周在富， 王玉霞， 宋少輝， 劉俊敏， 林泉松， 陳 正

[1.重慶化工職業(yè)學(xué)院，重慶 401220；2.重慶醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，重慶 400030；3.重慶科瑞制藥(集團(tuán))有限公司，重慶 400060]

安慰劑作為一種陰性對照的“模擬”藥，臨床試驗(yàn)中要求其與試驗(yàn)藥物具有相同的外觀性狀、口感等，但又同時(shí)要求安慰劑不含有與治療作用相關(guān)的成分，以觀察試驗(yàn)藥物的藥物療效。安慰劑處方研發(fā)與制備工藝，是驗(yàn)證臨床試驗(yàn)藥物的關(guān)鍵因素。目前多數(shù)臨床試驗(yàn)安慰劑采用不加入主藥成分進(jìn)行制備，易造成安慰劑與臨床試驗(yàn)藥物在性狀、口味等方面具有明顯區(qū)別[1]，臨床試驗(yàn)患者容易區(qū)分是否為安慰劑或臨床試驗(yàn)藥物，尤其是中藥產(chǎn)品，因其固有的特性，如不對安慰劑制備方法進(jìn)行深入研究，易造成臨床試驗(yàn)的失敗。研究表明，低比例的藥物與輔料的共同使用，對于保證安慰劑與受試藥物的氣、味和物性相似性有較好改善作用[2]。

糖降腎康顆粒是從牛蒡子中富集牛蒡子總木脂素苷制成的中藥制劑。本研究通過對該顆粒制劑臨床試驗(yàn)安慰劑的處方和制備工藝研究，建立質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，并通過人工評分對安慰劑模擬效果進(jìn)行評價(jià)與統(tǒng)計(jì)分析[3-4]，證實(shí)糖降腎康顆粒安慰劑作為臨床試驗(yàn)樣品的可信性，為中藥新藥臨床試驗(yàn)中的安慰劑制備提供一種參考。

1 材料

1.1 儀器 LD510電子天平(沈陽龍騰電子有限公司)；ACS-30電子計(jì)價(jià)天平(上?；ǔ彪娖饔邢薰?；KJZ-10快速攪拌制粒機(jī)(上海信誼制藥技術(shù)裝備公司)；YK-90Ⅱ搖擺式顆粒機(jī)(柳州市第三機(jī)床廠)；GZB-5沸騰制粒干燥機(jī)(重慶南方制藥機(jī)械廠)；CS101-4熱風(fēng)循環(huán)烘箱(重慶設(shè)備廠)；JD200-3電子天平(沈陽龍騰電子有限公司)。

1.2 試劑與藥物 糖降腎康顆粒[重慶科瑞制藥(集團(tuán))有限公司，批號20150501、20150502、20150503]。DS101焦糖色(上海愛普食品工業(yè)有限公司，批號1501220)；食品級檸檬黃(上海染料研究所有限公司，批號12114076)；可溶性淀粉(湘潭縣淀粉制品有限公司，批號F1-1503036)；甜菊素(北京天安甜菊糖制品有限公司，批號201409-19)；藥用乙醇(武漢陳義泰化工有限公司，批號150311030602)。

2 方法與結(jié)果

2.1 制備方法

2.1.1 矯味劑 糖降腎康顆粒為中藥5類新藥，原處方工藝為牛蒡子提取物240 g、可溶性淀粉750 g、其他輔料(甜菊素)10 g，其處方中主藥牛蒡子提取物，具有中藥特殊的色澤、口味和氣味，因此，不能采用僅去掉主藥的方法制備，需通過對該中藥劑型、相似程度、忌糖患者的安全性、給藥途徑要求等方面考慮，來選擇恰當(dāng)?shù)某C味劑。綜合檢索相關(guān)文獻(xiàn)資料，依據(jù)臨床應(yīng)用限度，將主藥稀釋10倍或20倍作為安慰劑使用[5]，這樣保留其原有特有的口味，即選擇牛蒡子提取物用量的10%和甜菊素，苦味劑(蔗糖八乙酸酯、苦精)和甜菊素作為矯味對比使用，結(jié)果見表1。糖降腎康顆粒原治療藥物因含有特殊的氣味和藥味，用不同比例、不同種類的苦味劑均無法調(diào)整出這種味道，選擇牛蒡子提取物用量的10%加入混合使用，可有效改變糖降腎康顆粒安慰劑的味道，具體加入量隨最終確定的填充劑、矯色劑進(jìn)行微調(diào)。

表1 矯味劑篩選結(jié)果

2.1.2 填充劑 糖降腎康顆粒安慰劑填充劑的篩選在原處方已使用可溶性淀粉為主要稀釋劑的基礎(chǔ)之上，使用原處方中牛蒡子提取物用量的10%，剩余需其他輔料代替90%牛蒡子提取物，因此，綜合文獻(xiàn)檢索，針對顆粒劑的特性，選擇不同填充劑，包括可溶性淀粉、乳糖、麥芽糊精、糊精等進(jìn)行不同填充劑的處方研究，研究各輔料對糖降腎康顆粒安慰劑溶化性影響情況，結(jié)果見表2。糖降腎康顆粒治療藥物水溶液輕微渾濁，瓶底無明顯沉淀物。本研究安慰劑制劑處方填充劑選用糊精代替原處方中90%的牛蒡子提取物成分，與原治療藥物溶化性最為接近，能滿足顆粒劑溶化性的要求，也能滿足治療適應(yīng)癥忌糖患者的要求，因此，在原處方可溶性淀粉的基礎(chǔ)之上，選用糊精作為填充劑，具體加入量再根據(jù)制粒后顆粒的顏色、氣味、味道、形狀、質(zhì)感等特征方面進(jìn)行微調(diào)。

表2 填充劑篩選結(jié)果

2.1.3 色澤調(diào)配 通過溶化，觀察糖降腎康顆粒及溶化后的溶液顏色，選擇棕色和黃色的色調(diào)，分析常用的色素，選擇常用的焦糖色素、食用巧克力棕色素、檸檬黃色素作為糖降腎康顆粒安慰劑色澤的調(diào)配。用選定的處方，10%牛蒡子提取物、可溶性淀粉、糊精，再加上調(diào)色劑，單獨(dú)或聯(lián)合使用，并按糖降腎康顆粒的制備方法制備糖降腎康顆粒安慰劑，考察其顆粒顏色、做溶化性后水溶液顏色的情況，結(jié)果見表3。糖降腎康顆粒治療藥物顏色為淡黃棕色的顆粒，采用焦糖色素與檸檬黃色素混合使用(40∶1)時(shí)，所得糖降腎康顆粒安慰劑顆粒、做溶化后的水溶液顏色與原治療藥物最為接近，而其他比例的矯色劑均存在不同程度的差異性，比較接近的食用巧克力棕色素，又存在異味，并且顏色較紅。因此，選擇焦糖色素與檸檬黃色素混合使用(40∶1)作為糖降腎康顆粒安慰劑的矯色劑。

2.1.4 處方確定 針對糖降腎康顆粒的制備特點(diǎn)，通過上述矯味劑、矯色劑、填充劑的研究，擬定的處方為牛蒡子提取物用量24 g，可溶性淀粉用量750 g，糊精用量216 g，甜菊素用量10 g，焦糖色素用量5 g，檸檬黃用量0.125 g。

2.1.5 調(diào)色調(diào)味溶液配制 取純化水400 g，依次加入焦糖色素5 g、檸檬黃0.125 g、甜菊素10 g，電動攪拌溶解，得調(diào)色調(diào)味溶液。

2.1.6 制備工藝 稱取牛蒡子提取物24 g、糊精216 g，并用等量遞增法混合后，加入可溶性淀粉750 g，混合均勻，加入調(diào)色調(diào)味混合溶液，制得軟材用12目篩網(wǎng)過篩，制濕顆粒，沸騰床干燥，篩粉機(jī)整粒，包裝，得糖降腎康顆粒安慰劑。

表3 矯色劑篩選結(jié)果

2.2 效果評價(jià) 本產(chǎn)品在包裝、用法用量上與試驗(yàn)藥物一致，因本品中牛蒡子提取物具有特殊的色澤、口味和氣味，通過電子舌等檢驗(yàn)設(shè)備儀器不能正確判斷本產(chǎn)品安慰劑與臨床試驗(yàn)藥物的區(qū)別。因此，采用通用的人工打分法進(jìn)行研究[5-12]，針對糖降腎康顆粒建立明確的糖降腎康顆粒安慰劑效果評價(jià)方法。

2.2.1 人工評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 取部分糖降腎康顆粒與糖降腎康顆粒安慰劑分別分裝，并通過隨機(jī)的方法分別標(biāo)為A藥和B藥，再取一部分糖降腎康顆粒作為對照品，評判者分別對其外觀(顆粒大小、性狀等)、顏色(顆粒顏色、溶化后水溶液顏色等)、氣味(直接打開及溶化后的氣味、味道及口服產(chǎn)生的味道等)進(jìn)行評分。評分標(biāo)準(zhǔn)為與對照品完全一致10分，比較相似8分，不確定5分，差異較大3分，完全不一樣0分，介于2個(gè)等級之間的根據(jù)情況打分，將評分值填于計(jì)分表中。

2.3 人工評價(jià)

2.3.1 生產(chǎn)廠家人員 由20名從事質(zhì)量檢驗(yàn)及制劑的工作人員分別對同一批次的糖降腎康顆粒與糖降腎康顆粒安慰劑進(jìn)行評分，獨(dú)立對糖降腎康顆粒溶解前后的外觀、顏色、氣味等進(jìn)行綜合評分。結(jié)果，糖降腎康顆粒與糖降腎康顆粒安慰劑在顆粒劑外觀、顏色、氣味3個(gè)方面比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表4。

表4 生產(chǎn)廠家人員判斷結(jié)果得分(分，

2.3.2 委托承接臨床試驗(yàn)單位人員 為了保證試驗(yàn)不破盲，通過臨床試驗(yàn)單位組織人員進(jìn)行模擬臨床試驗(yàn)的實(shí)際情況，由20名工作人員分別對同一批次的糖降腎康顆粒與糖降腎康顆粒安慰劑進(jìn)行評分，獨(dú)立對糖降腎康顆粒溶解前后的外觀、顏色、氣味等進(jìn)行綜合評分。結(jié)果，糖降腎康顆粒與糖降腎康顆粒安慰劑在顆粒劑外觀、顏色、氣味3個(gè)方面比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表5。

2.3.3 小結(jié) 本研究所得糖降腎康顆粒安慰劑與糖降腎康顆粒在外觀、顏色、氣味方面具有明顯的一致性，說明糖降腎康顆粒安慰劑與糖降腎康顆粒在臨床應(yīng)用中不容易破盲，從而能夠保證臨床應(yīng)用的要求。

表5 臨床試驗(yàn)研究人員判斷結(jié)果得分(分，

3 討論

中藥顆粒劑口服使用，病人需要通過溶化后服用，不同狀態(tài)過程中，由于中藥其自身所特有的口味和色澤，人工模擬制作中藥顆粒劑的臨床安慰劑難度較大，需考慮顆粒溶化前后一些性狀的變化，本研究采用低劑量的原料制作中藥顆粒劑安慰劑和采用人工評分的辦法評價(jià)安慰劑的效果，不僅保證安慰劑與受試藥物在外觀、顏色、口味的一致性，更解決本品溶解前后所產(chǎn)生的特殊中藥味道。通過人工盲法打分模擬臨床試驗(yàn)中患者是否能分辨出試驗(yàn)藥物與安慰劑，結(jié)果比較理想，保證臨床試驗(yàn)不容易破盲，為中藥新藥臨床試驗(yàn)安慰劑的制作提供參考。