邢麗菲 王敏 檀素娟 王艷紅
【摘要】目的 本次實驗課題主要探討載脂蛋白E基因多態(tài)性與血管性癡呆和Alzheimer病的關(guān)系。
方法 選取2013年2月~2018年2月我院住院以及門診收治的血管性癡呆患者80例(VD組)與Alzheimer病患者75例(AD組)作為研究對象,另選取健康人群120例作為正常組,均采用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性方法進行檢測,對比三組等位基因頻率和載脂蛋白E基因型。結(jié)果 AD組載脂蛋白Eε4等位基因頻率、ε3/ε4基因型頻率分別為17.8%、24%,VD組為 20.6%、26.25%,正常組為5.8%、10.83%,AD組、VD組載脂蛋白Eε3/ε4基因型、ε4等位基因頻率明顯高于正常組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論 載脂蛋白Eε4等位基因是Alzheimer病和血管性癡呆疾病的危險因素。
【關(guān)鍵詞】載脂蛋白E基因多態(tài)性;Alzheimer?。谎苄园V呆
【中圖分類號】R749.13 【文獻標識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2018.22..02
在老年期癡呆疾病中,發(fā)病率最高的是血管性癡呆疾病和Alzheimer病,載脂蛋白E基因是散發(fā)性、遲發(fā)性Alzheimer病最主要的遺傳易感因素,也是作為影響人體老化的重要因素,還是腦血管疾病、動脈粥樣硬化的易患病因素,還與人體認知功能存在緊密的相關(guān)性,本文主要對Alzheimer病、血管性癡呆疾病的載脂蛋白E基因多態(tài)性進行分析和
檢測,并與健康人群進行對比,從而探討兩者之間的關(guān)系。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取2013年2月~2018年2月我院住院以及門診收治的血管性癡呆患者80例(VD組)與Alzheimer病患者75例(AD組)作為研究對象,均符合語言機能障礙、美國神經(jīng)病學、AD以及VD疾病的臨床診斷標準,另選取健康人群120例作為正常組。其中,VD組女32例,男48例,年齡58~84歲,平均年齡(72.4±1.41)歲,病程1.4~6.5年,平均病程(4.29±1.25)年,排除缺血缺氧性腦病史、遺傳性血管病者,所有患者均合并動脈粥樣硬化性腦血管疾病;AD組男42例,女33例,年齡64~80歲,平均年齡(73.5±4.96)歲,病程2.2~8.3年,平均病程(4.96±1.42)年;正常組女69例,男51例,年齡61~85歲,平均年齡(71.6±8.22)歲,排除糖尿病、腦血管病、認知功能障礙者。三組患者一般資料比較,差異無統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
1.2 方法
①提取DNA:取全部參研樣本5 mL靜脈血,抗凝處理后,提取血液中外周血白細胞基因組DNA[1];②載脂蛋白E基因多態(tài)性檢測:應用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性方法進行檢測,采用ABIPE公司生產(chǎn)的9700型PCR儀器,在25 μL PCR反應體系中主要包含了25 μL 10×PCR反應緩沖液,0.5 μL DMSO,0.5 μL下游引物和上游引物(50 μmol/L),0.5~1 μg DNA模板,25 μL MgCl2
(25 mmol/L),Phamacia公司生產(chǎn)的1.5 μL dNTPs
(2 mmol/L),欣經(jīng)科生物技術(shù)公司生產(chǎn)的1UTaq DNA聚合酶。載脂蛋白E基因進行酶解、PCR擴增以及電泳檢測(使用北京六一儀器廠生產(chǎn)的垂直電泳儀,配合Bio-Rad公司生產(chǎn)的凝膠成像系統(tǒng)進行檢測),根據(jù)載脂蛋白E基因擴增的產(chǎn)物進行多態(tài)分析[2]。
1.3 統(tǒng)計學方法
采用SPSS 23.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行處理,計量資料以“x±s”表示,采用t檢驗;計數(shù)資料以百分數(shù)(%)表示,采用x2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
2 結(jié) 果
2.1 載脂蛋白E基因頻率
AD組、VD組攜帶ε4基因型的頻率高于正常組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),但VD組和AD組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表1。
2.2 載脂蛋白E等位基因頻率
VD組ε2、ε3、ε4等位基因頻率分別為5.1%、74.2%、20.6%,AD組ε2、ε3、ε4等位基因頻率依次為6.2%、76.1%、17.8%,正常組依次為10.4%、84.2%、5.8%,正常組ε4等位基因頻率低于VD組、AD組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),AD組與VD組ε4等位基因頻率比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
2 討 論
散發(fā)性或家族性Alzheimer病中一個至關(guān)重要的危險因素是載脂蛋白Eε4等位基因,β淀粉樣蛋白能夠與載脂蛋白E進行結(jié)合,呈現(xiàn)出特異性,且ε4的特異性小于ε3、ε2的特異性[3]。人體神經(jīng)元在攝取載脂蛋白E受體的同時,還將攝入Aβ,從而減少了細胞的外毒性。從超微結(jié)構(gòu)以及細胞免疫研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),軸突中載脂蛋白Eε4和神經(jīng)元細胞體能夠抑制軸突生長,引起微管解聚,細胞微管蛋白在經(jīng)過載脂蛋白Eε4處理后會變少[4]。載脂蛋白Eε4能夠阻止重建正常神經(jīng)元,同時還能夠加快聚集成神經(jīng)原纖維纏結(jié)的速度和雙螺旋絲的形成,同樣的載脂蛋白E與膽堿能神經(jīng)元損害和腦淀粉樣血管病變的關(guān)系較為密切。非癡呆性認知功能障礙會受到載脂蛋白Eε4的影響,同樣載脂蛋白Eε4也是認知功能障礙的重要危險因素[5]。
綜上,載脂蛋白E基因多態(tài)性可能是血管性疾病以及腦病變疾病中的相關(guān)因素之一,與癡呆疾病的關(guān)系需要更多的研究進行證實。
參考文獻
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本文編輯:劉欣悅