)品有助于降低生產(chǎn)成本并消除養(yǎng)殖肉類行業(yè)的問題（胎牛血清是一種取自牛胚胎的血清，因此胎牛血清的制取存在一定的爭議）。CellMEAT首席執(zhí)行官Giljun Park表示，“CSF
海外星云 2022年1期2022-02-21
- 人造肉新銳生產(chǎn)不合胎牛血清的細胞培養(yǎng)基，細胞生長速度 更快，生產(chǎn)成本更低
物細胞培養(yǎng)基是用胎牛血清（FBS）配置的，胎牛血清中含有生長因子等蛋白質，且抗體含量少，但胎牛血清的組成復雜多變，研究人員一般將其視作成分不明的混合物，可能增加實驗結果的不確定性。基于此原因，韓國人造肉公司CellMEAT推出了不含胎牛血清（FBS）的細胞培養(yǎng)基CSF-A1，該產(chǎn)品有助于降低生產(chǎn)成本并消除養(yǎng)殖肉類行業(yè)的問題（胎牛血清是一種取自牛胚胎的血清，因此胎牛血清的制取存在一定的爭議）。CellMEAT首席執(zhí)行官Giljun Park表示，“CSF-A
海外星云 2022年1期2022-02-14
- C57BL/6小鼠骨髓間充質干細胞的體外分離培養(yǎng)、分化及兩種不同品牌血清對其增殖的影響
下含兩種不同品牌胎牛血清(Yeasen血清，Gbico血清)的培養(yǎng)基對BMSCs細胞數(shù)量、形態(tài)以及生長周期的影響，從而為BMSCs體外分離培養(yǎng)的血清選擇提供更加優(yōu)化的方案，以服務于臨床和科研。1 材料與方法1.1 實驗動物4～6周SPF級C57BL/6雄性小鼠，體重15～20 g，由武漢大學實驗動物中心提供，實驗過程中對動物的處置符合動物倫理學標準。1.2 主要試劑0.25%胰蛋白酶，磷酸鹽緩沖液(PBS)、胎牛血清(Fetal Bovine Serum，
中國計劃生育和婦產(chǎn)科 2022年12期2022-02-08
- 牛剖腹產(chǎn)手術的操控要點
分胎犢強行拉出，胎牛也難以存活，不僅如此更是嚴重傷害到了母體的產(chǎn)道，更為嚴重的是導致產(chǎn)道重度撕裂，造成母牛截癱或大出血而死亡，給肉牛養(yǎng)殖經(jīng)營者帶來較大經(jīng)濟損失。針對我縣肉牛養(yǎng)殖業(yè)中的此種難題，為了提高本地肉牛的品質，并避免因為母牛難產(chǎn)而導致的財產(chǎn)損失，提高母牛剖腹產(chǎn)手術的成功率，下面把剖腹產(chǎn)的操控要點介紹給大家以供借鑒學習。1.剖腹產(chǎn)前的準備工作1.1 確定手術操作的方案在母牛剖腹產(chǎn)手術之前，獸醫(yī)首先要結合難產(chǎn)母牛的具體情況確定手術操作的方案。獸醫(yī)在進行手
農(nóng)村科學實驗 2021年2期2021-12-24
- 不同血清對驢卵泡顆粒細胞體外培養(yǎng)的影響
重要成分。目前，胎牛血清(FBS)已普遍用于各種動物體外組織的培養(yǎng)，但考慮到其生物安全性、動物福利及效率，國內(nèi)外許多學者對培養(yǎng)材料的自體血清培養(yǎng)效果進行了探究，證實了自體血清的優(yōu)越性[4-5]。但驢自體血清對驢卵泡顆粒細胞培養(yǎng)的效果未見報道。MTT法是一種利用酶標儀快捷檢測細胞增值的方法，所測得的光吸收值與活細胞數(shù)成正比。劃痕實驗在一定程度上模擬了體內(nèi)細胞遷移侵襲的過程，可以直觀的判定細胞的遷移能力。Annexin V-FITC/PI具有特殊的理化特性，可
石河子大學學報（自然科學版） 2021年4期2021-12-06
- 1例奶牛子宮捻轉的治療與護理
子宮頸，可觸摸到胎牛的一側前肢。直腸檢查時，手臂進入恥骨前緣時能夠感覺到一粗的交叉的束狀物分別向腹腔傾斜。經(jīng)過詳細檢查后，確診為子宮向右側捻轉。2 病 因只要能使母牛圍繞軀體發(fā)生急劇轉動的動作，都可能成為子宮捻轉的直接誘因。2.1 子宮的生理解剖結構懷孕末期孕角迅速增大，子宮大彎顯著地向前擴展，但子宮小彎擴張不明顯；而子宮闊韌帶只附著在子宮頸、子宮體和子宮角基部的子宮小彎部位，子宮闊韌帶主要固定住孕角的后部，孕角的前部沒有固定（處于游離狀態(tài)）[2]。2.2
養(yǎng)殖與飼料 2021年12期2021-12-03
- 細胞貼壁效應是評價胎牛血清質量的重要因素
活性成分[4]。胎牛血清(FBS)從母體內(nèi)胎兒中獲取，含有多種生長因子和細胞因子，可模擬細胞增殖和維持[5]，含有大量的蛋白成分，最主要的蛋白成分有白蛋白、A1抗胰蛋白酶、轉鐵蛋白、Ig類抗體，還有含量不等的如A2巨球蛋白、A1和B1脂蛋白、膽固醇、纖維結合蛋白、膽紅素和類胡蘿卜素等成分[6]，是許多重組蛋白及藥物生產(chǎn)和研發(fā)用細胞培養(yǎng)基中的關鍵成分，對細胞生長的需要仍難以大規(guī)模的用其它物質所代替。另外，胎牛血清中胎球蛋白A(fetuin-A)等成分的差異在
農(nóng)業(yè)與技術 2021年22期2021-11-30
- 胎牛子宮類器官及內(nèi)膜上皮細胞的分離培養(yǎng)
～6月齡南陽黃牛胎牛，購于河南省鄭州市肉牛屠宰場。1.1.2 主要試劑DMEM/F 12培養(yǎng)基(Hyclone)；血清(杭州四季青)；胰蛋白酶(Aladdin)；非必需氨基酸(Gibco公司)；兩性霉素B、慶大霉素(Coolaber)；PBS粉末、轉鐵蛋白、青鏈霉素混合液、丙酮酸鈉(Solarbio)；Wnt 3a[Mouse](Abcam)；表皮生長因子(EGF)[Human](Bio-Techne)；R-spondin-1[Human]、Noggin[
畜牧與獸醫(yī) 2021年11期2021-11-11
- GATA5抑制Ep CAM表達對腎癌HEK-293細胞系的影響
培養(yǎng)在含有10%胎牛血清和5%青霉素/鏈霉素DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)。細胞在37℃并含5%二氧化碳的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)［11］。1.2 實驗方法1.2.1 表達載體的構建 通過NCBI：NM_080473.4獲取GATA5的cDNA（從63號堿基到1256堿基）。我們在N端添加了KozaK序列GCCACC。限制性位點HindIII（5'-A^AGCTT-3'）和NotI（5'-GC^GGCCGC3'）。通過PCR儀擴增合成cDNA-GATA5。用HindIII和No
山東第一醫(yī)科大學(山東省醫(yī)學科學院)學報 2021年8期2021-10-12
- 聰明的高考學習時間表
5500BT)、胎牛血清(Gibco，貨號10099-141)、0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液(Gibco，貨號25200-056)、CCK-8溶液(碧云天，C0038)、葡萄糖測試盒(南京建成，F(xiàn)006)。E.It can be hard to pick and choose what is most important to review.F.Meanwhile,mark the days that already have something e
瘋狂英語·新策略 2021年7期2021-08-26
- 大蒜素對不同濃度LPS作用下人牙周膜成纖維細胞炎癥因子表達的影響
DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清、胰蛋白酶均購自Gibco公司，抗波形絲蛋白單克隆抗體、角蛋白單克隆抗體、Human total MMP-1 ELISA試劑盒、TNF-α ELISA試劑盒、IL-1β ELISA試劑盒均購自武漢博士德生物工程有限公司。1.2 組織來源 收集于本院口腔科就診患者因正畸而拔除的無齲壞牙、無牙周疾病的前磨牙和阻生牙，刮取根中1/3牙周膜用于細胞培養(yǎng)。供牙者年齡12～20歲，無結締組織疾病，未全身應用皮質類固醇等藥物，均知情同意。1.3
浙江臨床醫(yī)學 2021年6期2021-07-21
- 三葉青總黃酮影響心肌細胞的活性及DJ-1表達
養(yǎng)基（碧云天）；胎牛血清（四季青）。1.3 主要儀器SW-CJ-1F超凈工作臺（安泰技術有限公司）；熒光定量PCR儀（Applied Biosystems）；IX71倒置熒光顯微鏡（奧林巴斯）。2 方法2.1 細胞的培養(yǎng)細胞用含10%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)液中于37℃，5%CO2下培養(yǎng)，當細胞融合度達85%左右時傳代，每3天傳代1次，取對數(shù)生長期細胞接種，以便進行后續(xù)實驗。2.2 三葉青總黃酮對H9C2細胞的活性實驗將高糖的DMEM（含10%胎牛血清）
科技視界 2021年13期2021-06-20
- 胎牛肺間充質干細胞對脂多糖介導小鼠急性肺損傷治療的研究
療方法。本研究對胎牛肺間充質干細胞（lung-derived mesenchymal stem cells，LMSCs）進行分離培養(yǎng)及鑒定，并通過腹腔注射LPS造小鼠急性肺損傷模型，然后將LMSCs移植到急性肺損傷的小鼠體內(nèi)，觀察LMSCs對急性肺損傷治療作用，為異源干細胞進行臨床治療提供實驗理論依據(jù)。1 材料與方法1.1 材料來源 本實驗對象3個月齡胎牛購自中國農(nóng)科院家畜實驗基地，6周齡雄性小鼠購自北京華阜康生物有限公司。LPS購自北京索萊寶科技有限公司
醫(yī)學信息 2021年10期2021-06-02
- 亞臨床酮病對荷斯坦奶牛產(chǎn)后疾病、繁殖性能及產(chǎn)奶量的影響
1.63%。1 胎牛共計396 頭，其中亞臨床酮病134 頭，發(fā)病率33.84%。2 胎牛共計182 頭，其中亞臨床酮病104 頭，發(fā)病率54.17%。3 胎牛共計229 頭，其中亞臨床酮病98 頭，發(fā)病率42.79%。圖1 亞臨床酮病組與正常組β 羥丁酸含量對比2.3 亞臨床酮病與其他疾病的相關性分析 對奶牛產(chǎn)后疾病與亞臨床酮病之間關系進行相關性分析（表2），結果顯示，亞臨床酮病與真胃變位相關性極顯著（P=0.01），與胎衣不下、死淘、產(chǎn)后癱瘓、乳房炎及
中國畜牧雜志 2021年4期2021-04-21
- 富血小板血漿對人慢性難愈創(chuàng)面肉芽組織成纖維細胞體外增殖和遷移的影響▲
MEM)培養(yǎng)基、胎牛血清購自Gibco公司(試劑盒批號分別為：A4192101、12664025)。1.1.3 PRP及水凝膠的制備：采用PRP制備用套裝制備PRP，采集全血，室溫下4 000 r/min離心20 min后棄去最下層紅細胞，再進行第2次離心(室溫下4 000 r/min離心30 min)，中間棕黃色層即為PRP，見圖1。水凝膠參考文獻[4]制備。圖1 PRP的制備過程1.2 實驗方法和觀察指標1.2.1 成纖維細胞的分離和鑒定：收集患者慢性
廣西醫(yī)學 2021年2期2021-04-07
- 健脾消癌方對結腸癌HCT116細胞遷移、侵襲的影響研究*
.3 試劑與儀器胎牛血清（以色列Biological industries公司，批號:1616316）；DMEM培養(yǎng)基（美國Hyclone公司，批號:NZD1131）；BCA蛋白濃度測定試劑盒（上海碧云天生物技術有限公司，批號:P0012）；RIPA裂解液（上海碧云天生物技術有限公司，批號:P0013b）；結晶紫（上海碧云天生物技術有限公司，批號:C0121）；MMP-2（美國Abcam公司，貨號:ab92536）；MMP-9（美國Abcam公司，貨號:a
中醫(yī)學報 2021年1期2021-01-21
- 中英文對照名詞詞匯（六）
ein（MOG）胎牛血清 fetal bovine serum（FBS）體重指數(shù) body mass index（BMI）8條目癡呆篩查問卷 8-Item Ascertain Dementia（AD8）通透性轉換孔 permeability transition pore（PTP）同型半胱氨酸 homocysteine（Hcy）Zeste同源蛋白2增強子enhancer of Zeste homolog 2（EZH2）銅轉運體1 copper transp
中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志 2021年11期2021-01-02
- 牛流行性流產(chǎn)的臨床診斷及防治
也與牛感染時間、胎牛年齡以及牛的抵抗力相關，成年牛對病原體具有較高的抵抗力，初胎或者體格較弱的妊娠期母牛易感，胎牛在成型初期易感染皮革鈍緣蜱疏螺旋體。1.3 臨床癥狀妊娠期在7～9個月之間的母牛最易發(fā)生流產(chǎn)現(xiàn)象，大部分胎牛在自行排出或者是正常出生前后，就已經(jīng)處于死胎狀態(tài)，胎牛在子宮內(nèi)自溶現(xiàn)象較為罕見。對感染病原體的胎牛進行實驗檢測，可發(fā)現(xiàn)胎牛體內(nèi)出現(xiàn)局部性器質壞死病灶和血管炎，通過免疫熒光檢測，可發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮細胞有IgG與IgM反應，血管外膜也存在著顆粒性
獸醫(yī)導刊 2020年3期2020-12-30
- 不同墊料類型對奶牛乳房炎感染影響的比較分析
床模式牧場中，3胎牛與1，2胎牛的體細胞數(shù)評分具有顯著差異；在牛糞再生墊料臥床模式牧場中，1，2，3胎牛的體細胞數(shù)評分差異不顯著；在風積沙墊料散臥模式牧場中，3胎牛體細胞數(shù)評分顯著高于1，2胎牛。而各類型墊料模式牧場的各胎次牛對比發(fā)現(xiàn)，同胎次牛在不同類型墊料的牧場中體細胞數(shù)評分差異極顯著，其中風積沙墊料散臥模式牧場的各胎次體細胞數(shù)評分均最高，稻殼墊料臥床模式牧場的各胎次體細胞數(shù)評分均最低。對于體細胞0～5分占牛群比例的結果顯示，在稻殼墊料臥床模式牧場組中，
中國乳業(yè) 2020年10期2020-12-15
- 不同來源血清對體外培養(yǎng)驢巨噬細胞的影響
：為比較驢血清和胎牛血清對體外培養(yǎng)驢巨噬細胞的影響，采用含10%驢血清或胎牛血清的培養(yǎng)液進行驢巨噬細胞培養(yǎng)的對比試驗，分別在培養(yǎng)的1、4、7、10 d時觀察細胞的生長狀況，并用MTT法通過細胞吸光度檢測細胞活力;培養(yǎng)后4 d采用流式細胞儀檢測巨噬細胞的純度。結果表明，含10%驢血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的驢巨噬細胞的分化能力優(yōu)于胎牛血清;培養(yǎng)后1、4 d時，2種血清對巨噬細胞活力的影響沒有顯著差異，但培養(yǎng)后7、10 d，驢血清組的細胞活力顯著（P關鍵詞：驢;MTT法;
江蘇農(nóng)業(yè)科學 2020年13期2020-08-28
- 不同的樣品制備方法對殼聚糖創(chuàng)傷敷料細胞毒性實驗結果的影響
儀器有限公司]；胎牛血清（Biological Industries Israel Beit Haemek Ltd）；DMSO（SIGMA-ALDRICH）；異丙醇（天津市百世化工有限公司）；高密度聚乙烯膜（Hatano Research Institute，F(xiàn)DSC）；0.9%氯化鈉注射液（石家莊四藥有限公司）；MTT（Sigma公司），溶于不含酚紅的MEM中，濃度為1 mg/ml，溶液采用過濾器（孔徑≤0.22 μm）經(jīng)無菌過濾法除菌，過濾后當天使用。
醫(yī)療裝備 2020年13期2020-08-24
- 不同類型牛血清對MDCK細胞培養(yǎng)效果研究
。本研究通過國產(chǎn)胎牛血清、進口胎牛血清、國產(chǎn)新生牛血清對MDCK細胞復蘇和傳代培養(yǎng)的對比試驗，在短時間內(nèi)找到培養(yǎng)MDCK細胞的最佳血清，以期為疫苗研發(fā)節(jié)約成本、節(jié)省時間。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 細胞 貼壁培養(yǎng)型MDCK細胞從ATCC引進，引進后由甘肅省動物細胞技術創(chuàng)新中心按《中國藥典》2010版的要求建立主細胞庫(MDCK-M-60，P60)和工作細胞庫(MDCK-W-63，P63)。1.1.2 培養(yǎng)基 DEME(high-glucous)購
生物學雜志 2020年4期2020-08-19
- MTT細胞毒性試驗參數(shù)驗證
，MEM培養(yǎng)基，胎牛血清，小牛血清，酶標儀，高密度聚乙烯（HDPE）。圖1. L-929細胞（高密度）1.2 細胞代數(shù)參數(shù)L-929小鼠成纖維細胞為細胞毒性試驗常用細胞系，為貼壁細胞，每傳代一次需進行消化一次。本試驗通過相差11代的細胞對同一供試品進行檢測，并將數(shù)據(jù)進行對比，以驗證隨著細胞代數(shù)的增加，該細胞系的檢測敏感度有所變化。細胞系：L-929，美國模式培養(yǎng)物集存庫（ATCC）；細胞凍存：將細胞消化成單細胞懸液，將細胞密度調(diào)整為約1×106cells/
中國醫(yī)療器械信息 2020年7期2020-05-16
- 不同培養(yǎng)體系對金華豬卵母細胞體外成熟的影響
發(fā)情金華豬血清/胎牛血清)；四種培養(yǎng)體系分別進行卵母細胞體外成熟培養(yǎng)，觀察卵母細胞體外成熟情況，以探討不同培養(yǎng)體系對金華豬卵母細胞體外成熟的影響，試驗重復3次。1.5卵母細胞體外成熟的判斷 卵母細胞成熟培養(yǎng)44 h后，將卵母細胞(COCs)放入含0.1%的透明質酸酶的成熟液中3 min，用僅僅比卵母細胞大幾個微米的吸管將卵母細胞反復吸入吹出，以去除卵丘細胞。在實體顯微鏡下觀察第一極體是否存在，以第一極體排出作為卵母細胞成熟的標準。1.6數(shù)據(jù)分析 用Grap
浙江畜牧獸醫(yī) 2020年2期2020-05-01
- 動物血清的成分及在細胞培養(yǎng)中的作用
等。新生牛血清或胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用的生長補充劑，主要是因為它具有高水平的生長刺激因子和低水平的生長因子。使用牛血清作為培養(yǎng)基添加劑在建立原代細胞培養(yǎng)、維持器官/組織外植體和干細胞繁殖的情況下仍然是必要的，因為血清具有促進分化的功能，還具有運輸攜帶激素（如轉運蛋白）、礦物質和微量元素（如轉鐵蛋白）和脂質的蛋白質的功能，且含有貼附和擴散因子，在維持pH值或直接抑制蛋白酶作用方面也有一定效果，使用血清就不需要為每個細胞系和菌種優(yōu)化培養(yǎng)基，這可節(jié)省大量人力物
甘肅畜牧獸醫(yī) 2020年10期2020-03-03
- 貓杯狀病毒抗體間接ELISA 檢測方法的建立
、1%明膠、5%胎牛血清、5%脫脂奶粉作封閉液,37 ℃封閉2 h,FCV 陽性血清作為一抗,同時設置陰性對照,加入HRP 標記兔抗貓IgG,進行常規(guī)ELISA 檢測,酶標儀讀取各孔OD450nm值,計算P/N 值,確定最佳封閉液。1.3.2 最佳血清稀釋液的確定將樣本血清分別以1%BSA、PBST、5%兔血請、5%胎牛血清按1∶100 稀釋,100 μL/孔加入96 孔酶標板反應,進行常規(guī)ELISA 檢測,酶標儀讀取各孔OD450nm值,計算P/N值,確
中國獸醫(yī)雜志 2019年5期2019-09-18
- 酮病對荷斯坦牛泌乳性能的影響
低于高風險組，2胎牛只酮病高風險組乳脂率顯著低于低風險組。各胎次牛只乳蛋白率均呈現(xiàn)酮病高風險組顯著高于低風險組和中風險組情況。1胎和2胎牛只酮病高風險組牛只的體細胞評分（SCS）顯著或極顯著高于其他2組。2.3 胎次對奶牛酮病發(fā)生的影響由表3可以看出，酮病中風險組和高風險組的頭數(shù)在各胎次樣本中占比隨著胎次的增加而升高，其中3胎及以上的頭數(shù)占比高達30.11%，分別比1胎和2胎牛只高出10.65個百分點（P＜0.05）和6.98個百分點（P＞0.05）。表3
中國奶牛 2019年8期2019-09-12
- MDCK單克隆細胞的制備方法研究
1.2 主要試劑胎牛血清和新生牛血清均購自蘭州民海生物工程有限公司；DMEM培養(yǎng)基和0.25%胰酶均購自蘭州百靈生物技術有限公司；配制PBS(無Ca2+、Mg2+)緩沖液。1.3 主要儀器設備CO2細胞恒溫培養(yǎng)箱(上海博訊公司)，生物倒置顯微鏡(日本奧林巴斯光學科技有限公司)，Countstar自動細胞計數(shù)儀(上海睿鈺生物科技有限公司)等。1.4 細胞培養(yǎng)將儲存于液氮罐中的MDCK工作庫細胞取出，37 ℃水快速融化后置于50 cm2培養(yǎng)瓶中，補加培養(yǎng)基后再
浙江農(nóng)業(yè)科學 2019年2期2019-02-28
- 奶牛牧場的產(chǎn)犢管理
張，到羊膜和部分胎牛進入產(chǎn)道為止，該產(chǎn)程可能持續(xù)1~24 h，1~4 h為正常。胎牛娩出期，其特征是由于陰道腔內(nèi)的胎牛造成腹部收縮，止于胎牛通過外陰娩出。頭胎青年母牛的分娩時間預計為1~4 h。如果胎位正常，經(jīng)產(chǎn)母牛的分娩時間一般不超過3 h；如果在1 h內(nèi)未見有娩出跡象，可能需要助產(chǎn)。胎衣娩出和子宮復舊。胎衣娩出通常在分娩后12 h內(nèi)完成。在臨產(chǎn)母牛出現(xiàn)難產(chǎn)、需要采用助產(chǎn)措施的可能性很大時，可以在臨近中午時（11:00~12:00）飼喂母牛，21:30~
飼料博覽 2019年7期2019-02-12
- β-雌二醇經(jīng)ERβ-ERK1/2雌激素胞膜信號傳導途徑促進肺癌A549細胞遷移和侵襲*
1640培養(yǎng)液和胎牛血清購自Gibco；活性炭吸附胎牛血清和TRIzol購自Invitrogen；ERK1/2抑制劑PD98059和β-雌二醇購自Sigma；BCA 蛋白濃度測定試劑盒、預染蛋白Marker和ECL 發(fā)光液購自Thermo；兔抗人ERα、p-ERK1/2和ERK1/2抗體購自CST；兔抗人ERβ和GAPDH抗體購自Santa Cruz； cDNA逆轉錄試劑盒購自TaKaRa；其它生化試劑購自上海生工生物工程公司。Real-time PCR引
中國病理生理雜志 2018年10期2018-10-29
- IRX3基因在秦川牛不同組織中的表達分析
料包括3頭秦川牛胎牛(妊娠3個月的胎兒)的心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、大腸、小腸、肌肉(背最長肌)，3頭6月齡秦川牛的心臟、肝臟、肺臟、大腸、小腸、肌肉(背最長肌)，3頭24月齡秦川牛的心臟、肝臟、肺臟、大腸、肌肉(背最長肌)，以及6月齡、18月齡、24月齡、60月齡秦川牛的脂肪組織，所有組織器官均由西北農(nóng)林科技大學國家肉牛改良中心種質資源庫于-80 ℃保存。1.1.2 主要試劑及儀器 Trizol試劑和總RNA提取試劑盒，TIANGEN?公司產(chǎn)品；天凈
西北農(nóng)林科技大學學報（自然科學版） 2018年6期2018-07-24
- 納米銀抗菌產(chǎn)品體外細胞毒性測定
lone 公司；胎牛血清，GIBCO；MTT，北京鼎國昌盛生物技術有限責任公司。1.2 儀器 超凈工作臺，蘇凈安泰；二氧化碳培養(yǎng)箱，Thermo；酶標儀，BIO-RAD。2 實驗方法2.1 細胞株及培養(yǎng)基 L929 細胞，采用含10%胎牛血清的DMEM 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。2.2 樣品配制 采用1 號、2 號、3 號、4 號、6 號樣品，其中1 號、4 號、6 號樣品為液體，2 號、3 號樣品為浸膏。1 號、4 號、6 號樣品的配制：取1 號、4 號、6 號樣
災害醫(yī)學與救援(電子版) 2018年2期2018-03-03
- 奶牛養(yǎng)殖繁育配套技術
保養(yǎng)，以切實保證胎牛的穩(wěn)定生長和順利產(chǎn)出，避免早產(chǎn)和千兆流產(chǎn)情況的出現(xiàn)。如果奶牛體現(xiàn)出千兆流產(chǎn)的癥狀，通常歸因于胎牛在胞宮中的生命體征；母牛生殖系統(tǒng)出現(xiàn)異常而導致持續(xù)收縮；母牛內(nèi)分泌發(fā)生異常，削弱維護胎牛生命體征的能力等，在奶牛孕期的前2個月內(nèi)，胎牛在胞宮中處于游離狀態(tài)，此時胎牛的營養(yǎng)是由母體胞宮發(fā)出經(jīng)由胎盤進行傳輸，此時期母體的飲食條件若不符合相關標準，其胞宮分泌的營養(yǎng)量則較少，這在一定程度上妨礙胎牛的穩(wěn)定成長，甚至還會使胎牛失去生命體征。待母牛處于懷孕
畜牧獸醫(yī)科學 2018年13期2018-02-15
- 兩種腫瘤干細胞球培養(yǎng)方法的比較
脂糖表面含10%胎牛血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)法。本實驗著重探討兩種腫瘤干細胞球培養(yǎng)方法的優(yōu)劣，為完善腫瘤干細胞球培養(yǎng)技術提供思路。1 材料與方法1.1材料黑色素瘤B16/F10，購自北京協(xié)和組織細胞庫。RPMI1640培養(yǎng)基購自北京鈕因泰克公司；干細胞誘導因子B27購自Invitrogen公司，表皮生長因子(epidermal growth factor, EGF)及堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor, bFG
臨床與實驗病理學雜志 2017年11期2018-01-15
- 干擾Mi 6基因表達對非小細胞肺癌EGFR信號通路的影響
胞株在含有10%胎牛血清、100 IU·ml-1青霉素、100 μg·ml-1鏈霉素的RPMI 1640培養(yǎng)基中在37 ℃、5%CO2條件下培養(yǎng)，每隔2 d更換1次培養(yǎng)液，0.25%胰蛋白酶進行傳代。1.3.4 細胞侵襲能力檢測 選擇24孔Transwell小室，在上室中均勻鋪滿20 μl Matrigel。將轉染的細胞用不含血清的培養(yǎng)基重懸，調(diào)整密度為5×106個·ml-1。上室加入100 μl細胞懸液，下室加入500 μl含有10%胎牛血清的培養(yǎng)基，于
東南大學學報（醫(yī)學版） 2017年3期2017-07-07
- 苜蓿皂苷對膽固醇逆向轉運基因三磷酸腺苷結合盒轉運體A1、清道夫受體BⅠ mRNA表達的影響
，灌胃4周。采用胎牛血清作用于BRL細胞48 h，構建脂變模型，將BRL細胞分為正常對照組(正常細胞)、苜蓿皂苷組(正常細胞)、脂變模型組(脂變細胞)和脂變皂苷組(脂變細胞)，苜蓿皂苷組、脂變皂苷組培養(yǎng)液中添加苜蓿皂苷(終濃度300 μg/mL)，培養(yǎng)24 h。采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)作用于ANA-1細胞48 h，構建荷脂模型，將ANA-1細胞分為正常對照組(正常細胞)、苜蓿皂苷組(正常細胞)、荷脂模型組(荷脂細胞)和荷脂皂苷組(荷脂細胞)，苜
動物營養(yǎng)學報 2017年4期2017-04-24
- 奶牛新孢子蟲病的巢式PCR診斷及ELISA檢測
奶牛場流產(chǎn)奶牛的胎牛組織進行新孢子蟲Nc5基因巢式PCR檢測診斷，并用ELISA方法對該奶牛場不同年齡階段奶牛血清樣品進行新孢子蟲抗體檢測。結果顯示，在4例流產(chǎn)胎牛樣本中有3例檢出新孢子蟲DNA；新孢子蟲血清抗體陽性率達44.80%(112/250)，其中，經(jīng)產(chǎn)奶牛陽性率為55.40%(77/139)，未經(jīng)產(chǎn)奶?；驙倥ｊ栃月蕿?1.53%(35/111)；經(jīng)產(chǎn)奶牛中有流產(chǎn)史的陽性率為73.17%(30/41)，其余未發(fā)生過流產(chǎn)的陽性率為47.96%(47/
河南農(nóng)業(yè)科學 2017年2期2017-03-01
- Estimation of boundary-layer flow of a nanofluid past a stretching sheet: A revised model*
DMEM+10%胎牛血清于5%CO2，37℃的培養(yǎng)箱培養(yǎng)。購買時為第3代，培養(yǎng)3代后用于后續(xù)實驗研究。［4］ KHAN W. A.， POP I. Boundary-layer flow of a nanofluid past a stretching sheet［J］. International Journal of Heat and Mass Transfer， 2010， 53（11）: 2477-2483.［5］ KUZNETSOV A. V.，
水動力學研究與進展 B輯 2016年4期2016-10-18
- β-欖香烯對人肝癌細胞HepG2增殖的影響及機制探討
分別置于含10%胎牛血清RPMI 1640培養(yǎng)基、5 μg/mL β-欖香烯+10%胎牛血清RPMI 1640培養(yǎng)基、10 μg/mL β-欖香烯+10%胎牛血清RPMI 1640培養(yǎng)基、20 μg/mL β-欖香烯+10%胎牛血清RPMI 1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)。采用MTT法檢測培養(yǎng)0、24、48、72 h時細胞增殖抑制率，采用RT-PCR法檢測各組培養(yǎng)24 h時細胞軸蛋白(Axin)、結腸腺瘤息肉易感基因(APC)蛋白和β-連環(huán)蛋白(β-catenin)
山東醫(yī)藥 2016年18期2016-09-05
- 胎牛血清對人內(nèi)皮細胞HMEC-1體外成血管實驗影響的觀察△
350122）胎牛血清對人內(nèi)皮細胞HMEC-1體外成血管實驗影響的觀察△胡雅瓊林渺滿林凡（福建中醫(yī)藥大學中西醫(yī)結合學院福州350122）目的：觀察胎牛血清對人內(nèi)皮細胞HMEC-1體外成血管實驗的影響。方法：人內(nèi)皮細胞HMEC-1采用相同的培養(yǎng)條件處理后，隨機分為無胎牛血清組和胎牛血清組，分別采用無胎牛血清培養(yǎng)基和含胎牛血清培養(yǎng)基（含5%胎牛血清）接種于成血管基質膠，培養(yǎng)6h后用倒置相差顯微鏡觀察不同處理組內(nèi)皮細胞血管管腔形成情況。結果：無胎牛血清組的血管
北方藥學 2016年8期2016-08-09
- A549細胞凍存與復蘇方法的改進
IBCO公司），胎牛血清（四季青），DMSO（北京鼎國昌盛生物技術有限責任公司），胰蛋白酶（北京鼎國生物技術有限公司），CO2培養(yǎng)箱，倒置顯微鏡，超凈工作臺。實驗方法A549細胞的培養(yǎng)及傳代在溫度為37℃±1、CO2濃度為5%培養(yǎng)箱內(nèi)，用胎牛血清為10%的RPMI-1640培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，待細胞生長至80%～90%即可傳代培養(yǎng)：棄去培養(yǎng)液后加入適量胰酶，37℃消化1～2 min，見有細小白沙狀物順瓶底滑脫，顯微鏡下觀察到大部分細胞呈現(xiàn)圓形，細胞間隙增大后，
中國科技信息 2016年13期2016-08-01
- 河南洛陽地區(qū)流產(chǎn)奶牛感染性病原的分子檢測
共42頭新鮮流產(chǎn)胎牛，及其母體的血液、陰道分泌物和鼻腔分泌物，計為42例樣本，采用PCR或RT-PCR方法對所采集樣本進行新孢子蟲、弓形蟲、胎兒三毛滴蟲、布魯菌、牛傳染性鼻氣管炎病毒（IBRV）和牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）6種常見流產(chǎn)病原的核酸檢測。結果顯示，被檢樣本總感染率為42.9%（18/42），其中新孢子蟲感染率最高，為40.5%（17/42）；IBRV次之，為11.9%（5/42）；胎兒三毛滴蟲、布魯菌、弓形蟲和BVDV感染率分別為2.4%、2
中國獸醫(yī)雜志 2015年11期2015-12-08
- Xist基因抑制對牛SCNT早期胚胎發(fā)育的影響
ER）載體轉染到胎牛成纖維細胞對Xist基因的抑制作用，并以抑制Xist基因表達的細胞作為核供體制作克隆胚胎，研究Xist基因抑制對?？寺∨咴缙诎l(fā)育的影響。結果顯示，與對照組細胞相比，TALER載體將Xist相對表達量下調(diào)了93.85%，說明本試驗設計的載體轉染系統(tǒng)能夠有效抑制Xist基因的表達。選取Xist抑制表達陽性的轉染細胞用于體細胞核移植試驗，克隆胚胎發(fā)育結果顯示，試驗組和對照組的卵裂率、8細胞發(fā)育率、桑葚胚發(fā)育率和囊胚發(fā)育率分別為78.8% vs
生物技術通報 2015年1期2015-10-25
- 褪黑素對PANC-1細胞增殖的影響及機制探討
)，95%乙醇，胎牛血清，γ內(nèi)分泌酶抑制劑(DAPT)，DMSO，兔抗人NICD1，抗 β-actin 抗體，鼠抗兔 IgG，TRIzol，發(fā)光液。1.2 PANC-1細胞分組及褪黑素干預 取PANC-1細胞，加入含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。將細胞分為以下幾組:①對照1組:取對數(shù)生長期的PANC-1細胞，用不含胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基饑餓24 h后，吸棄培養(yǎng)液，用含10%胎牛血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)24
山東醫(yī)藥 2015年11期2015-04-04
- Jagged1活化Notch通路促進RAW 264.7向破骨分化但抑制增殖①
TCC，美國)，胎牛血清(Gibco，美國)，DMEM培養(yǎng)基、0.25%胰酶和青鏈霉素雙抗(HyClone，美國)，鼠重組RANKL(R＆D，美國)，Jagged1重組蛋白(義翹神州，北京)，γ-分泌酶抑制劑{3，5-二氟笨乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸 t-丁酯 N-［N-(3，5-difluorophenacetyl)-L-alanyl］-S-phenylglycine t-butyl ester，DAPT}和 TRAP 染色試劑盒(Sigma，美國
中國免疫學雜志 2014年7期2014-11-27
- 前列消癥湯對前列腺癌PC-3細胞PI3K/Akt信號通路表達的影響?
M 1：培養(yǎng)基、胎牛血清(FBS)，美國Hyclone公司；胰蛋白酶，吉諾生物制品公司； RNA柱式抽提試劑盒，上海生工生物工程公司；RT-PCR試劑盒，上海東洋紡生物科技有限公司。1.2 主要儀器CO2細胞培養(yǎng)箱，美國Shell Lab公司；超凈工作臺，蘇州凈化設備廠；F039300A型Sunrise酶標儀，瑞士TECAN公司；高壓蒸汽滅菌器，日本HIRAYAMA 公司；臺式干燥箱，上海森信實驗儀器有限公司；RT-PCR儀，美國應用生物系統(tǒng)公司；凝膠成像
中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志 2014年4期2014-02-09
- 肝星狀細胞通過SDF-1/CXCR4軸誘導肝癌細胞上皮間質轉分化并促進其侵襲
消化，用含10%胎牛血清無抗生素的PRIM-1640培養(yǎng)基調(diào)整細胞數(shù)為4×105/mL，以0.5 mL/孔于24孔培養(yǎng)板培養(yǎng)過夜，約75%細胞匯合后進行轉染。瞬時轉染48 h后細胞按1∶6接種于 6孔板，并加600 μg/mL G418進行穩(wěn)定轉染篩選。14 d后出現(xiàn)多個G418抗性的集落，由于質粒帶有綠色熒光蛋白GFP，在熒光顯微鏡下可見綠色熒光的陽性集落。顯微鏡下，用移液器槍頭吸取少量胰蛋白酶后挑取帶綠色熒光的單個集落。挑取的集落移入24孔培養(yǎng)板，G4
基礎醫(yī)學與臨床 2013年8期2013-09-15
- 不同胎牛血清、培養(yǎng)瓶體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質干細胞效果比較
較了普通、高純度胎牛血清培養(yǎng)基及塑料瓶、玻璃瓶體外培養(yǎng)全骨髓貼壁法分離的骨髓間充質干細胞的效果，旨在建立一種簡便、有效、穩(wěn)定的BMSCs分離培養(yǎng)體系?，F(xiàn)報告如下。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 實驗動物 健康4周齡SD大鼠6只，雌雄不限，由南昌大學動物科學部提供，實驗過程中對動物的處置符合2006年科技部《關于善待實驗動物的指導性意見》的規(guī)定。1.1.2 主要試劑和儀器設備 DMEM、0.25%胰蛋白酶－EDTA消化液、標準胎牛血清、PBS粉、DMS
山東醫(yī)藥 2012年38期2012-04-13
- 最后的瘋狂——美法英轟炸利比亞有感
，接種于含10%胎牛血清的RPMI‐1640培養(yǎng)基中，37℃、含5%二氧化碳的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，實驗中使用對數(shù)生長期的細胞。亞非拉殖民賣黑奴，侵略割地索賠款，殖民利益要“均沾”……一切為了自家私利，一切為了掠奪資源。即使面臨沉淪，也要作垂死冒險。就像夏夜的飛蛾，總要撲向火焰。這是最后的瘋狂，還能橫行多少年？受辱的人們在圖強，中國潛龍要升天。今天的世界瞬息萬變，誰見過千年不敗的強權？讓那些西化“精英”鸚鵡學舌去吧，四百年的罪惡，人民將徹底清算！
中華魂 2011年6期2011-12-23
- 新生牛血清對大鼠脂肪來源細胞生長的影響
的培養(yǎng)基，尤其是胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)。我們采用新生牛血清替代傳統(tǒng)的胎牛血清培養(yǎng)分離的大鼠脂肪來源細胞，觀察新生牛血清對大鼠脂肪來源細胞生長的影響，以期用價格較便宜的新生牛血清替代傳統(tǒng)價格較貴的胎牛血清進行脂肪來源細胞培養(yǎng)。1 材料和方法1.1 主要實驗材料 出生后3~5d的SD大鼠（我校實驗動物中心）；Ⅰ型膠原酶（Sigma,美國）；DMEM/F12(1:1)培養(yǎng)基（Gibco,美國）；新生牛血清（杭州四季青）；超凈工作
遵義醫(yī)科大學學報 2011年4期2011-12-03
- 一種簡便的大鼠肝臟星狀細胞分離培養(yǎng)方法及鑒定
京索萊寶公司)，胎牛血清(無支原體級)(杭州四季青)，Desmin抗體(bioword)，SABC免疫組化試劑盒(武漢博士德)。1.2 方法1.2.1 液體配制 (1)灌注酶:鏈酶蛋白酶100 mg，Ⅳ型膠原酶 50 mg，D-Hanks 100 mL。(2)消化酶:Ⅳ型膠原酶50 mg，鏈酶蛋白酶20 mg，DNA酶10 mg，D-Hanks 100 mL。(3)密度梯度離心液:9份Percoll加 1 份 1.5M PBS，配置成 100% 的 Per
中國腫瘤外科雜志 2011年2期2011-05-24
- 一些常用詞匯可直接用縮寫
胎牛血清(FBS) 天冬氨酸轉氨酶(AST) 磷酸鹽緩沖液(PBS)人類免疫缺陷病毒(HIV) 變異系數(shù)(CV) 磁共振成像(MRI)血紅蛋白(Hb) 核因子-κB(NF-κB) 重癥監(jiān)護病房(ICU)酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA) 逆轉錄—聚合酶鏈反應(RT-PCR) 嚴重急性呼吸綜合征(SARS)動脈血氧分壓(PaO2) 腫瘤壞死因子(TNF) 動脈血二氧化碳分壓(PaCO2)干擾素(IFN) 凝血酶時間(TT) 白細胞介素(IL)活化部分凝血活酶時間
山東醫(yī)藥 2011年13期2011-04-13
- 酸性肽對體外培養(yǎng)大鼠星形膠質細胞增殖的影響*
ibco公司),胎牛血清(鄭州真科生物有限公司)。1.2 大鼠星形膠質細胞的培養(yǎng)與鑒定[4-5]取出生后2 d內(nèi)的SD大鼠(鄭州大學實驗動物中心),無菌條件下斷頭取出大腦皮質部分,投入PBS中,仔細剔除中腦、嗅球、海馬、腦膜及毛細血管等結構,進行星形膠質細胞的原代培養(yǎng)。取第 2代的星形膠質細胞,用2.5 g/L的胰蛋白酶消化細胞,接種于預先經(jīng)多聚賴氨酸處理的蓋玻片上,3 d后,先用 0.01 mol/L PBS漂洗,再用PBS配制的40 g/L多聚甲醛固定
鄭州大學學報（醫(yī)學版） 2010年3期2010-03-19
- 青海高原地區(qū)母牛胎衣不下及其影響因素調(diào)查
4可看出,1～2胎牛胎衣不下的發(fā)病率2.00%～3.60%,3～4胎牛胎衣不下的發(fā)病率3.94%～3.77%,5～6胎牛胎衣不下的發(fā)病率3.06%～5.08%,7～10胎牛胎衣不下的發(fā)病率9.20%～20.00%。從胎衣不下的發(fā)病率看,胎次越大胎衣不下的發(fā)病率越高。表4 胎衣不下與胎次的關系2.5 胎衣不下與分娩月份的關系 從表5可看出,6、7、8月份牛胎衣不下的發(fā)病率最高,分別為10.00%、9.80 %、11.83%;1月份、11月份、12月份胎衣不下
中國草食動物科學 2010年2期2010-01-30
- 犢牛護理中需注重的一些問題
協(xié)力的猛拉，新生胎牛在一二三的喊聲中突然離開母體，臍帶嘎然斷開，鮮血四射，造成胎牛窒息，長時間的緩不過氣來，場面好不驚險。正確的做法，胎蹄露出陰門外，不要驚慌，不要急于接產(chǎn)，應順其自然，給母牛一個適應環(huán)境的過程，也給胎牛一個自然產(chǎn)出的緩沖條件，這樣通過一段時間的自身適應和骨盆開張，大多數(shù)牛在20～40min可以自然產(chǎn)出，如果胎牛過大或努責有限，可在關鍵時刻人為助產(chǎn)，借助母牛的努責節(jié)律加勁拽拉。另外在人工接產(chǎn)時要注意，不可與陰道水平方向拉拽，而應順著陰門斜下
現(xiàn)代農(nóng)業(yè)研究 2009年4期2009-05-04