吳延誨 梁慧芳

【摘 要】 目的 探討濫用抗生素導(dǎo)致的腸道菌群失調(diào)與肝細(xì)胞癌發(fā)生的相關(guān)性。方法 60例肝癌患者根據(jù)有無濫用抗生素分為兩組，再結(jié)合其臨床病理參數(shù)進(jìn)行比較。結(jié)果 濫用抗生素組較規(guī)范用藥組在腫瘤大小和T分期上均有明顯不同。結(jié)論 濫用以抑制革蘭氏陽(yáng)性菌為主的抗生素可能與肝細(xì)胞癌發(fā)生有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 原發(fā)性肝癌；濫用抗生素；TL受體；革蘭氏陰性菌

【中圖分類號(hào)】 R735.7 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A

肝細(xì)胞癌（HCC），因?yàn)閷?duì)放化療不敏感，及對(duì)人體新陳代謝的影響，一直位于世界致死率最高癌癥前列[1]。而對(duì)肝癌預(yù)防的研究進(jìn)展緩慢。中國(guó)濫用抗生素普遍，造成腸道菌群失調(diào)，引起各種并發(fā)癥。研究發(fā)現(xiàn)腸道細(xì)菌的移位以及失調(diào)引起TL受體變化，可引發(fā)肝癌。對(duì)肝癌發(fā)生前抗生素使用情況與發(fā)病后臨床病理參數(shù)分析，結(jié)合腸道細(xì)菌定性定量檢查結(jié)果，驗(yàn)證兩者相關(guān)性。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象 收集同濟(jì)醫(yī)院2006年1月到2012年6月經(jīng)CT及B超確診的60例肝癌患者。男性32例，女性28例，依據(jù)UICC和AJCC聯(lián)合分類標(biāo)準(zhǔn)分類。

1.2 方法 資料采集：對(duì)患者發(fā)病前既往用藥史進(jìn)行采集，分兩組，標(biāo)準(zhǔn)是每年服用抗生素總時(shí)間超過60天或連續(xù)應(yīng)用超過2周，在此基礎(chǔ)上出現(xiàn)腹瀉、便秘癥狀者。結(jié)合病理學(xué)參數(shù)分析。菌群定性分析：主要對(duì)革蘭氏陰性桿菌、陽(yáng)性菌及真菌進(jìn)行研究。采集患者糞便行厭氧、需氧菌檢查。用其結(jié)腸材料涂片檢查白色念珠菌。定量檢查：糞質(zhì)均質(zhì)培養(yǎng)后計(jì)算細(xì)菌數(shù)。HB8643 革蘭氏陰性菌選擇性培養(yǎng)基，HB7035 PEA瓊脂培養(yǎng)基針對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌，沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基針對(duì)真菌分別培養(yǎng)。放入37度恒溫箱，置于搖床250轉(zhuǎn)/分鐘搖動(dòng)。培養(yǎng)48小時(shí)候在倒置顯微鏡下計(jì)數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 計(jì)數(shù)資料X2檢驗(yàn)進(jìn)行比較，計(jì)量資料以Two-way Anova檢驗(yàn)比較。使用SPSS16.0軟件分析，P<0.05有意義。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)病前濫用抗生素 患者較對(duì)照組在腫瘤分期及腫瘤大小上有差異濫用抗生素史的患者腫瘤大小、T分期均較對(duì)照組有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（表1）。抑制革蘭氏陽(yáng)性菌為主抗生素的患者與抑制革蘭氏陰性菌的患者間也有明顯差異（表2）。

2.2 濫用抗生素患者腸道細(xì)菌分布與所用抗生素相互對(duì)應(yīng)糞檢以革蘭氏陰性細(xì)菌為主患者（均為明顯陽(yáng)性）以用抗革蘭氏陽(yáng)性菌抗生素為主，反之也如此。兩組之間有明顯對(duì)應(yīng)關(guān)系（表3）。

2.3 繼續(xù)行定量分析發(fā)現(xiàn)細(xì)菌菌落數(shù)與所用藥物相對(duì)應(yīng)濫用抗革蘭氏陽(yáng)性菌抗生素患者的革蘭氏陰性菌的菌落計(jì)數(shù)明顯高于革蘭氏陽(yáng)性菌及真菌。另一組患者細(xì)菌定量結(jié)果也有相同趨勢(shì)。

3 討論

肝癌發(fā)生發(fā)展是一個(gè)涉及多通路、多因素、多步驟的過程，作為人體炎癥反應(yīng)通路重要因子的TL受體[2]，進(jìn)一步把炎癥與腫瘤聯(lián)系在一起。

近期研究發(fā)現(xiàn)[3]，TL受體敲除的小鼠在肝癌誘導(dǎo)劑CCL4的作用下所生長(zhǎng)的腫瘤大小和數(shù)量均與未敲除小鼠有區(qū)別，TL受體[4]也通過影響IFN-a，IFN-c，IL-12 和TNF-a等促炎因子表達(dá)起重要作用。TL受體主要在腫瘤形成前最后4個(gè)月發(fā)生作用。

通過研究，我們發(fā)現(xiàn)濫用抗生素導(dǎo)致菌群失調(diào)，可能也通過TL受體產(chǎn)生作用。濫用抗生素組患者肝癌在腫瘤大小和TNM分期上均與對(duì)照組有明顯差異（P<0.05）。通過進(jìn)一步研究，長(zhǎng)期服用以抑制革蘭氏陽(yáng)性菌為主抗生素的患者腫瘤大小和T分期與對(duì)比組患者有明顯不同（P<0.05）。定量（圖1）研究患者腸道菌群表達(dá)譜，革蘭氏陰性菌菌落數(shù)與腫瘤大小和T分期正相關(guān)。由此認(rèn)為濫用抗生素通過TL受體引起肝癌發(fā)生。革蘭氏陰性菌更易引發(fā)癌癥，可能是內(nèi)毒素通過TL受體，造成肝臟炎癥反應(yīng)引發(fā)肝硬化的同時(shí)引起肝癌發(fā)生。除了與內(nèi)毒素入血有關(guān)外，還有可能通過NFkB移位影響細(xì)胞生物學(xué)特性。其具體機(jī)制，待進(jìn)一步研究。

雖然樣本量較少，受實(shí)驗(yàn)技術(shù)和條件影響，研究還不夠充分和深入。但這是國(guó)內(nèi)首次報(bào)道濫用抗生素與肝癌發(fā)生的相關(guān)性，部分解釋了無乙肝史肝癌患者發(fā)病的原因。

參考文獻(xiàn)

[1] P.A.Farazi，R.A.DePinho，HePatocellular carcinoma Pathogenesis：from genes to environment.Nature reviews[J].Cancer，2006，6（2006）：674-687.

[2] Alderton，G.K.（2012）.Inflammation：“The gut takes a toll on liver cancer.”[J].Nat Rev Cancer，2012，12（6）：379.

[3] Crane MJ，Gaddi PJ，Salazar-Mather TP.UNC93B1 Mediates Innate Inflammation and Antiviral Defense in the Liver during Acute Murine Cytomegalovirus Infection[J].PLoS One，2012，7（6）：39161.