王愛華 李增新

目前種植蔬菜水果所使用的農(nóng)藥中，大約70%為有機(jī)磷農(nóng)藥。蔬菜水果農(nóng)藥殘留超標(biāo)，會直接危及人體健康。目前應(yīng)用最為廣泛的是殘留農(nóng)藥化學(xué)及生化檢測方法,這些快速檢測法適用于田間普查、農(nóng)貿(mào)市場抽查，就連普通消費者也能夠操作使用。在此介紹幾例，供化學(xué)教師參考。

一、化學(xué)速測法（速測靈法）

化學(xué)速測法是根據(jù)有機(jī)磷農(nóng)藥的氧化還原特性進(jìn)行檢測的方法。有機(jī)磷農(nóng)藥比如磷酸酯、 二硫代酸酯、 磷酸胺在金屬催化劑作用下水解為磷酸及醇等，水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，使顯色劑的紫紅色褪去變成無色［1］。其檢測步驟為：取農(nóng)藥溶液3~4mL，與紫紅色顯色劑液體二滴混勻。再加入黃色催化劑液體四滴靜置5~10min，如果液體褪色則表示農(nóng)藥殘留超標(biāo)。該方法的優(yōu)點在于它是化學(xué)反應(yīng)，相對生化方法穩(wěn)定，操作簡便無需培訓(xùn)，一次可做多個樣品，檢測所需時間短。該方法的缺點是在臨界點附近顏色變化不很明顯，主要針對幾種有機(jī)磷農(nóng)藥敏感。易受一些還原性物質(zhì)的干擾。

二、酶化學(xué)比色分析法

在特定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下，酶催化乙酰膽堿水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出果蔬樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。

其檢測步驟為：選取果蔬樣品，沖洗掉表面泥土，剪成1cm左右碎片，取樣品1g，放入燒杯中，加入5mL緩沖溶液，振蕩1~2min，倒出提取液，靜置3~5min，待用。先于試管中加入2.5mL緩沖溶液，再加入0.lmL酶液、0.1mL顯色劑，搖勻后于37° C放置15min以上，注意掌握每批樣品的控制時間要一致。加入0.lmL底物搖勻，放入儀器比色池中，記錄反應(yīng)3 min的吸光度變化值DA0。再于試管中加入2.5mL樣品提取液，其它操作與對照溶液測試相同，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值。根據(jù)吸光度的變化值計算出蔬菜樣品提取液對酶的抑制率，若抑制率超過50%時，表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，樣品呈陽性結(jié)果［1］。不同公司研制的儀器大同小異，只是有的用乙酰膽堿酯酶，有的用丁酰膽堿酯酶，在酶和底物應(yīng)用方面存在差異，從而判定抑制率也存在差異。

三、植物水解酶法

由于乙酰膽堿酯酶大都來源于動物血液，材料昂貴，且保存困難，近年來人們又開發(fā)了用植物水解酶替代乙酰膽堿酯酶的分析方法。植物水解酶能促使 2，6—二氯乙酰靛酚水解， 反應(yīng)如下［2］：

另有植物水解酶催化α-乙酸萘酯水解生成α-萘酚，α-萘酚與三氯化鐵溶液發(fā)生顯色反應(yīng)生成紫色配合物，該配合物最大吸光度位于516nm波長處。而此顯色反應(yīng)會因為有機(jī)膦農(nóng)藥的存在而受到抑制，有機(jī)膦農(nóng)藥的質(zhì)量濃度越大，果蔬樣品吸光度的下降程度也就越大，根據(jù)這個關(guān)系建立了植物水解酶催化-分光光度法快速測定痕量有機(jī)膦農(nóng)藥的方法。

四、免疫分析法

免疫分析法的原理主要基于抗原抗體特異性識別和結(jié)合反應(yīng)的分析方法。將農(nóng)藥和藥物小分子通過一定碳鏈長度的聯(lián)接分子與分子量大的載體一般為蛋白質(zhì)，以共價鍵相偶聯(lián)制備成人工抗原，注射到動物體內(nèi)產(chǎn)生多克隆抗體或采用細(xì)胞融合技術(shù)產(chǎn)生單克隆抗體，然后采用抗原或抗體酶標(biāo)記技術(shù)，根據(jù)酶反應(yīng)顯色的深淺對果蔬樣品進(jìn)行定性或定量檢測。例如測定三唑酮的方法，應(yīng)用于黃瓜、梨等食品的檢測，檢測限達(dá)40μg/kg。目前常用于農(nóng)藥殘留檢測的免疫分析法主要包括酶免疫技術(shù)、放射免疫技術(shù)、熒光免疫技術(shù)和化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)等，其中酶免疫技術(shù)最為常用。［3］

果蔬農(nóng)藥殘留的去除也會涉及許多化學(xué)知識，例如堿水浸泡法是利用堿性條件促進(jìn)殘留有機(jī)磷農(nóng)藥分解。加熱分解法是基于氨基甲酸酯類殺蟲劑在高溫下可以加快分解，對一些用其他方法不好處理的蔬菜、水果可通過高溫加熱法有效地除去農(nóng)藥殘留。貯藏轉(zhuǎn)化法是基于果蔬產(chǎn)品中農(nóng)藥的殘留隨時間的推移會逐漸分解，對比較容易保存的瓜果、蔬菜可通過一定時間的貯藏，使有毒物質(zhì)分解，減少農(nóng)藥殘留量，直至符合檢測標(biāo)準(zhǔn)。還可以利用高頻高壓放電產(chǎn)生臭氧，來達(dá)到殺菌消毒的目的。臭氧殺菌既不改變果蔬產(chǎn)品的味道，又能延長其保鮮期，適用于各種水果、蔬菜的清洗。

參考文獻(xiàn)

［1］ 趙斯奇，閻肅. 農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)［J］. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2008，36（10） ：4176 - 4178，4192

［2］ 鐘樹明，袁東星，李權(quán)龍，等. 植物水解酶法快速測定環(huán)境水樣中有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥［J］.廈門大學(xué)學(xué)報（ 自然科學(xué)版），2002，41（1）：75-78

［3］ 劉菁，邵華. 農(nóng)藥檢測方法研究進(jìn)展［J］. 中國公共衛(wèi)生，2009，25（11）：1399-1402