新生兒黃疸TRF、CRP和肝功指標(biāo)變化意義分析

馮伊利，金蓓嬌

(臨海市第二人民醫(yī)院兒科，浙江 臨海 317000)

新生兒黃疸TRF、CRP和肝功指標(biāo)變化意義分析

馮伊利，金蓓嬌

(臨海市第二人民醫(yī)院兒科，浙江 臨海 317000)

目的 觀察血清轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)、C反應(yīng)蛋白(CRP)水平在新生兒黃疸中的變化，并分析其臨床意義。方法 以2012年3月至2015年6月在臨海市第二人民醫(yī)院接受治療的黃疸新生兒為觀察對(duì)象。根據(jù)其黃疸程度分為高危組(48例)、中危組(60)和低危組(78例)，同時(shí)選取50例母嬰同室病房?jī)?nèi)的健康新生兒作為對(duì)照組。觀察四組新生兒TRF、CRP水平及肝功能指標(biāo)的差異，分析TRF、CRP水平與肝功能指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果 四組新生兒的TRF和CRP水平分別比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F值分別為-39.265、75.956，均P<0.05)。四組新生兒的ALT、AST、DBIL和TBIL水平分別比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F值分別為22.356、28.932、18.253、25.266，均P<0.05)。新生兒黃疸者的TRF水平與ALT、AST呈顯著負(fù)相關(guān)(r值分別為-0.542、-0.431，均P<0.05)；CRP水平與ALT、AST和DBIL呈顯著正相關(guān)(r值分別為0.423、0.382、0.346，均P<0.05)。結(jié)論TRF在新生兒黃疸患者中較低，而CRP水平較高，且可作為臨床觀察指標(biāo)。

黃疸；轉(zhuǎn)鐵蛋白；肝功能；細(xì)胞因子；相關(guān)分析

感染、窒息、母乳性黃疸、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)缺乏及不明原因，或者ABO血型的溶血以及部分遺傳代謝性疾病，均可促進(jìn)新生兒黃疸的發(fā)生，相關(guān)研究表明新生兒黃疸的發(fā)病率可達(dá)1.6%以上[1]，且近年來(lái)呈現(xiàn)出了明顯上升的趨勢(shì)，長(zhǎng)期的新生兒黃疸可以影響到其生長(zhǎng)發(fā)育，導(dǎo)致生長(zhǎng)發(fā)育遲滯[2]。光照療法是目前臨床上治療新生兒黃疸的主要方式，但在患兒出院隨訪以及遠(yuǎn)期預(yù)后中缺乏有效的客觀實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)，血清膽紅素測(cè)定雖然可以反應(yīng)患者的病情變化，但對(duì)于患兒的遠(yuǎn)期臨床預(yù)后評(píng)估價(jià)值不高，靈敏度和特異度均較低[3-4]。相關(guān)研究證實(shí)血清轉(zhuǎn)鐵蛋白(transferrin，TRF)在病理性黃疸中表達(dá)顯著降低，并與患兒膽紅素腦病的發(fā)生以及預(yù)后有關(guān)[5-6]。本研究重在探討TRF、C反應(yīng)蛋白(C-reactionprotein，CRP)在新生兒黃疸中的變化及其臨床意義，為進(jìn)一步揭示黃疸的發(fā)病機(jī)制以及尋找可靠的臨床預(yù)后指標(biāo)提供參考。

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

選取2012年3月至2015年6月在臨海市第二人民醫(yī)院接受治療的黃疸新生兒為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合新生兒黃疸的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，足月兒血清膽紅素大于221μmol/L；②無(wú)肝腎功能嚴(yán)重障礙；③患兒家屬自愿參與本項(xiàng)研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①腫瘤或膽道閉鎖先天發(fā)育異常等原因?qū)е曼S疸者；②早產(chǎn)兒。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入研究對(duì)象186例，按照其血清總膽紅素水平分為三組，其中高危組(血清總膽紅素≥342.2μmol/L)48例，男28例，女20例，胎齡37～42周，平均38.97±1.02周，出生時(shí)體重2.93～4.98kg，平均3.82±1.02kg；中危黃疸組(血清總膽紅素256.6～<342.2μmol/L)60例，其中男32例，女28例，胎齡37～41周，平均38.82±1.13周，出生時(shí)體重2.97～4.85kg，平均3.76±1.11kg；低危黃疸組(血清總膽紅素<256.6μmol/L)78例，男45例，女33例，胎齡37～41周，平均38.79±1.16周，出生時(shí)體重2.95～4.88kg，平均3.74±1.15kg；對(duì)照組50例，男26例，女24例，胎齡37～42周，平均38.90±1.05周，出生時(shí)體重3.02～4.86kg，平均3.78±1.07kg。四組新生兒在性別、胎齡和出生時(shí)體重一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P>0.05)，具有可比性。本項(xiàng)研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)評(píng)審?fù)ㄟ^(guò)，且所有患兒家屬均知情同意。

1.2方法

采用ELISA法測(cè)定血清中TRF、CRP的值。采取兩組病例靜脈血，經(jīng)1 500rpm離心5min后得到血清，4℃保存待測(cè)，以標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液將標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶，靜置15min后混勻，背比稀釋為7個(gè)濃度，取出板條，除了對(duì)照孔外每個(gè)孔加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，劑量每孔為100μL，采用封板蓋封住，室溫反應(yīng)120min，使用PBS液體洗滌3次，除了空白對(duì)照孔，每孔加入檢測(cè)液100μL，室溫孵育1h，PBS洗滌3次，每孔加入底物50μL，避光孵育25min，加入終止液5min后測(cè)定450nm處吸光度。TRF、CRP抗體均購(gòu)自南京凱基生物科技有限公司，配套試劑購(gòu)自羅氏檢測(cè)公司，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的要求進(jìn)行操作。

采用放射免疫法檢測(cè)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine transaminase，ALT)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(glutamic pyruvic transaminase，ALT)、直接膽紅素(direct bilirubin，DBIL)、總膽紅素(total bilirubin，TBIL)值。放射免疫試劑盒(LINCO，美國(guó))檢測(cè)血清ALT、AST濃度，免疫放射試劑盒(北京佳科生物技術(shù)公司)檢測(cè)血清DBIL和TBIL濃度，全自動(dòng)生化免疫檢測(cè)儀器AOHS-9001購(gòu)自日本Panasonic公司。

1.3評(píng)價(jià)指標(biāo)

觀察四組新生兒的TRF和CRP水平及肝功能指標(biāo)的差異，分析TRF、CRP水平與肝功能指標(biāo)的相關(guān)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)經(jīng)雙人錄入后，采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)或百分率表示，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。一般資料根據(jù)資料類型采用t檢驗(yàn)或卡方檢驗(yàn)。四組新生兒的TRF、CRP水平及肝功能指標(biāo)的比較采用方差分析。采用Pearson相關(guān)分析法分析TRF、CRP水平與肝功能指標(biāo)的相關(guān)性，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1各組新生兒轉(zhuǎn)鐵蛋白和C反應(yīng)蛋白水平的比較

TRF水平由高到低分別為對(duì)照組、低危組、中危組和高危組，CRP水平由高到低分別為高危組、中危組、低危組和對(duì)照組；四組的TRF和CRP水平分別比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，見(jiàn)表1。

2.2各組新生兒肝功能指標(biāo)的比較

四組新生兒的ALT、AST、DBIL和TBIL肝功能指標(biāo)由高到低均分別為高危組、中危組、低危組和對(duì)照組，四組的ALT、AST、DBIL和TBIL水平分別比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，見(jiàn)表2。

2.3轉(zhuǎn)鐵蛋白和C反應(yīng)蛋白水平與肝功能指標(biāo)的相關(guān)分析

新生兒黃疸者的TRF水平與ALT、AST呈顯著負(fù)相關(guān)(均P<0.05)；CRP水平與ALT、AST和DBIL呈顯著正相關(guān)(均P<0.05)，見(jiàn)表3。

組別TRF(μmol/L)CRP(mg/L)高危組17.58±3.1258.23±8.96中危組25.56±2.858.97±2.77低危組27.96±3.027.02±1.12對(duì)照組32.45±4.685.12±1.38F-39.26575.956P<0.001<0.001

表2 各組新生兒肝功能指標(biāo)的比較結(jié)果

表3 TRF、CRP水平與肝功能指標(biāo)的相關(guān)性結(jié)果

Table 3 Correlation between TRF and CRP levels and liver function indexes

TRFrPCRPrPALT-0.5420.021ALT0.4230.024AST-0.4310.018AST0.3820.035DBIL-0.2130.089DBIL0.3460.013TBIL-0.1740.135TBIL0.1530.124

3討論

3.1單純膽紅素對(duì)于評(píng)估新生兒黃疸病情及預(yù)后的局限性

因過(guò)多紅細(xì)胞的破壞及腸肝循環(huán)增加，使血清未結(jié)合膽紅素升高，或者由于肝細(xì)胞攝取和結(jié)合膽紅素的功能低下，使血清未結(jié)合膽紅素升高，均可促進(jìn)新生兒黃疸的發(fā)生。臨床上可表現(xiàn)為患兒鞏膜、皮膚、黏膜等部位黃染，且部分患兒可出現(xiàn)肝脾腫大，其中1.6%左右的患兒可合并膽紅素腦病或核黃疸，病死率較高[7]。臨床上對(duì)于新生兒黃疸的早期診斷及臨床預(yù)后的研究將有利于早期的臨床干預(yù)，改善預(yù)后。對(duì)于采用換血療法或靜脈輸注免疫球蛋白的患兒，其血清中結(jié)合膽紅素以及游離膽紅素均明顯下降，但部分臨床工作者發(fā)現(xiàn)即使血清膽紅素下降至正常值以下，仍然存在5%左右的患兒在治療結(jié)束14d內(nèi)發(fā)生了膽紅素腦病而死亡，提示了單純采用膽紅素指標(biāo)評(píng)估患兒臨床預(yù)后的局限性[8-9]。

3.2血清轉(zhuǎn)鐵蛋白參與到膽紅素的異常代謝

TRF主要由肝細(xì)胞合成，半衰期為7天。血清中TRF的濃度受鐵供應(yīng)的調(diào)節(jié)，在缺鐵狀態(tài)時(shí)，血清TRF濃度上升，經(jīng)鐵有效治療后恢復(fù)到正常水平。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)TRF不僅可以協(xié)助缺鐵性疾病的診斷，同時(shí)在自身免疫性疾病、骨髓異常增殖性疾病及膽紅素代謝性疾病中均存在一定程度的異常表達(dá)[10-11]。TRF可以通過(guò)拮抗鐵離子的結(jié)合，進(jìn)而影響紅細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，并影響細(xì)菌感染等外源性致病因素下紅細(xì)胞的破壞，起到一定程度的保護(hù)作用；同時(shí)TRF可以通過(guò)螯合游離膽紅素進(jìn)而促進(jìn)膽紅素在腎臟的代謝，減輕血清中游離膽紅素的負(fù)擔(dān)[12-13]。本研究的創(chuàng)新性在于探討了TRF及CRP在不同嚴(yán)重程度新生兒黃疸分級(jí)中的表達(dá)差異，并初步揭示了其對(duì)評(píng)估患兒病情嚴(yán)重程度中的價(jià)值。

3.3轉(zhuǎn)鐵蛋白和C反應(yīng)蛋白對(duì)評(píng)估新生兒黃疸及臨床預(yù)后的重要價(jià)值

本研究發(fā)現(xiàn)，黃疸患兒中相關(guān)肝功能指標(biāo)如ALT、AST均明顯上升，其中高危組ALT可達(dá)62.26±9.49IU/L，而高危組AST可達(dá)58.97±11.48IU/L，提示肝細(xì)胞膜存在一定程度的損傷，肝細(xì)胞膜的損傷促進(jìn)了細(xì)胞膜內(nèi)的ALT和AST釋放入血；DBIL和TBIL可分別上升20%～30%，特別是在低危、中危、高危患兒中，DBIL和TBIL呈現(xiàn)出了明顯上升的趨勢(shì)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，DBIL和TBIL可通過(guò)誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)促進(jìn)新生兒黃疸病情的進(jìn)展。

Kumar等[14]學(xué)者分析了34例病理性黃疸患兒的臨床資料，發(fā)現(xiàn)新生兒腸炎或重癥小兒感染性腹瀉引起的黃疸，其血清中CRP明顯上升，且CRP每上升5%，患兒部分膽紅素腦病的幾率可上升0.5%。急性反應(yīng)蛋白CRP作為反應(yīng)機(jī)體炎癥損傷及感染性損傷程度的重要指標(biāo)，在革蘭陰性桿菌感染引起的新生兒黃疸中上升，在一定程度上反應(yīng)了患兒細(xì)菌擴(kuò)增入血的程度和細(xì)菌壁或莢膜等致病成分引起的體內(nèi)免疫功能及炎癥損傷水平。

本次研究中不同危險(xiǎn)級(jí)別黃疸組血清中CRP明顯高于對(duì)照組和正常對(duì)照人群，患兒的CRP可達(dá)58.23±8.96mg/L，上升幅度較為明顯，同時(shí)相關(guān)關(guān)系分析也可見(jiàn)，CRP與ALT、AST和DBIL呈顯著正相關(guān)，提示患兒的病情越重，血清CRP水平越高，CRP對(duì)反應(yīng)患兒黃疸病情程度的靈敏度較高，臨床應(yīng)用價(jià)值較為顯著；與CRP的表達(dá)相反，血清TRF的表達(dá)明顯下降，高危組患兒的TRF不足20μmol/L，TRF可以通過(guò)影響葡萄糖苷轉(zhuǎn)移酶的活性，進(jìn)而影響紅細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，抑制脾臟功能亢進(jìn)及感染等因素導(dǎo)致的紅細(xì)胞過(guò)度破壞和膽紅素釋放，高膽紅素導(dǎo)致TRF的消耗增加，降低了TRF對(duì)組織損傷的保護(hù)作用。但需要注意的是，本研究中高危組患兒的血清TRF仍然大于15μmol/L，高于Kumar等的研究結(jié)論，考慮Kumar等主要納入的是感染性因素導(dǎo)致的黃疸，TRF的下降幅度更高，血清學(xué)檢測(cè)值更低。相關(guān)分析也可見(jiàn)[15]，新生兒黃疸者的TRF水平與ALT、AST明顯負(fù)相關(guān)，隨著黃疸病情的加重，TRF值可進(jìn)一步下降，提示TRF可以作為臨床上反應(yīng)新生兒黃疸病情程度的客觀指標(biāo)，特別是在感染性因素導(dǎo)致的新生兒黃疸中，TRF的評(píng)估或者預(yù)后價(jià)值更為明顯。

3.4總結(jié)與展望

TRF在新生兒黃疸患者中較低，而CRP水平較高，TRF和CRP與新生兒黃疸患兒的肝功能損傷指標(biāo)密切相關(guān)。但本次研究的局限性在于未能充分探討TRF與黃疸患兒并發(fā)癥的關(guān)系，后續(xù)研究可以增加樣本量、延長(zhǎng)隨訪時(shí)間，進(jìn)而評(píng)估TRF的臨床應(yīng)用價(jià)值。

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[專業(yè)責(zé)任編輯：周熙惠]

ClinicalsignificanceofTRF,CRPandliverfunctionindexchangesinpatientswithneonataljaundice

FENGYi-li,JINPei-jiao

(DepartmentofPediatrics,LinhaiSecondPeople'sHospital,ZhejiangLinhai317000,China)

Objective To observe the changes of serum transferrin (TRF) and C reaction protein (CRP) levels in neonates with neonatal jaundice and analyze their clinical significance. Methods Neonates with neonatal jaundice treated in Linhai Second People’s Hospital from March 2012 to June 2015 were selected as study objects, and divided into high risk group (48 cases), medium risk group (60) and low risk group (78 cases) according to degree of jaundice..At the same time, 50 healthy neonates were selected as control group. Differences in TRF, CRP and liver function indexes were observed among four groups, and correlation between TRF, CRP levels and liver function indexes was analyzed. Results Levels of TRF and CRP were significantly different among four groups (Fvalue was -39.265 and 75.956, respectively, bothP<0.05). Levels of ALT, AST, DBIL and TBIL were significantly different among four groups (Fvalue was 22.356, 28.932, 18.253 and 25.266, respectively, allP<0.05). TRF levels of neonatal jaundice patients were negatively correlated with ALT and AST (rvalue was -0.542 and -0.431, respectively, bothP<0.05), and CRP levels were positively correlated with ALT, AST and DBIL (rvalue was 0.423, 0.382 and 0.346, respectively, allP<0.05). Conclusion TRF level in patients with neonatal jaundice is low but CRP level is high, which can be used as clinical observation indexes.

jaundice; transferrin (TRF); liver function; cytokine; correlation analysis

2016-05-23

馮伊利(1974-)，女，副主任醫(yī)師，主要從事新生兒黃疸及輪狀病毒性腸炎的臨床診治工作。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.07.021

R

A

1673-5293(2017)07-0817-03