李秀蘭，於蘭婭

(江蘇省揚(yáng)州市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 揚(yáng)州 225009)

凝血試驗(yàn)檢測(cè)主要用于凝血、出血及血栓疾病的診斷，也常作為手術(shù)前的常規(guī)檢測(cè)。凝血試驗(yàn)的準(zhǔn)確性，是指導(dǎo)臨床正確治療疾病的保證。它一般包括凝血酶原時(shí)間(PT)，凝血酶時(shí)間(TT)，活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)，纖維蛋白原(FIB)及各種凝血因子。由于其反應(yīng)的特殊性不同于一般的酶類(lèi)檢測(cè)，當(dāng)起動(dòng)因子被某因素激活后，就會(huì)發(fā)生一系列的連鎖反應(yīng)，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)較大誤差，所以對(duì)檢驗(yàn)人員來(lái)說(shuō)，掌握影響凝血試驗(yàn)的有關(guān)因素尤為重要?，F(xiàn)將試驗(yàn)中影響因素作如下分析。

1標(biāo)本的采集 (1)采集標(biāo)本前盡量使患者處于平靜狀態(tài)，情緒激動(dòng)、劇烈運(yùn)動(dòng)會(huì)引起血小板增高，凝血活性增強(qiáng)。(2)采血時(shí)，止血帶不應(yīng)扎得太緊或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，時(shí)間不宜超過(guò)3min，盡可能做到一針見(jiàn)血，避免因多次靜脈穿刺損傷血管和組織，使有些凝血因子和組織纖溶酶激動(dòng)劑釋放和活化而影響結(jié)果。(3)采血最好采用一次性硅化真空采血管，避免注射血液入試管時(shí)用力過(guò)大，速度過(guò)快，紅細(xì)胞被擠壓破碎，從而激活凝血系統(tǒng)影響檢測(cè)結(jié)果。

2抗凝劑的使用 (1)抗凝劑有很多種，因?yàn)槟蜃英鹾廷阼蹤此嶂斜容^穩(wěn)定，所以應(yīng)選用0.109mol/l的枸櫞酸鈉。(2)抗凝劑與血液的比例應(yīng)為1:9，若抗凝劑的量過(guò)多，血液過(guò)少則凝血酶原時(shí)間(PT)，活化部分凝血酶時(shí)間(APTT)均延長(zhǎng)。若血液量過(guò)多可使PT結(jié)果縮短。(3)若紅細(xì)胞比容 (HCT)>55%或<25%應(yīng)按如下公式核算抗凝劑的用量，抗凝劑的量(ml)=0.00185×全血量(ml)×[100-HCT(%)][1]。

3標(biāo)本的處理及保存 (1)采集好的標(biāo)本需要及早分離血漿，最好在2h內(nèi)，離心的速度和時(shí)間應(yīng)為3000r/min，離心10min，并盡快檢測(cè)。(2)標(biāo)本存放的溫度和時(shí)間不同對(duì)各種凝血因子的活性檢測(cè)會(huì)有所不同。室溫下，富血小板血漿可存放3h，乏血小板血漿可存放2h，全部試驗(yàn)不能在4h內(nèi)完成時(shí)，應(yīng)將血漿分裝后快速冷凍，儲(chǔ)存于-20℃冰箱中，在試驗(yàn)前將血漿于37℃下快速融化后進(jìn)行檢測(cè)，融化的血漿不能再次冷凍[2]。

4試劑與儀器 (1)凝血試驗(yàn)按照儀器的性能盡可能選用與儀器配套的試劑，由于檢測(cè)中所使用的試劑盒是根據(jù)不同反應(yīng)而加入不同的凝血因子，均為生物試劑，容易受環(huán)境影響而降低其生物活性。因此使用試劑最好是現(xiàn)用現(xiàn)配，否則復(fù)溶后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)容易影響結(jié)果的準(zhǔn)確性，暫時(shí)不用的試劑要放回冰箱冷藏。PT試劑由于每批國(guó)際敏感度指數(shù)(ISI)值不一定相同，每一批試劑使用前均要先檢測(cè)20份18～55歲男女各半健康人的正常血清平均值作為正常值，以便正確計(jì)算出國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化凝血酶原時(shí)間(INR)比值。FIB不同批號(hào)的試劑均應(yīng)用參比血漿制定標(biāo)準(zhǔn)曲線。試劑應(yīng)放置2～8℃冰箱保存。并且每天均應(yīng)做室內(nèi)質(zhì)控血清的檢測(cè)。(2)儀器是保證檢測(cè)結(jié)果可靠性的關(guān)鍵，應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作，并要定期進(jìn)行校正，保養(yǎng)及維護(hù)，使儀器能保證在良好的工作狀態(tài)下進(jìn)行標(biāo)本、室內(nèi)、室間質(zhì)控的測(cè)定。

5其他因素 目前隨著半自動(dòng)、全自動(dòng)凝血儀的廣泛使用，對(duì)檢驗(yàn)人員的要求也越來(lái)越高，僅會(huì)使用和操作儀器是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，全面了解和掌握儀器的性能、影響檢測(cè)的因素，以及具備有效解決處理不同緊急情況下的應(yīng)變能力尤為重要。檢驗(yàn)人員還需要熟練掌握分析前及分析中的質(zhì)量控制和熟悉檢測(cè)結(jié)果的判斷，如肝實(shí)質(zhì)性損傷，重癥肝炎，肝硬化等患者由于肝細(xì)胞長(zhǎng)期受損，影響凝血因子的合成；DIC病人由于血小板及凝血因子的大量消耗，重度黃疸以及脂血的患者等PT、APTT、TT、FIB 不同程度的改變。

某些藥物本身就具有影響凝血機(jī)制的作用，或具有協(xié)同抗凝的作用，如阿司匹林、保泰松、氯霉素、長(zhǎng)效磺胺類(lèi)藥等可使口服抗凝藥物在血中濃度明顯升高，口服華法林及溶栓治療的患者。如肝素、雙香豆素低分子右旋糖酐等抑制凝血酶從而妨礙纖維蛋白原變成纖維蛋白，阻止血小板的黏附和聚集，使凝血結(jié)果延長(zhǎng)。大劑量應(yīng)用青霉素可使PT，APTT明顯延長(zhǎng)，INR比值也相應(yīng)延長(zhǎng)。大劑量應(yīng)用頭孢類(lèi)抗生素(β-內(nèi)酰胺酶)可明顯抑制腸道桿菌，影響維生素K的吸收，導(dǎo)致凝血因子Ⅱ、Ⅲ、Ⅸ、Ⅺ的合成障礙，使凝血指標(biāo)的結(jié)果明顯延長(zhǎng)。因此，對(duì)于藥物干擾 凝血試驗(yàn)結(jié)果的問(wèn)題需要加以注意和重視，在采集標(biāo)本前必須了解受檢者是否用過(guò)藥、何種藥、用藥時(shí)間和濃度等。有關(guān)藥物對(duì)凝血指標(biāo)的認(rèn)識(shí)尚不十分全面，還有待于進(jìn)一步觀察和探討。

綜上所述，影響凝血試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的原因較多，只有掌握了各方面影響因素，才能保證檢測(cè)結(jié)果最大限度的準(zhǔn)確和可靠。才能更好的為臨床診斷、鑒別診斷、病情觀察、藥物療效、預(yù)后判斷提供更可靠的依據(jù)。

[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版,東南大學(xué)出版社,2006:211.

[2]王毓三.醫(yī)院檢驗(yàn)科建設(shè)管理規(guī)范[M].第1版,東南大學(xué)出版社,2003:59.