李 澤 楊 柳 高云霄 胡婧楠 張 彤 王小天 李博林△

(1.河北中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院脾胃三科,河北 石家莊 050011;2.河北省濁毒證重點實驗室,河北 石家莊 050011;3.河北省脾腎病證中醫(yī)治療技術(shù)創(chuàng)新中心,河北 石家莊 050011;4.河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院呼吸內(nèi)科,河北 石家莊 050011;5.河北中醫(yī)學(xué)院2022級博士研究生,河北 石家莊 050090)

慢性萎縮性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)是指胃黏膜上皮遭受反復(fù)損害而導(dǎo)致固有腺體減少,伴或不伴腸腺化生和(或)假幽門腺化生的一種慢性胃部疾病,被公認為屬于胃癌前病變[1]。CAG屬于中醫(yī)學(xué)“胃痛”“痞滿”范疇,中醫(yī)藥在CAG的治療中發(fā)揮了重要的作用。國醫(yī)大師李佃貴教授的濁毒理論認為,濁毒貫穿于CAG發(fā)生發(fā)展的始終,并提出運用化濁解毒法治療CAG,取得了很好的臨床療效[2-3],但化濁解毒法治療CAG的具體機制以及涉及的具體蛋白靶點與通路尚不清楚。前期通過對化濁解毒法治療CAG處方進行數(shù)據(jù)挖掘表明,“黃連-茵陳”是化濁解毒法治療CAG應(yīng)用頻次最高的藥對,也是處方中藥物組合關(guān)聯(lián)規(guī)則置信度最高的藥對,最能代表化濁解毒法的核心治則[4]。黃連有清熱瀉火、解毒燥濕之能,茵陳能清利肝膽脾胃濕熱,除濕滯濁停,散熱結(jié)毒聚,兩者相須為伍,一偏于利濕化濁,兼能散熱結(jié),一偏于清熱解毒,兼可燥濕濁,實為化濁解毒之經(jīng)典藥對。相關(guān)研究表明,黃連中的活性成分能夠有效抑制炎性反應(yīng),抑制相關(guān)蛋白酶活性,調(diào)節(jié)自噬,以保護胃腸黏膜[5-6];茵陳中茵陳色原酮等成分則能夠抑制脂多糖誘導(dǎo)的炎癥基因活化,從而發(fā)揮抗炎作用,還可以直接殺傷腫瘤細胞,抑制腫瘤細胞增殖,并促進細胞凋亡[7-8]。本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接的方法,分析化濁解毒法代表藥對“黃連-茵陳”治療CAG的作用靶點及可能分子機制,以期探索化濁解毒法治療CAG的具體機制以及涉及的靶點與通路,并為化濁解毒法治療CAG的臨床應(yīng)用提供合理的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 “黃連-茵陳”藥對有效活性化合物收集及相應(yīng)靶點預(yù)測 通過中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(TCMSP)(http://tcmspw.com/tcmsp.php)分別以“黃連”“茵陳”為關(guān)鍵詞,以口服生物利用度(OB)≥30%及類藥性(DL)≥0.18為篩選標準,對藥物有效活性化合物進行篩選。再根據(jù)有效活性化合物,運用DrugBank數(shù)據(jù)庫(https://go.drugbank.com)獲取有效活性化合物對應(yīng)靶點信息,通過UniProt數(shù)據(jù)庫(https://www.uniprot.org),將物種設(shè)置為“Homo sapiens”,搜索各個靶點對應(yīng)的基因簡稱并進行轉(zhuǎn)化。

1.1.2 CAG疾病相應(yīng)靶點預(yù)測 通過GeneCards數(shù)據(jù)庫(https://www.genecards.org)、CTD數(shù)據(jù)庫(http://ctdbase.org)、TTD數(shù)據(jù)庫(http://db.idrblab.net/ttd/)及OMIM數(shù)據(jù)庫(https://omim.org)對CAG疾病靶點進行檢索,以“chronic atrophic gastritis”為關(guān)鍵詞,檢索完畢后對檢索疾病靶點進行整合。

1.2 研究方法

1.2.1 獲取“黃連-茵陳”藥對化合物與CAG疾病的交集靶點 通過Venn 2.1.0 網(wǎng)頁軟件對“黃連-茵陳”藥對化合物靶點與CAG疾病靶點進行分析對比,獲取其交集靶點并以韋恩圖形式呈現(xiàn)。

1.2.2 構(gòu)建“藥物-化合物-靶點-疾病”全局網(wǎng)絡(luò)圖 將藥物及其對應(yīng)化合物,化合物與疾病交集靶點導(dǎo)入Cytoscape 3.6.1,建立“藥物-化合物-靶點-疾病”全局網(wǎng)絡(luò)并進行可視化,網(wǎng)絡(luò)中Degree值較高的為核心有效成分。

1.2.3 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及可視化 將得到的交集靶點上傳到STRING 11.0數(shù)據(jù)庫(https://www.string-db.org),得到蛋白互作信息,并將其導(dǎo)入到Cytoscape 3.6.1軟件進行可視化分析,并根據(jù)Degree值獲取PPI網(wǎng)絡(luò)中的核心靶點。

1.2.4 基因本體(GO)功能富集分析和京都基因與基因組百科全書(KEGG)通路富集分析 將得到的交集靶點導(dǎo)入到DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫(https://david.ncifcrf.gov),對交集靶點進行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,獲得“黃連-茵陳”治療CAG所涉及的分子功能(MF)、細胞組分(CC)、生物過程(BP)和信號通路,最后運用R語言軟件和GraphPad軟件進行可視化。

1.3 核心有效成分與核心靶點的分子對接 將篩選的核心有效成分與PPI網(wǎng)絡(luò)中的核心靶點進行分子對接驗證。從結(jié)構(gòu)生物信息學(xué)研究合作組織(RSCB)PDB數(shù)據(jù)庫(https://www.rcsb.org)中下載關(guān)鍵靶蛋白的3D結(jié)構(gòu),并通過Pymol、AutoDock Tools 1.5.6軟件進行去水、去配體和加氫、加電荷的處理。從TCMSP數(shù)據(jù)庫中下載核心格式為Mol的化合物文件,輸出為pdbqt格式。運用AutoDock Tools 1.5.6 軟件進行分子對接以獲取其結(jié)合能,通過Pymol軟件對對接結(jié)果進行可視化。

2 結(jié)果

2.1 “黃連-茵陳”藥對活性化合物及相應(yīng)靶點篩選結(jié)果 通過TCMSP數(shù)據(jù)庫,以O(shè)B≥30%及DL≥0.18為篩選標準,篩選出黃連活性化合物14個、茵陳13個,去除1個重復(fù)化合物后,得到“黃連-茵陳”藥對26個活性化合物。通過DrugBank數(shù)據(jù)庫獲取有效活性化合物對應(yīng)靶點信息412個,運用UniProt數(shù)據(jù)庫對靶點進行去重并刪除其中非人類靶點,得到86個靶點?！包S連-茵陳”藥對活性化合物信息。見表1。

表1 “黃連-茵陳” 藥對活性化合物信息

2.2 CAG疾病靶點及“黃連-茵陳”藥對活性化合物與CAG疾病交集靶點篩選 根據(jù)GeneCards、CTD、TTD、OMIM數(shù)據(jù)庫檢索CAG靶點,去重后共有639個。將CAG疾病靶點與“黃連-茵陳”藥對活性化合物靶點進行對比,共得到38個交集靶點。見圖1。

圖1 “黃連-茵陳”藥對活性化合物靶點與CAG靶點韋恩圖

2.3 “藥物-化合物-靶點-疾病”全局網(wǎng)絡(luò)圖 應(yīng)用Cytoscape 3.6.1軟件將“黃連-茵陳”藥對活性化合物與CAG的交集靶點進行“藥物-化合物-靶點-疾病”全局網(wǎng)絡(luò)圖可視化,并得到Degree值排名前5的“黃連-茵陳”有效活性化合物為槲皮素、異鼠李素、β-谷甾醇、四氫小檗堿、小檗浸堿,為核心有效成分。見圖2。

注:綠色為茵陳所屬化合物,黃色為黃連所屬化合物,紫色為黃連-茵陳共有化合物,紅色為化合物與疾病交集靶點,藍色為非交集靶點

2.4 PPI網(wǎng)絡(luò)分析 將“黃連-茵陳”藥對活性化合物與CAG的38個交集靶點上傳到STRING 11.0數(shù)據(jù)庫中進行PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建,選擇“Homo sapiens”,設(shè)置high confident為0.700,得到精簡PPI網(wǎng)絡(luò)信息共有37個節(jié)點(刪除1個游離靶點),178個邊,其中靶點為蛋白,邊為蛋白之間作用關(guān)系,平均Degree值為9.37,高于平均Degree值的靶點蛋白有16個,包括白細胞介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子(TNF)、Ju-Nana原癌基因(JUN)、IL-1β、絲裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)等。見圖3、表2。

注:節(jié)點顏色越黃說明其Drgree值越大,顏色越藍其Drgree值越小;節(jié)點之間連線越粗聯(lián)系越緊密,越細聯(lián)系越少

表2 PPI網(wǎng)絡(luò)圖中大于平均Degree值的靶點蛋白信息

2.5 GO功能富集分析與KEGG通路富集分析 對“黃連-茵陳”藥對活性化合物與CAG的38個交集靶點分別進行GO功能富集分析與KEGG通路富集分析。通過GO功能富集分析,得到BP 98個,包括基因表達的正調(diào)控、細胞對脂多糖的反應(yīng)、基因表達負調(diào)控、細胞增殖的正調(diào)控、脂多糖介導(dǎo)的信號通路等;CC 21個,包括細胞外空間、胞外區(qū)、細胞表面、線粒體、分泌顆粒等;MF 18個,包括酶結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、細胞因子活性、過氧化物酶活性等。通過KEGG通路富集分析,得到“黃連-茵陳”治療CAG的通路54條,包括癌癥信號通路、TNF信號通路、MAPK信號通路、NF-κB信號通路、EGFR通路等。并進一步繪制了相關(guān)性較大的癌癥信號通路圖。見圖4、5、6。

圖4 交集靶點蛋白GO功能富集分析柱狀圖

圖5 交集靶點蛋白KEGG通路富集分析氣泡圖

注:紅色靶點為富集分析癌癥信號通路所涉及基因

2.6 分子對接結(jié)果 根據(jù)“藥物-化合物-靶點-疾病”全局網(wǎng)絡(luò)中Degree值選擇前5個“黃連-茵陳”有效活性化合物,包括槲皮素(MOL000098)、異鼠李素(MOL000354)、β-谷甾醇(MOL000358)、四氫小檗堿(MOL002903)、小檗浸堿(MOL002904);根據(jù)PPI網(wǎng)絡(luò)中Degree值選擇前5個核心靶蛋白,包括IL-6、TNF、JUN、IL-1β、MAPK1。將化合物活性成分與核心靶點蛋白進行分子對接以計算其結(jié)合能,化合物與靶蛋白結(jié)合能越低,其結(jié)合越穩(wěn)定,越可能相互作用,且結(jié)合能量<0代表兩者結(jié)合有活性,結(jié)合能小于-5 kJ/mol代表結(jié)合能活性較高,并對結(jié)合能活性較強的2組化合物和蛋白分子對接模式可視化。見圖7、8、9。

圖7 化合物活性成分與核心靶點蛋白分子對接結(jié)合能柱狀圖

圖8 小檗浸堿與TNF對接結(jié)果

圖9 β-谷甾醇與TNF對接結(jié)果

3 討論

我國是胃癌的高發(fā)國家,其發(fā)病率和死亡率均位居前列,且其癥狀和疾病進展程度不完全相符,胃癌早期患者并無特殊癥狀,因此CAG作為胃癌前病變一直都是臨床關(guān)注的重點?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認為,幽門螺桿菌(Hp)是CAG發(fā)生的主要病因之一,Hp的致病因素包括脲酶、鞭毛、空泡毒素A(VacA)、細胞毒素相關(guān)基因抗原(CagA)等,其中VacA和CagA起著關(guān)鍵作用,感染VacA陽性菌株可導(dǎo)致細胞空泡化和凋亡,而感染CagA陽性菌株則可導(dǎo)致嚴重的胃炎和胃癌。CagA是一種關(guān)鍵的毒力因子,可以通過啟動細胞核因子κB(NF-κB)、MAPK及細胞質(zhì)蛋白酪氨酸磷酸酶/細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(SHP-2/ERK)途徑,以轉(zhuǎn)錄和翻譯環(huán)氧化酶2(COX-2)、細胞間黏附分子-1(ICAM-1)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、活性氧(ROS)、IL-6、IL-8、干擾素γ(INF-γ)、TNF-α等細胞因子,從而導(dǎo)致廣泛的炎性反應(yīng),促進胃的慢性炎癥、萎縮,乃至于發(fā)展為胃癌[9]。最新的胃癌發(fā)病機制學(xué)說是“炎—癌轉(zhuǎn)化機制”,該理論認為胃癌的發(fā)生發(fā)展是在胃的慢性炎癥基礎(chǔ)上伴隨化生、增生而成,同時相關(guān)隊列研究亦支持了該觀點[10-12]。因此,及時阻斷甚至逆轉(zhuǎn)CAG的發(fā)展對于防止胃癌的發(fā)生有著重要的意義?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)對CAG治療尚無針對性的有效辦法,而中醫(yī)藥在阻斷“炎—癌轉(zhuǎn)化機制”方面頗有成效,李佃貴教授提出的化濁解毒法在CAG治療中有著深遠前景[3]。本研究通過數(shù)據(jù)庫篩選及網(wǎng)絡(luò)圖構(gòu)建得到“黃連-茵陳”與CAG交集靶點38個,PPI平均Degree值較高的靶點有IL-6、TNF、JUN、IL-1β、MAPK1等,與之相對應(yīng)的有效活性化合物23個,其中關(guān)聯(lián)頻數(shù)較高的化合物為槲皮素、異鼠李素、β-谷甾醇、四氫小檗堿、小檗浸堿等。

槲皮素是黃酮類化合物,研究表明槲皮素可以抑制Hp的生長,減輕Hp感染小鼠的炎癥和胃損傷,具體機制可能通過降解NF-κB因子,防止NF-κB核轉(zhuǎn)位,抑制致炎因子如TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的基因表達,抑制炎癥介質(zhì)前列腺素、白三烯的形成,阻止組胺的釋放,從而發(fā)揮抗炎作用[13-15]。槲皮素還具有抗氧化作用,能緩解Hp感染產(chǎn)生的自由基所引起的胃黏膜細胞DNA氧化損傷[16]。

黃連中的小檗堿類成分在體內(nèi)外試驗中能有效消滅Hp,并能抑制Hp在生物表面上的黏附,還能抑制Hp中N-乙酰轉(zhuǎn)移酶活性來控制Hp的生長[17-18]。小檗堿還可抑制促炎基因IL-6、轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)、IL-1β的表達,上調(diào)黏膜和小鼠腹腔巨噬細胞中抗炎基因IL-10的表達,通過減弱B淋巴細胞活化因子觸發(fā)的輔助性T淋巴細胞17(Th17)反應(yīng),減輕Hp誘導(dǎo)的慢性胃炎,從而發(fā)揮抗炎作用[19]。此外,小檗堿還能抑制上皮細胞凋亡,抑制炎性反應(yīng),同時降低TNF-α和iNOS水平,以減輕Hp誘導(dǎo)的胃黏膜炎癥[20]。除了小檗堿類成分外,黃連中的棕櫚堿可以通過靶向調(diào)控脲酶活性位點巰基來發(fā)揮抗Hp作用,從而抑制脲酶活性和脲酶成熟,減緩Hp對胃黏膜損傷[21]。

TNF-α是一種促炎細胞因子,能促進IL-1、IL-6的產(chǎn)生,加強炎性反應(yīng),還有促進細胞分化和增殖的作用。TNF-α可以通過抑制糖原合酶激酶3β(GSK3b)來促進胃上皮細胞中的神經(jīng)緊張蛋白信號傳導(dǎo)[22]。此外,在腫瘤微環(huán)境中TNF-α/1型腫瘤壞死因子受體(TNF-α/TNFR1)信號的激活,可通過誘導(dǎo)還原型輔酶Ⅱ氧化酶組織者1(Noxo1)和鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白α14(Gna14)促進胃腫瘤的發(fā)展,這有助于維持腫瘤細胞處于未分化狀態(tài)[23]。

IL-6最初作為B淋巴細胞刺激因子,既能誘導(dǎo)單純CD4+T淋巴細胞分化為Th17細胞,又可抑制調(diào)節(jié)性T淋巴細胞(Treg)發(fā)育,從而促進胃黏膜炎癥的發(fā)展。Hp感染的早期胃癌,IL-6水平也高于無Hp感染,根除Hp后IL-6水平顯著下降[24]。此外,Hp可誘導(dǎo)ROS的產(chǎn)生,并通過刺激IL-6上調(diào)來調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)激活,從而促進細胞生長,并刺激生長因子產(chǎn)生,促進細胞增殖、遷移和致癌轉(zhuǎn)化[25]。

IL-1β基因的多態(tài)性和IL-1β產(chǎn)生的增加與Hp感染相關(guān)胃癌的風(fēng)險有關(guān),Hp感染與IL-1β基因多態(tài)性協(xié)同作用,不僅參與胃癌前病變,還可以通過下調(diào)氫-鉀-ATP酶(H+-K+-ATP)和抑制胃泌素的表達,抑制胃酸分泌來促進胃癌的發(fā)生[26]。同時,IL-1β還通過激活NF-κB增加癌細胞的侵襲,從而增強基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)表達[27]。有研究發(fā)現(xiàn),IL-1β通過MAPK和ROS刺激IL-8的表達,參與胃癌的血管重建[28]。

MAPK1又稱細胞外信號調(diào)節(jié)激酶,是MAPK家族的一個成員,主要負責(zé)生長因子受體的信號傳導(dǎo)。MAPK通路參與了胃癌和正常上皮細胞的細胞運動調(diào)節(jié),調(diào)節(jié)胃癌中MMP的活性,從而影響細胞遷移和侵襲[29]。此外,磷酸化的MAPK1可激活NF-κB從胞漿轉(zhuǎn)運到細胞核,進一步激活I(lǐng)L-8基因表達,IL-8常被認為是CAG的診斷標記物[30]。MAPK1還可以調(diào)節(jié)胃上皮細胞的周期進展、增殖,MAPK1活性的抑制則會導(dǎo)致細胞周期G0/G1階段阻滯[31]。

MAPK14又稱p38,參與細胞生長、分化、細胞周期進展和細胞凋亡,以及炎癥過程。研究表明,MAPK14信號參與調(diào)節(jié)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)和EMT觸發(fā)的ROS的產(chǎn)生[32]。MAPK14還可誘導(dǎo)p60和p55亞基的表達,形成NF-κB二聚體,激活NF-κB通路[33]。

EGFR屬于受體酪氨酸激酶群,EGFR信號通路通常在細胞增殖、分化和生長中發(fā)揮重要作用。Hp感染與表皮細胞生長因子(EGF)激活和EGFR表達上調(diào)有關(guān),可增強細胞的運動性,導(dǎo)致癌細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[34],EGFR激活后還可通過其下游靶點Akt和B淋巴細胞瘤-2(Bcl-2)家族成員,發(fā)揮抗胃上皮細胞凋亡作用[35]。Hp可激活胃上皮細胞肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)基因表達和EGFR酪氨酸磷酸化,觸發(fā)EGFR信號激活,從而促進IL-8的產(chǎn)生,并啟動胃上皮細胞的腫瘤轉(zhuǎn)化[36]。Hp菌株還可通過HB-EGF、EGF受體誘導(dǎo)激活胃泌素啟動子[37],Hp刺激后的HB-EGF、MMP-7及胃泌素協(xié)同介導(dǎo)胃癌患者EMT激活并導(dǎo)致基質(zhì)浸潤[38]。

Hp誘導(dǎo)MAPK的激活和原癌基因c-Fos、c-Jun活化,參與了胃上皮細胞的癌轉(zhuǎn)化,促進腺癌的發(fā)生[39]。腫瘤抑制因子p53控制著細胞對DNA損傷和致癌應(yīng)激的反應(yīng),Hp誘導(dǎo)的p53失調(diào)是增加感染個體胃癌風(fēng)險的潛在機制[40]。VEGFA是炎癥和腫瘤相關(guān)血管生成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,Hp可以激活VEGFA基因表達,其主要是通過MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)及NF-κB等多種信號途徑調(diào)控[41]。

通過分析“黃連-茵陳”藥對治療CAG的KEGG通路富集分析得到相關(guān)通路54條,涉及癌癥信號通路、TNF信號通路、MAPK信號通路、NF-κB信號通路EGFR信號通路等。MAPK通路主要介導(dǎo)宿主細胞基因轉(zhuǎn)錄、有絲分裂、運動、黏附、代謝及細胞凋亡。Hp感染和MAPK激活的聯(lián)合作用很可能會導(dǎo)致胃上皮細胞細胞周期進展、增殖及凋亡的改變[29]。NF-κB是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子,通過調(diào)節(jié)致炎細胞因子和趨化因子基因的表達,參與多種免疫或炎性反應(yīng)的激活,Hp已被證明可以激活胃癌細胞中NF-κB,并使炎細胞因子的表達增加[9]。TNF家族是一類多功能促炎細胞因子,可激活與細胞存活、凋亡、分化炎性反應(yīng)相關(guān)的信號通路。EGFR信號通路通常在細胞增殖、分化和生長中發(fā)揮重要作用[34]。Hp感染與EGF的激活和EGFR表達的上調(diào)有關(guān),增強了細胞的運動性以及導(dǎo)致了癌癥的侵襲和轉(zhuǎn)移[34]。

化濁解毒法是國醫(yī)大師李佃貴教授依據(jù)客觀的理論基礎(chǔ)和長期的臨床實踐,提出治療CAG的辨治觀點,其認為因徒清熱解毒則濕濁不去,徒化濁利濕則熱毒不除,而化濁解毒法的運用可使毒除濁化,可達氣行血暢,積除郁解,痰消火散,恢復(fù)脾升胃降之生理功能,脾氣上升,胃之津液得下,胃氣和降,胃得陰血濡養(yǎng),萎縮的腺體可緩慢恢復(fù)正常[42-43]。本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與分子對接技術(shù)對“黃連-茵陳”藥對抗CAG的活性成分、潛在靶點和作用機制進行了初步預(yù)測。從26種化合物中篩選得與CAG的交集靶點38個,這些靶點可能通過抗炎、抗氧化、正向調(diào)控細胞凋亡、負向調(diào)控血管內(nèi)皮增生、保護細胞外基質(zhì)等方面實現(xiàn)治療作用。本研究還挖掘了54條“黃連-茵陳”藥對防治CAG的潛在信號通路,涉及炎癥/感染、表觀遺傳、細胞分化和生長周期等。本研究證明了 “黃連-茵陳”藥對治療CAG的機制涉及多靶點、多通路和多途徑,而且靶點和信號通路之間互有調(diào)控、交叉、協(xié)同,形成一個復(fù)雜的信號網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng),也對“黃連-茵陳”藥對治療CAG的具體分子信號通路進行了初步揭示,為下一步的實驗研究、藥物研發(fā)提供了理論基礎(chǔ)。鑒于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接技術(shù)還沒有完善,后期仍需具備相應(yīng)科研能力的團隊開展動物實驗驗證所得的結(jié)果。