魁學(xué)剛 馬孝龍 喇鳳英
何首烏與白首烏的鑒別實驗研究
魁學(xué)剛馬孝龍喇鳳英
何首烏和白首烏均為常用的抗衰老滋補(bǔ)強(qiáng)壯類中藥。由于功效、名稱相近,藥材市場上經(jīng)常會發(fā)生相互混淆的現(xiàn)象。為確保用藥的安全有效,需要對其進(jìn)行鑒別研究。本實驗就對藥材市場上收集的何首烏和白首烏樣品,建立性狀、顯微以及理化的鑒別方法。
何首烏;白首烏;鑒別;來源;性狀
何首烏始載于《開寶本草》,謂“何首烏……根大如拳,有赤、白兩種”??梢姾问诪跤谐?、白兩種。白首烏與何首烏為不同科屬來源的兩種植物性藥材,其功效、應(yīng)用也不盡相同。本研究對何首烏和白首烏的來源、藥材性狀、顯微特征及理化性質(zhì)進(jìn)行了比較鑒別?,F(xiàn)報告如下:
1.1實驗材料在中藥材專家的指導(dǎo)下從臨夏州中藥材商會處獲得何首烏(Polygonum multiflonum Thunb)與白首烏(Cynanchum auriculatum Royle ex Wight)[1]的干燥塊根各2塊,共計2630g。
1.2性狀鑒別觀察二者的形、色、表面、質(zhì)地、斷面、味道等性狀,并記錄結(jié)果。
1.3顯微鑒別選取藥材適當(dāng)部位,經(jīng)軟化后切成10~20μm的薄片,甘油醋酸試液(北京華科盛精細(xì)化工產(chǎn)品貿(mào)易有限公司)處理后在顯微鏡(CX31,奧林巴斯)下觀察。
1.4理化試驗各取兩種藥材500g,分別用RT-02高速粉碎機(jī)粉碎,過四號篩,備理化檢驗用。微量升華:取金屬片,置具圓孔(直徑2cm)的石棉板上,金屬片上放一小金屬圈(高度約0.8cm),對準(zhǔn)石棉板上的圓孔,圈內(nèi)加入藥材粉末一薄層,圈上放一載玻片。在石棉板下圓孔下用酒精燈徐徐加熱(火焰距板約4cm)數(shù)分鐘,至粉末開始變焦,去火待冷,則有結(jié)晶狀升華物附著玻片。將玻片取下反轉(zhuǎn),在顯微鏡下觀察結(jié)晶形狀。Borntrager反應(yīng)(蒽醌類化合物反應(yīng)):取藥材粉末少許,置小試管中,加水1~2ml,加濃H2SO42~3滴,置水浴中加熱10分鐘,冷卻,加乙醚1~2ml振搖。用吸管吸取醚液(黃色)于另一潔凈試管中,加入NaOH試液1ml振搖,則醚層應(yīng)褪為無色,堿層(下層)為紅色,示有蒽醌類成分存在。與金屬離子反應(yīng):取何首烏與白首烏粉末0.5g,加乙醇2ml冷浸1h,取濾液2滴滴在濾紙上,加三氯化銻氯仿飽和液1滴,干后紫外燈下365nm處觀察。薄層分析(TLC):①供試液制備:取何首烏、白首烏各約2g置于試管,分別加甲醇20ml,冷浸過夜,濾過,濾液置水浴上蒸干,殘渣加5%氫氧化鈉溶液5 ml使溶解,移入分液漏斗中,加鹽酸酸化,用醋酸乙酯10ml提取,分取醋酸乙酯層,作為供試品溶液;②對照液制備:另取大黃素甲醚,大黃素對照品,加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液,作為對照品溶液。③薄層板:硅膠G加0.5%氫氧化鈉溶液自制板;厚度300μm;④點樣:供試品溶液與對照液分別點樣5ul;⑤展開劑:甲苯一醋酸乙酯-甲酸(15:2:1)。⑥展開方式:展開箱用展開劑預(yù)平衡15分鐘;上行展開:展距:7cm。⑦顯色:置紫外光燈(365nm)下檢視:再置氨蒸氣中熏數(shù)分鐘后,日光下檢視。⑧色譜識別:供試品色譜中,存與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的橙紅色熒光斑點(下,大黃素)及橙黃色斑點(上,大黃素甲醚);氨熏后,斑點日光下變?yōu)榧t色[2]。
作者單位:731605甘肅 臨夏,永靖縣三塬鎮(zhèn)中心衛(wèi)生院藥劑科(魁學(xué)剛);731100甘肅 臨夏,臨夏州疾控中心藥劑科(馬孝龍);731100甘肅 臨夏,臨夏州藥檢中心藥劑科(喇鳳英)
2.1性狀鑒別何首烏、白首烏形色、表面、質(zhì)地、斷面、味具體差異見表1。
2.2顯微鑒別何首烏根橫切面,在顯微鏡下主要特征是韌皮部較寬,有異常維管束,中央維管束形成層呈環(huán)狀,而白首烏無此特征。
2.3理化鑒別①微量升華:何首烏得黃色柱狀或針狀結(jié)晶,遇堿液顯紅色,而白首烏無升華物。②Borntrager反應(yīng):何首烏醚層顯黃色,白首烏不顯黃色。乙醚層加氨試液后,何首烏氨液層顯紅色,白首烏不顯紅色。③與金屬離子反應(yīng):在紫外燈下365nm處觀察,何首烏呈亮紫色熒光,白首烏呈灰綠色熒光。④薄層分析:日光下,何首烏呈現(xiàn)三個斑點,從上至下顏色分別為淡黃,淡黃,藍(lán)綠;白首烏呈現(xiàn)四個斑點,從上至下顏色均為墨綠色。噴以香草醛-濃硫酸顯色試劑,加熱顯色后,何首烏呈現(xiàn)三個斑點,從上至下顏色分別為淡黃,淡黃,紅色;白首烏呈現(xiàn)五個斑點,從上至下顏色分別為淡黃,墨綠,墨綠,墨綠,淡黃。見表2。
表1 何首烏與白首烏藥材性狀鑒別比較
表2 何首烏與白首烏的理化鑒別比較
何首烏與白首烏在來源、性狀、顯微、理化等方面各有不同,所以在性能、功效方面也存在顯著差別。通過四個理化實驗,證實何首烏中含有蒽醌成分,是何首烏抗衰老、增強(qiáng)免疫力、抗菌、調(diào)血脂等藥理作用的主要有效成分之一[1,2],而白首烏不含蒽醌。通過薄層色譜分析可得:何首烏主含蒽醌衍生物,為大黃酚、大黃素,大黃酸、大黃素甲醚、大黃酚蒽酮,此外,尚含二苯乙烯苷,卵磷脂。因其含蒽醌類,所以可以遇堿蒽醌的共軛結(jié)構(gòu)會顯色,與白首烏區(qū)別。在實驗過程中我們發(fā)現(xiàn),在做薄層色譜的預(yù)試驗時,我們嘗試了各種展開劑顯色劑,均因斑點拖尾而失敗。當(dāng)展開劑為氯仿-甲醇(4∶1)顯色劑為磷鉬酸時,白首烏只展開兩個點,何首烏有四個點,但是有拖尾。當(dāng)展開劑為正丁醇-乙醇-水(6.5∶1.5∶2),顯色劑為磷鉬酸時,何首烏白首烏均沒有展開,只在原點有一個點,證明展開劑的極性還是不夠,還需加大極性。當(dāng)展開劑為氯仿-甲醇-水(7∶3∶0.5),顯色劑為香草醛時,何首烏有四個紅色斑點,其中三個連在一起,拖尾;白首烏三個斑點,兩個拖尾在一起。還需調(diào)節(jié)展開劑極性,以觀察結(jié)果。當(dāng)提取液用氯仿萃取后,氯仿-甲醇(10∶1)展開,香草醛顯色,結(jié)果為,何首烏三個點,有拖尾,白首烏兩個點,分離的很開,說明10∶1的展開劑對白首烏很合適,但可能還有些成分疊在一起,沒分開,結(jié)合何首烏的情況來看,用氯仿萃取效果并不是很好。
總之,何首烏與白首烏是分屬兩科的兩種不同植物的塊根,其在形狀與功效主治上具有很大的相似性,但在臨床應(yīng)用時應(yīng)當(dāng)區(qū)分開來,它們在疾病的治療中各具特色,何首烏無法完全取代白首烏的地位。白首烏仍具有極大的應(yīng)用價值,許多新的功效具有很大的研究潛力和非常廣闊的應(yīng)用前景[3]。
[1]Li J B,Lin M.Studies on the chemical constituents of Polygonum multiflorum Thunb[J].Chin Tradit Herb Drugs,1993,23(5):115-118.
[2]Wei P F,Jiao C L,Chen D D.The advance of the pharmacological research on Polygonum multiflorum Thunb[J].Mod Tradit Chin Med,2004,15(1):57-58.
[3]王軍強(qiáng),吳波,王軍牙.何首烏、赤首烏與白首烏的鑒別[J].長春中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2004,20(1):24-25.
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1004-2725(2016)03-0228-03
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