重鏈
- 基于串聯(lián)親和層析法純化并鑒定豬初乳中SIgA
約為55 ku的重鏈和兩條分子量約為25 ku的輕鏈組成,加上15 ku的J鏈和約為75 ku的分泌成分,SIgA的分子量約為400 ku[6]。除了形成主要的二聚體形式外,SIgA還存在四聚體,五聚體等更多元的聚合形式[7-8]。近年來,基于IgA單克隆抗體的治療藥物研究越來越多[9-10]。針對結(jié)核分枝桿菌,大腸桿菌等呼吸道、消化道的病原,靶向黏膜免疫可產(chǎn)生特異性SIgA的黏膜疫苗也成為疫苗研究的新的方向[9,11]。病原感染機(jī)體后,SIgA出現(xiàn)時(shí)間相
畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào) 2023年9期2023-10-09
- 抗體的特異性形成和類別轉(zhuǎn)換
白）具有唯一的由重鏈可變區(qū)和輕鏈形成的抗原結(jié)合域，可以和細(xì)胞外液中的抗原結(jié)合，中和抗原，形成沉淀，以便巨噬細(xì)胞等消滅抗原。而同一個(gè)B細(xì)胞的膜型免疫球蛋白具有相同的抗原結(jié)合域，可識別抗原，激活B細(xì)胞。不同類別的免疫球蛋白具有不同的恒定區(qū)。B 2 細(xì)胞免疫依賴胸腺成熟的輔助性T細(xì)胞，而B 1 細(xì)胞免疫則不需要。關(guān)鍵詞 抗體 特異性 類別轉(zhuǎn)換中圖分類號 Ｇ633. 91 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 B人教版高中生物學(xué)（2019年版）《選擇性必修一·穩(wěn)態(tài)與調(diào)節(jié)》中“免疫調(diào)節(jié)”一章
中學(xué)生物學(xué) 2023年1期2023-05-30
- 基于分子對接技術(shù)研究魚源抗凍多肽與魚肌球蛋白的相互作用
的品質(zhì)。肌球蛋白重鏈（Myosin Heavy Chain，MHC）具有與完整肌球蛋白形成凝膠的相同能力。而肌球蛋白輕鏈不能單獨(dú)形成凝膠，只在肌球蛋白重鏈堿基凝膠形成中起輔助作用。因此，肌球蛋白重鏈在肌球蛋白形成凝膠三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的過程中起著非常重要的作用?？箖龆嚯氖且活愋》肿拥鞍谆虻鞍踪|(zhì)水解物，它是抗凍蛋白中局部具有抗凍活性的特異多肽鏈結(jié)構(gòu)域?？箖龆嚯脑诮Y(jié)冰或亞結(jié)冰狀態(tài)下能保護(hù)生物體免受傷害，它能非依數(shù)性降低溶液冰點(diǎn)、有效降低冰晶生長率、抑制冰晶重結(jié)晶的發(fā)
食品工業(yè)科技 2022年20期2022-10-11
- 重鏈沉積病的分子機(jī)制及診療進(jìn)展*
人民醫(yī)院腎內(nèi)科）重鏈沉積病（heavy chain deposition disease，HCDD）是一種因單克隆免疫球蛋白重鏈在組織沉積所致的全身性疾病，屬于罕見的單克隆免疫球蛋白沉積?。╩onoclonal immunoglobin deposition dis ease，MIDD），腎臟是最常被累及的器官，還可累及肝臟、甲狀腺、皮膚、骨骼肌等[1-2]，36%～50%患者隨訪1 年內(nèi)需要血液透析治療[3]。HCDD 發(fā)生機(jī)制尚不清楚，可能與重鏈恒定區(qū)
交通醫(yī)學(xué) 2022年3期2022-08-11
- 硬骨魚類特有免疫球蛋白IgT的研究進(jìn)展
疫球蛋白是由兩條重鏈(IgH)和兩條輕鏈(IgL)通過疏水作用結(jié)合在一起，并由鏈間二硫鍵相連組成的“Y”形四肽鏈結(jié)構(gòu)，每條重鏈和輕鏈各包含一個(gè)氨基端(N端)的可變區(qū)(V)結(jié)構(gòu)域和一個(gè)(輕鏈)或多個(gè)(重鏈)羧基端(C端)的恒定區(qū)(C)結(jié)構(gòu)域。在重鏈和輕鏈V區(qū)的某些特定位置上，其氨基酸殘基的組成和排列順序相比V區(qū)內(nèi)的其他位置變化更大，稱為超變區(qū)，又稱互補(bǔ)決定區(qū)(complementary determinant region，CDR)；V區(qū)中其他變化較少的部分
大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào) 2022年2期2022-05-23
- 蛋白質(zhì)磷酸化對肌動(dòng)球蛋白解離及其乙酰化水平的影響
【】研究肌球蛋白重鏈和肌動(dòng)蛋白磷酸化對其乙?；?、肌動(dòng)球蛋白解離及ATP酶活性的影響，為通過調(diào)控磷酸化水平改善肉品嫩度提供理論依據(jù)。以羊背最長肌為材料制備肌肉勻漿液，采用堿性磷酸酶抑制劑（抑制去磷酸化）和蛋白激酶抑制劑（抑制磷酸化）調(diào)控其磷酸化水平，在4℃分別孵育0、0.5、4、12、24、48和72 h，利用SDS-PAGE電泳和熒光染色、蛋白質(zhì)免疫印跡、ATP酶活性測定試劑盒分析蛋白質(zhì)磷酸化水平、乙酰化水平、肌動(dòng)球蛋白解離程度和ATP酶活性隨孵育時(shí)間
中國農(nóng)業(yè)科學(xué) 2022年7期2022-04-14
- 基于數(shù)據(jù)非依賴性采集質(zhì)譜技術(shù)對注射用曲妥珠單抗及其類似藥結(jié)構(gòu)的表征及相似性研究*
1.4抗體輕鏈與重鏈的分析 取抗體溶液(5 mg·mL-1)20 μL，加入水稀釋至100 μL，加二硫蘇糖醇(DTT)溶液8 μL，50 ℃金屬浴30 min，放冷至室溫。加入0.5 mL 10K超濾管中，離心(13 000 r·min-1，r=32 mm，10 min)。取下層液，進(jìn)行離心(4000 r·min-1，r=32 mm，1 min)，取上清液，加入到內(nèi)插管，準(zhǔn)備進(jìn)儀器檢測。1.4.1色譜條件(UPLC) 色譜柱為MassPREP在線脫鹽小柱
醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2022年4期2022-03-28
- B細(xì)胞抗原受體組裝的結(jié)構(gòu)原理
使用Igα與一條重鏈（μHC）的Cμ3-Cμ4 結(jié)構(gòu)域結(jié)合，而將另一條重鏈（μHC’）空著。兩種μHCs 的跨膜結(jié)構(gòu)域（TMD）螺旋與Igα/β異二聚體的跨膜結(jié)構(gòu)域（TMD）螺旋相互作用，形成緊密的四螺旋束。TMD 的不對稱性阻止了兩分子Igα/β異二聚體的募集。令人驚訝的是，μHC的ECD和TMD之間的連接肽介入Igα和Igβ的ECD和TMD之間，以通過顯著的電荷互補(bǔ)來引導(dǎo)TMD組裝。IgβITAM 的密度較低但明顯，與TMD 相鄰，表明ITAM 磷酸化
廣東藥科大學(xué)學(xué)報(bào) 2022年6期2022-02-26
- 人源抗體轉(zhuǎn)基因動(dòng)物平臺及專利保護(hù)
是將部分人源抗體重鏈和κ和/或λ輕鏈轉(zhuǎn)入動(dòng)物體內(nèi)，同時(shí)敲除動(dòng)物內(nèi)源的免疫球蛋白重鏈、κ輕鏈和/或λ輕鏈，其代表為Lonberg博士和Larry Green博士兩個(gè)團(tuán)隊(duì)分別培育出的HuMAb?小鼠和XenoMouse?小鼠[7-8]；第二代人源抗體轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在第一代基礎(chǔ)上，實(shí)現(xiàn)了完整人源免疫球蛋白基因的穩(wěn)定轉(zhuǎn)入，使人源抗體重排多樣性得到了保障，其代表為日本麒麟公司培育的TCTMMouse小鼠[9]；第三代人源抗體抗體轉(zhuǎn)基因動(dòng)物又在第二代的基礎(chǔ)上，重點(diǎn)解決人源
生物學(xué)雜志 2021年6期2021-12-20
- MYH3 基因在主要模式動(dòng)物和畜禽中的研究進(jìn)展
由2 個(gè)肌球蛋白重鏈（Myosin Heavy Chain）和4 個(gè)肌球蛋白輕鏈（Myosin Light Chain）組成，可以通過水解ATP 將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為機(jī)械能，與肌動(dòng)蛋白等協(xié)作完成肌肉的收縮過程[1]，是肌肉組織的重要組成部分。肌球蛋白重鏈由MYH基因家族進(jìn)行調(diào)控，其與肌肉收縮速度有關(guān)[2]。哺乳動(dòng)物至少有10 種肌球蛋白重鏈亞型[3]，不同亞型的肌球蛋白重鏈會對肌肉剪切力、肌內(nèi)脂肪含量造成不同的影響[4]。20 世紀(jì)80 年代，科學(xué)家在研究中發(fā)現(xiàn)
中國畜牧雜志 2021年12期2021-12-17
- 抗登革病毒人源化單克隆抗體h1A1D的構(gòu)建及純化
鼠源單克隆抗體輕重鏈可變區(qū)氨基酸序列與人源抗體輕重鏈恒定區(qū)氨基酸序列合成至pcDNA 3.1(+)載體上，轉(zhuǎn)染CHO-K1細(xì)胞進(jìn)行抗體表達(dá)，Protein A親和純化后，成功制備了抗DENV人源化單克隆抗體h1A1D，本研究結(jié)果對進(jìn)一步探索DENV致病機(jī)制及研發(fā)登革熱的抗體藥物提供參考。1 材料與方法1.1 試劑和儀器倉鼠卵巢細(xì)胞CHO-K1細(xì)胞購自中國科學(xué)院細(xì)胞庫；限制性內(nèi)切酶、質(zhì)粒提取試劑盒、DL5000 DNA Marker均購自Sigma公司；F-
中國獸醫(yī)學(xué)報(bào) 2021年9期2021-11-02
- 弓形蟲SAG1重組抗體制備及抗原表位鑒定
知序列信息的抗體重鏈和輕鏈而形成，可以避免多克隆抗體的批次不穩(wěn)定性和雜交瘤單克隆抗體失效的問題，從而被科研工作者所青睞[6]。目前，弓形蟲蛋白抗體大多是多克隆或雜交瘤單克隆抗體，而重組抗體比較少見。本研究利用單個(gè)質(zhì)粒表達(dá)抗體重鏈和輕鏈，制備了弓形蟲SAG1重組抗體，試驗(yàn)結(jié)果表明該重組抗體特異性高、批次間可重復(fù)性強(qiáng)，而且可重新編輯加入熒光基團(tuán)，適用于免疫印跡和免疫熒光試驗(yàn)。本研究采用的重組抗體制備方法可為其他蛋白的抗體制備提供借鑒。1 材料與方法1.1 蟲株
中國獸醫(yī)學(xué)報(bào) 2021年6期2021-08-10
- 抗GPC3/CD3雙特異性重鏈抗體的制備及其抗肝癌作用評價(jià)
作為一種僅含單個(gè)重鏈可變區(qū)的特殊抗體，具有相對分子質(zhì)量小且易于滲透的特點(diǎn)，能發(fā)揮一定的抗肝癌效果[9]。將其與PE38等毒素融合構(gòu)建免疫毒素，可進(jìn)一步增強(qiáng)抗腫瘤活性[10]。將抗CD3 scFv和抗GPC3 scFv用短的Linker進(jìn)行連接構(gòu)建雙特異性T細(xì)胞銜接子(BiTE)，可有效募集T細(xì)胞靶向殺傷GPC3陽性肝癌細(xì)胞[11]。但BiTE親和力低、純化困難和半衰期短的缺點(diǎn)限制了其應(yīng)用。另外靶向GPC3的嵌合抗原受體T細(xì)胞(CAR-T)免疫療法也是目前肝
中國臨床醫(yī)學(xué) 2021年3期2021-07-03
- α重鏈病臨床特征和實(shí)驗(yàn)室檢查特征
441000α重鏈病又稱免疫增生性小腸病，也曾被稱為“地中海淋巴瘤”，是由SELIGMANN在1968年首次發(fā)現(xiàn)的，其特征為只合成和分泌不完整的免疫球蛋白α重鏈，而無輕鏈表達(dá)[1]。該病在臨床上非常少見，本研究以華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院收治的1例α重鏈病患者(病例4)，2007年徐三清等[2]報(bào)道的1例α重鏈病患者(病例1)，2014年趙辰等[3]報(bào)道的1例α重鏈病患者(病例2)，山東菏澤市立醫(yī)院寶榮等[4]報(bào)道的1例α重鏈病患者(病例3)各項(xiàng)
檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床 2020年9期2020-05-21
- 豬的免疫球蛋白基因鑒定和注釋
IG)的基因包括重鏈(immunoglobulin heavy chain)和輕鏈(immunoglobulin light chain)基因，重鏈和輕鏈的胚系基因(germline gene)由編碼可變區(qū)(V區(qū))和恒定區(qū)(C區(qū))的多個(gè)基因偏關(guān)串聯(lián)形成的基因簇組成。重鏈可變區(qū)基因包括V、D、J三類基因片段，輕鏈可變區(qū)基因包括V、J兩類基因片段[13]。重鏈和輕鏈基因在基因組中通常位于不同染色體上，其胚系基因彼此由內(nèi)含子隔開。免疫球蛋白是指具有抗體活性且化學(xué)
- 新疆雙峰駝納米抗體、重鏈抗體和常規(guī)抗體的熱穩(wěn)定性比較
在天然缺失輕鏈的重鏈抗體(Heavy Chain Antibodies, HCAbs)以來[1]，但研究者對于HCAbs自身的功能和特性、其在駱駝體液免疫系統(tǒng)中的作用、與疾病的關(guān)系等研究較欠缺、鮮有文獻(xiàn)報(bào)道。研究駱駝HCAbs的功能及性質(zhì)，對分析駱駝免疫系統(tǒng)的功能，研究更有效的疾病預(yù)防和治療手段，開發(fā)和利用這類抗體具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】 駱駝科現(xiàn)存3屬6種動(dòng)物。在所有這些動(dòng)物中，除具有由2條重鏈和2條輕鏈組成的IgG1型常規(guī)抗體外，還存在天然缺失輕
新疆農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020年2期2020-03-12
- 重組人源抗血管內(nèi)皮生長因子單克隆抗體的制備及鑒定
化抗VEGF抗體重鏈輕鏈序列,其中一對表達(dá)量和生物效應(yīng)較好,可進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng).1 材料與方法1.1 材料與儀器HEK-293,HEK-293F,C6細(xì)胞由長春工業(yè)大學(xué)細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)室保存,常規(guī)培養(yǎng);pcDNA3.1+質(zhì)粒由長春工業(yè)大學(xué)細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)室保存;質(zhì)粒大提試劑盒(北京天根生化科技有限公司)；轉(zhuǎn)染試劑(美國 Polysciences公司)；內(nèi)切酶(大連Tokava生物技術(shù)公司)；辣根過氧化物酶(HRP)兔抗人IgG(北京索萊寶公司)；標(biāo)準(zhǔn)品(美國Roch
吉林大學(xué)學(xué)報(bào)（理學(xué)版） 2019年6期2019-11-28
- HEK 293細(xì)胞中重組型抗體表達(dá)和分泌的監(jiān)測系統(tǒng)的構(gòu)建
。IgG由2條γ重鏈和2條輕鏈通過二硫鍵共價(jià)連接形成四聚體蛋白質(zhì)，每個(gè)輕鏈和重鏈的N端均含有針對同一抗原的抗原結(jié)合域。在IgG的Fc結(jié)構(gòu)域上有一個(gè)高度保守的N-糖基化位點(diǎn)[5]。目前生物抗體藥物主要由經(jīng)過基因工程改造可大規(guī)模培養(yǎng)的宿主細(xì)胞表達(dá)生產(chǎn)，這些工程細(xì)胞株主要有中國倉鼠卵巢細(xì)胞（Chinese Hamster Ovary，CHO）、幼年敘利亞地鼠腎細(xì)胞 （Baby Hamster Syrian Kidney、BHK），小鼠骨髓瘤細(xì)胞株 Sp2/0和
食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào) 2019年7期2019-10-30
- 鯽和虹鱒IgM重鏈恒定區(qū)的融合表達(dá)及抗血清的制備
。Ig分子由兩條重鏈（IgH）和兩條輕鏈（IgL）通過二硫鍵連接在一起，抗原結(jié)合位點(diǎn)位于IgH和IgL鏈的可變區(qū)。雖然魚類的免疫系統(tǒng)比較原始，但是，硬骨魚體內(nèi)產(chǎn)生的Ig包括IgM[1]、IgD[2-4]和IgT/IgZ[5，6]。在機(jī)體內(nèi)發(fā)揮功能的免疫球蛋白主要是IgM[7]，哺乳動(dòng)物體內(nèi)的IgM分子主要是以五聚體形式存在，而硬骨魚的IgM分子主要為四聚體[8]。IgD在體液免疫中發(fā)揮重要作用[9，10]，IgT 在粘膜免疫應(yīng)答中產(chǎn)生[11-13]?？贵w具
水產(chǎn)學(xué)雜志 2019年4期2019-08-13
- 三個(gè)品系蛋鴨β2m基因的克隆及多態(tài)性研究
CxVxH”和與重鏈相互作用的位點(diǎn)均保守性存在；篩選的47條β2m氨基酸序列同源性為95%～100%，完全一致序列普遍存在；鴨β2m氨基酸序列與雞同源性最高，與魚類和兩棲類最低，結(jié)果與遺傳進(jìn)化分析相一致；成熟肽中高變異位點(diǎn)和與重鏈相互作用的變異位點(diǎn)多位于β折疊上，但不會對β2m的功能產(chǎn)生影響。綜合來看，鴨β2m基因保守性高，僅存在一種類型，與MHCⅠ重鏈的作用方式也相對固定。本試驗(yàn)結(jié)果有助于深入理解鴨β2m的分子特性，推動(dòng)MHCⅠ相關(guān)免疫研究的開展。關(guān)鍵詞
山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年8期2018-11-22
- 黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤中Ig蛋白重鏈表達(dá)與IgH基因重排的研究
，立足于Ig蛋白重鏈可變區(qū)的IgH基因重排與重鏈恒定區(qū)的抗體類別轉(zhuǎn)換，分表1 試驗(yàn)組及對照組中各種Ig蛋白重鏈表達(dá)情況及表達(dá)模式[n(%)]a:試驗(yàn)組間比較；b：試驗(yàn)組各腫瘤分別與對照組比較;c:Fisher檢驗(yàn)；d:試驗(yàn)組與對照組比較；▲:IgE在各組中均為陰性表達(dá)，因而不列入表中;-:此項(xiàng)無數(shù)據(jù)析IgH基因重排與Ig重鏈表達(dá)的情況，以期找到有利于MALToma診斷和鑒別診斷的新方法。1 資料與方法1.1一般資料 收集江蘇省連云港市第一人民醫(yī)院病理科20
重慶醫(yī)學(xué) 2018年28期2018-10-29
- 人源化抗Siglec-9抗體Fab片段的制備及鑒定①
PCR擴(kuò)增抗體輕重鏈可變區(qū)和恒定區(qū)，陽性克隆送檢測序后與數(shù)據(jù)庫VBASE2比對，得到可變區(qū)和恒定區(qū)的核酸和氨基酸序列。根據(jù)可變區(qū)和恒定區(qū)的序列和重疊延伸PCR的原理設(shè)計(jì)抗體輕鏈和重鏈的可變區(qū)和恒定區(qū)引物，輕鏈引物和重鏈引物分別如下：L-F：CATGCCATGGGCCAGTCTGCCCTGACTCAGCCCC； L-R；CCCAAGCTTTTATGAACATTCTGTAGGGGCCAC；H-F：CCGGATATCGCAGGTGCAG-CTGGTGCAGTCT
中國免疫學(xué)雜志 2018年6期2018-07-06
- A型肉毒素重鏈干預(yù)神經(jīng)細(xì)胞組蛋白3乙酰化水平的初步研究
T/A分子由一條重鏈(heavy chain-HC, 分子量為100×103)和一條輕鏈(light chain-LC，分子量為50×103)構(gòu)成，由二硫鍵相互連接。重鏈的羧基端含有與突觸前膜蛋白受體結(jié)合的位點(diǎn)，可與膜受體結(jié)合形成毒素-受體復(fù)合物，輕鏈隨重鏈內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞發(fā)揮毒性作用[1]。本研究團(tuán)隊(duì)的前期研究結(jié)果顯示人工重組的BoNT/A重鏈可促進(jìn)體外培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞突起生長；在體實(shí)驗(yàn)也進(jìn)一步證實(shí)BoNT/A重鏈可干預(yù)脊髓損傷后局部多種分子量水平的蛋白表達(dá)[
中國比較醫(yī)學(xué)雜志 2018年6期2018-06-26
- 凡納濱對蝦網(wǎng)格重鏈蛋白與WSSV結(jié)構(gòu)蛋白在體外的相互作用*
到深入闡釋。網(wǎng)格重鏈蛋白(Clathrin Heavy Chain, CHC)是網(wǎng)格蛋白的主要成分之一，是進(jìn)化上保守的大分子蛋白，迄今只在真核生物中發(fā)現(xiàn)，包括近端區(qū)、連接區(qū)、腳踝區(qū)、膝彎曲區(qū)、腿遠(yuǎn)端區(qū)、腿近端區(qū)和鉸鏈區(qū)。網(wǎng)格重鏈蛋白N端有一個(gè)銜接蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域(TD)，通過結(jié)合銜接蛋白連接要運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)(Teret al, 1998;Pearseet al, 2000; Zhu, 2015)。網(wǎng)格蛋白具有介導(dǎo)膜蛋白、生長因子、受體、病原體、突觸等物質(zhì)進(jìn)行內(nèi)吞
漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展 2018年2期2018-03-29
- 色譜法分析重組單克隆抗體電荷異質(zhì)性應(yīng)用進(jìn)展
單克隆抗體由2條重鏈2條輕鏈組成，相對分子質(zhì)量高達(dá)150 kDa左右，結(jié)構(gòu)復(fù)雜。目前，單克隆抗體大多是采用哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行生產(chǎn)，單克隆抗體在生物化學(xué)和生物物理方面是異質(zhì)的，這主要取決于復(fù)雜的翻譯后修飾和降解事件[1]，導(dǎo)致了產(chǎn)品的分子大小、電荷、糖基化修飾等不均一性及其相應(yīng)的變體產(chǎn)生[2]。采用一些電荷分離技術(shù)如等電聚焦(IEF)凝膠電泳、毛細(xì)管等電聚焦(cIEF)凝膠電泳、陽離子交換色譜(CEX)、陰離子交換色譜(AEX)分析單抗會發(fā)現(xiàn)變體，這些
實(shí)用藥物與臨床 2018年4期2018-03-17
- A型肉毒素重鏈干預(yù)對大鼠脊髓損傷后生長相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
毒素氨基端，稱為重鏈(heavy chain，HC), 負(fù)責(zé)與靶細(xì)胞膜結(jié)合及介導(dǎo)毒素的內(nèi)吞；較短的一條位于毒素的氨基側(cè)，稱為輕鏈(light chain，LC)。輕鏈部分具有Zn+依賴的蛋白水解酶活性，是毒素的毒性催化單位[12-13]。一些在體實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)A型肉毒素引起肌肉麻痹的恢復(fù)期(注射后3～4月)，隨著肌肉功能的逐漸恢復(fù)，局部組織內(nèi)可見運(yùn)動(dòng)終板樣神經(jīng)末梢結(jié)構(gòu)[14]。因此，根據(jù)BoNT/A化學(xué)結(jié)構(gòu)的功能特征，在去除輕鏈的毒性作用后，BoNT/A重鏈本身
中國比較醫(yī)學(xué)雜志 2018年2期2018-03-05
- 駱駝天然單域重鏈抗體庫的構(gòu)建與鑒定
統(tǒng)內(nèi)存在一種僅由重鏈單一的折疊單元組成的抗體，將其稱為單域重鏈抗體(variable domain of heavy-chain of heavy-chain antibody,VHH)或納米抗體(nanobody,Nbs)[1]。納米抗體僅由重鏈抗體的可變區(qū)組成，較普通抗體具有一些獨(dú)特性能[2]，如分子量小、穩(wěn)定性高、親和力高[3]、免疫原性弱、良好而廣泛的抗原結(jié)合能力[4]以及水溶性好等特點(diǎn)[5]，使其在病原的檢測、食品安全分析[6]等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用。
動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展 2018年1期2018-02-10
- 靶向家蠶絲素重鏈基因的鋅指蛋白結(jié)構(gòu)域的人工構(gòu)建*
5)靶向家蠶絲素重鏈基因的鋅指蛋白結(jié)構(gòu)域的人工構(gòu)建*劉婷婷，梁梓強(qiáng)，梁安文，郭技星，李廣宏，王方海(中山大學(xué)有害生物控制與資源利用國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室//昆蟲學(xué)研究所，廣東 廣州510275)將多個(gè)可特異識別并結(jié)合DNA的鋅指單體串聯(lián)在一起即可構(gòu)成鋅指蛋白結(jié)構(gòu)域，若將其與不同的功能域因子融合，則會構(gòu)建出有很多用途的人工蛋白分子，從而實(shí)現(xiàn)對基因組的各種定點(diǎn)修飾或調(diào)控。以家蠶絲素重鏈基因?yàn)檠芯繉ο螅紫壤肸inc Finger Tools軟件篩選到了一個(gè)合適的靶標(biāo)
- 一種新型的利用DSS交聯(lián)劑避免重鏈輕鏈干擾的免疫沉淀技術(shù)
對分子量較大的為重鏈，大小為55KDa，另外兩條較短的相對分子量較小的為輕鏈，大小25KDa。在免疫沉淀技術(shù)中如果目的條帶大小和重鏈輕鏈的大小一樣或接近將影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判斷。本文章通過DSS 使抗體和蛋白A/G磁珠緊密交聯(lián)，即使高溫或還原劑作用下也不會破壞交聯(lián)的結(jié)構(gòu)，而高溫或還原劑可以使抗體和抗原分開，從而達(dá)到SDS-PAGE 檢測到的條帶都是蛋白條帶而沒有重鏈輕鏈條帶的干擾的目的。關(guān)鍵詞 DSS 重鏈 輕鏈 免疫沉淀當(dāng)抗原或抗原類似物侵入機(jī)體將誘導(dǎo)淋巴細(xì)
科教導(dǎo)刊 2017年10期2017-06-09
- A型肉毒桿菌神經(jīng)毒素重鏈干預(yù)大鼠脊髓損傷后蛋白表達(dá)的初步研究*
肉毒桿菌神經(jīng)毒素重鏈干預(yù)大鼠脊髓損傷后蛋白表達(dá)的初步研究*蘭 婧， 王 紅， 白 娟， 王亞芳， 李夏青△(山西醫(yī)科大學(xué)病理生理教研室， 山西 太原 030001)目的： 初步觀察大鼠脊髓損傷模型基礎(chǔ)上局部注射小劑量A型肉毒桿菌神經(jīng)毒素重鏈(BoNT/A HC)后對局部蛋白表達(dá)譜的影響，為探討B(tài)oNT/A HC干預(yù)在體神經(jīng)損傷后相關(guān)蛋白表達(dá)及其干預(yù)神經(jīng)再生機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法：復(fù)制大鼠單側(cè)腰段脊髓損傷模型；采用SDS-PAGE及雙向電泳觀察不同劑量BoN
中國病理生理雜志 2016年12期2017-01-03
- 人源抗EV71病毒中和表位SP70 的Fab抗體研制
因引物擴(kuò)增輕鏈及重鏈Fd區(qū)基因，分步克隆至pComb3載體，構(gòu)建Fab噬菌體抗體庫。以SP70為抗原對Fab噬菌體抗體庫進(jìn)行富集篩選，將獲得的重組噬菌體感染XL1-Blue菌并誘導(dǎo)表達(dá)，用SP70對誘導(dǎo)表達(dá)的菌上清進(jìn)行篩選。結(jié)果 共獲得3株輕、重鏈基因組合序列不同的克隆，且這3株Fab抗體可特異性結(jié)合SP70多肽。結(jié)論 成功構(gòu)建人源抗EV71病毒Fab噬菌體抗體庫，并從中篩選出3株針對EV71病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP1上中和線性表位SP70的特異性人源Fab抗體，
中國人獸共患病學(xué)報(bào) 2016年8期2016-12-01
- 心肌血管緊張素Ⅱ在運(yùn)動(dòng)和高血壓性心肌肥大時(shí)肌球蛋白重鏈變化中的作用探討
肌肥大時(shí)肌球蛋白重鏈變化中的作用探討王傳輝 陳金水（福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，福建福州350005）目的 為了解心肌局部血管緊張素對運(yùn)動(dòng)和高血壓兩種不同的心肌肥大細(xì)胞表型是否參與變化調(diào)節(jié)。方法 分析正常的自發(fā)性高血壓大鼠產(chǎn)生運(yùn)動(dòng)后其心肌血管緊張素Ⅱ與肌球蛋白重鏈的異型變化，并通過十二周時(shí)間的游泳訓(xùn)練再行觀察。結(jié)果 正常安靜的自發(fā)性高血壓大鼠心肌血管緊張素Ⅱ與α-和β-肌球蛋白重鏈的變化沒有明顯的關(guān)聯(lián)性（r=0.1801；0.1822；0.1798；P＞0.
心血管病防治知識 2016年9期2016-11-21
- 動(dòng)物免疫球蛋白的研究現(xiàn)狀及發(fā)展前景
輕鏈和兩條相同的重鏈所構(gòu)成的多肽鏈結(jié)構(gòu)，其中重鏈有五種，與之相對應(yīng)的免疫球蛋白分子為5類，即免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE)整個(gè)免疫球蛋白分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩個(gè)部分。由于免疫球蛋白重鏈恒定區(qū)在免疫過程中起著多種效應(yīng)作用，目前已對多種動(dòng)物的免疫球蛋白重鏈恒定區(qū)進(jìn)行了研究，如哺乳動(dòng)物，爬行類，鳥類等。了解免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)和功能，對于了解免疫系統(tǒng)有著重要意義。1 魚類免疫
山東畜牧獸醫(yī) 2016年11期2016-04-05
- 烏珠穆沁羊生長過程中骨骼肌MyHC基因變化
羊骨骼肌肌球蛋白重鏈（MyHC）基因相對表達(dá)量的變化規(guī)律，實(shí)驗(yàn)選擇自然放牧條件下的1、3、6、9、12、18月齡的烏珠穆沁羊，屠宰后采取股二頭肌、背最長肌，采用十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis，SDS-PAGE）法分離骨骼肌中肌球蛋白重鏈異構(gòu)體，利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）技術(shù)
肉類研究 2015年7期2015-05-30
- 家蠶絲素重鏈C末端序列分析、克隆及表達(dá)純化
101)家蠶絲素重鏈C末端序列分析、克隆及表達(dá)純化劉青松1,2，#李 瑜1,2，#李珍珍1,3劉莉娜1王葉菁1,2何華偉1,2,3,*(1.西南大學(xué)家蠶基因組生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，2.生物技術(shù)學(xué)院，重慶 400716;3.中國科學(xué)院生物物理研究所生物大分子國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100101)蠶絲主要由絲素和絲膠蛋白組成，其中絲素包括絲素重鏈，絲素輕鏈和P25蛋白。絲素重鏈蛋白分子量大，體外表達(dá)困難，難以分離純化，很難對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究。本文通過對絲素重鏈基因
蠶學(xué)通訊 2015年2期2015-04-06
- A型肉毒素重鏈對Neuro-2a細(xì)胞的促神經(jīng)突起再生作用*
01)A型肉毒素重鏈對Neuro-2a細(xì)胞的促神經(jīng)突起再生作用*高美玲，李夏青△ (山西醫(yī)科大學(xué)病理生理教研室，山西太原030001)目的:觀察A型肉毒素重鏈(botulinum neurotoxin serotype A heavy chain，BoNT/A HC)對Neuro-2的促神經(jīng)再生作用。方法: (1)在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入不同濃度的BoNT/A HC，于3個(gè)時(shí)點(diǎn)收集細(xì)胞做免疫熒光檢測軸突長度和有突起細(xì)胞的百分比。(2)在培養(yǎng)液中加入同一濃度的Bo
中國病理生理雜志 2015年10期2015-01-26
- Neuro-2a細(xì)胞株用于A型肉毒毒素重鏈體外實(shí)驗(yàn)的可行性研究
用于A型肉毒毒素重鏈體外實(shí)驗(yàn)的可行性研究王紅，李夏青 (山西醫(yī)科大學(xué)，山西太原030001)目的:探討Neuro-2a細(xì)胞株用于A型肉毒毒素重鏈(botulinum neurotoxin serotype A heavy chain，BoNT/A HC)體外細(xì)胞模型的可行性。方法:體外培養(yǎng)Neuro-2a細(xì)胞檢測HC相關(guān)受體，確定是否可用于HC作用的體外模型;后于Neuro-2a細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)加入一定濃度的HC，于不同時(shí)點(diǎn)在相差顯微鏡下攝取圖片觀察HC對細(xì)胞
中國病理生理雜志 2015年10期2015-01-26
- 大菱鲆mIgD重鏈基因的克隆與表達(dá)分析*
乳動(dòng)物免疫球蛋白重鏈根據(jù)其恒定區(qū)氨基酸組成及抗原性差異，可分為γ，α，ε，μ和δ5種類型，分別相應(yīng)構(gòu)成IgG，IgA，IgE，IgM 和IgD［1］。相比于哺乳動(dòng)物，魚類免疫球蛋白研究起步較晚，且在很長一段時(shí)間內(nèi)人們認(rèn)為魚類只存在IgM一種免疫球蛋白，隨著分子生物學(xué)研究的發(fā)展，近年在魚體上發(fā)現(xiàn)了IgD、IgT及IgNAR等免疫球蛋白類型［2－4］。其中，單體結(jié)構(gòu)的IgD被視為最神秘的免疫球蛋白，它在機(jī)體內(nèi)含量很低，抗體活性很難被檢測到，其基因與蛋白結(jié)構(gòu)在不
- 擬南芥網(wǎng)格蛋白重鏈突變體的遺傳分析*
蛋白復(fù)合體由3條重鏈(clathrin heavy chains,CHC)和3條輕鏈(clathrin light chains,CLC)組成，形成一個(gè)三腳架結(jié)構(gòu)，一般由36個(gè)或60個(gè)三腳架復(fù)合體進(jìn)一步形成一個(gè)由12個(gè)五邊形和若干個(gè)六邊形組成的網(wǎng)格狀籠形結(jié)構(gòu)(網(wǎng)格蛋白因此而得名)，其中CHC是構(gòu)成三腳架結(jié)構(gòu)的主要骨架，而CLC具有調(diào)控網(wǎng)格蛋白籠型結(jié)構(gòu)組裝和拆卸的功能[1-3].目前，已知網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞(clathrin-mediated endocyt
- 腎臟重鏈沉積病（IgG-γ1型重鏈）1例
析[1]用IgG重鏈抗體，分別為IgG1單抗（sigma，clone 8c/6-39）、IgG2單抗（sigma，clone HP-6014）、IgG3單抗（sigma，clone HP-6050）和IgG4單抗（sigma，clone HP-6025）冰凍切片熒光染色，顯示IgG1++，彌漫分布，呈團(tuán)塊狀沉積于腎小球系膜區(qū)，呈類線狀沉積于腎小球外周血管袢（圖5）。IgG1腎小球球囊壁、腎小管基膜及間質(zhì)血管壁陽性（圖6）。IgG2、IgG3、IgG4陰性。
中華老年多器官疾病雜志 2014年3期2014-04-27
- 大鯢鐵蛋白重鏈FTH基因的克隆、鑒定及表達(dá)分析
00)大鯢鐵蛋白重鏈FTH基因的克隆、鑒定及表達(dá)分析楊 輝1,2李鋒剛1,2藍(lán)青景1,2胡 偉1劉小林1王立新1,2(1. 西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院, 楊凌 712100; 2. 陜西省農(nóng)業(yè)分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 楊凌 712100)從大鯢皮膚cDNA文庫中, 篩選出大鯢鐵蛋白重鏈AdFTH的cDNA序列, 其全長為864 bp, 開放閱讀框?yàn)?31 bp, 編碼176個(gè)氨基酸, 5′和3′非翻譯編碼區(qū)(Untranslated region, UTR
水生生物學(xué)報(bào) 2014年1期2014-04-10
- 微小核糖核酸-34a對大鼠肥厚心肌組織肌球蛋白重鏈α基因表達(dá)的調(diào)控*
心肌組織肌球蛋白重鏈α基因表達(dá)的調(diào)控*楊蕊珂，楊麗紅，王淑輝，喬鵬，徐金義，李涵，張強(qiáng)目的: 探討微小核糖核酸-34（amiRNA-34a）對左心室肥厚大鼠心肌組織肌球蛋白重鏈α基因表達(dá)的調(diào)控及其意義。心肌肥厚; 微小核糖核酸-34a; 肌球蛋白重鏈α(Chinese Circulation Journal, 2014,29:138.)心肌肥厚是心肌對長期壓力超負(fù)荷、內(nèi)分泌激活、能量代謝障礙等刺激因素的代償表現(xiàn)。肥厚心肌結(jié)構(gòu)功能的改變與肌球蛋白“胚胎化”
中國循環(huán)雜志 2014年2期2014-03-02
- 甲型H1N1流感病毒血凝素單克隆抗體輕鏈和重鏈可變區(qū)基因的巢式PCR擴(kuò)增及序列分析
擴(kuò)增抗體的輕鏈和重鏈可變區(qū)基因并進(jìn)行測序，為下一步分析抗體與抗原的結(jié)合靶位提供基礎(chǔ)及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1 材料與方法1.1 材料大腸桿菌DH5α菌株由本實(shí)驗(yàn)室保存；6株甲型H1N1流感病毒血凝素單克隆抗體A1-6、A1-8、A1-12、H1-4、H1-13和H1-28由本實(shí)驗(yàn)室制備，抗體輕鏈亞型均為κ鏈；總RNA提取試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、質(zhì)粒提取試劑盒和DNA凝膠回收試劑盒購自北京天根生物公司；ExTaq聚合酶、rTaq聚合酶、限制性內(nèi)切酶、pMD19-T載體、D
生物技術(shù)通訊 2013年1期2013-10-29
- 腎臟輕-重鏈沉積病
光染色，符合輕-重鏈沉積病(IgA-λ型)。討 論中年男性患者，病程3年，臨床表現(xiàn)中等量蛋白尿、少量鏡下血尿、高血壓、腎功能不全，伴貧血(正細(xì)胞性)、白細(xì)胞減低，免疫固定電泳見λ型IgA單克隆免疫球蛋白條帶，血游離輕鏈比例異常(κ/λ比值0.18)，骨髓細(xì)胞學(xué)檢查漿細(xì)胞比例5%及增生性貧血。臨床診斷符合意義未明的高丙種球蛋白血癥(MGUS)伴腎臟損害。該患者接受腎活檢以明確腎臟損害的類型。圖1 A：腎小球體積增大，系膜區(qū)重度增寬，呈結(jié)節(jié)狀(PAS，×400
腎臟病與透析腎移植雜志 2013年1期2013-08-07
- 抑制T細(xì)胞增殖的抗CD98重鏈單克隆抗體的建立
由一條 CD98重鏈(CD98 heavy chain，CD98hc，又稱4F2hc)—Slc3a2的基因產(chǎn)物和一條輕鏈(CD98 light chain，CD98lc，又稱 4F2lc)組成。30年前Haynes等［4］首次發(fā)現(xiàn) CD98hc是 T細(xì)胞激活的一種標(biāo)志。隨后 Hemler等［2］證明，CD98與細(xì)胞的增殖及存活有關(guān)，且發(fā)現(xiàn)CD98高表達(dá)于增殖的組織表面。CD98具有兩種不同的功能:介導(dǎo)整合素信號通路及氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)［5，6］;CD98hc的不同
- 黃顙魚免疫球蛋白M基因的克隆與組織表達(dá)分析
用。Ig分子包括重鏈和輕鏈兩部分，根據(jù)重鏈恒定區(qū)化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異，可將Ig劃分為多種類型。不同動(dòng)物所擁有的Ig種類不同，目前已報(bào)道的硬骨魚類Ig有IgM、IgD、IgZ/T和IgM－IgZ嵌合體等幾種類型［1－5］。有報(bào)道指出，病原菌感染可明顯提高鱖魚IgM的表達(dá)水平，而IgD和IgZ無明顯變化［6］，內(nèi)毒素刺激則可增加鯉IgM－IgZ嵌合體基因的轉(zhuǎn)錄［5］，這說明不同類型的Ig有不同的免疫應(yīng)答機(jī)制。在這些Ig分子中，IgM存在于所有有頜類脊椎動(dòng)物中，其重鏈
大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào) 2013年6期2013-02-08
- 人源化乙肝表面抗體重鏈克隆、表達(dá)及免疫學(xué)特性初步鑒定
，HB-sAb)重鏈，為人源化、個(gè)體化的乙肝治療性抗體開發(fā)提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。對象與方法1．研究對象:選取健康志愿者8名，無各種器質(zhì)性和免疫性疾病史，未接種過乙肝疫苗，乙肝三系各項(xiàng)檢測均為陰性(放射免疫法)，對志愿者注射乙肝疫苗(基礎(chǔ)免疫3針)，完成第3針注射后的第30日清晨各志愿者均空腹抽血20ml，以枸櫞酸鈉(1∶9)抗凝，每份樣本取2ml全血3000r/min離心取500μl血漿檢測其HBsAb濃度(放射免疫法)，篩選得到HB-sAb＞1000mIU
醫(yī)學(xué)研究雜志 2012年3期2012-12-07
- 獲得性漏斗胸膈肌肌凝蛋白重鏈MyHC-Ⅰ的表達(dá)變化和意義
斗胸膈肌肌凝蛋白重鏈MyHC-Ⅰ的表達(dá)變化和意義王 靖1，李 俊2，吳學(xué)東2，王 寧2(1大理學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，云南大理671000;2大理學(xué)院附屬醫(yī)院)目的 通過檢測獲得性漏斗胸大鼠膈肌肌凝蛋白重鏈MyHC-Ⅰ的表達(dá)變化，探討肌凝蛋白重鏈在獲得性漏斗胸發(fā)生發(fā)展中的作用。方法 選用4周齡SD大鼠48只，隨機(jī)分為3組，每組16只。其中肋軟骨組和膈肌組分別為從胸骨旁切斷下位3對肋軟骨并造成膈肌局部物理損傷而獲得漏斗胸模型，對照組不做任何干預(yù)。于術(shù)后第2周和第4周
山東醫(yī)藥 2012年44期2012-09-11
- 游離輕鏈檢測對多發(fā)性骨髓瘤診斷的臨床意義
,合成速度略快于重鏈。在與重鏈結(jié)合后有部分輕鏈游離于血中,正常人維持在低濃度水平,而在多發(fā)性骨髓瘤時(shí)游離輕鏈大量增加。實(shí)驗(yàn)室常以本周氏蛋白陽性與否來判斷是否有游離輕鏈。而本周氏蛋白(尿中游離輕鏈)檢測受多種因素的影響[1](如患者的腎臟功能及尿量),而血清游離輕鏈在判斷患者病情、監(jiān)測療效等方面優(yōu)于尿輕鏈。該檢測在國外已較廣泛地應(yīng)用于漿細(xì)胞增殖性的診斷和監(jiān)測中,其檢測的靈敏度高,特異強(qiáng)[2-4]。本實(shí)驗(yàn)室將以骨髓瘤患者為對象,評價(jià)幾種常用檢測方法,在診斷、療
中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué) 2011年9期2011-09-28
- 人源Fab段噬菌體抗體庫的構(gòu)建及抗IL-4抗體的初步篩選*
方法1.2.1 重鏈Fd和輕鏈基因的獲得 抽取來自天津市泌尿外科研究所18例健康成人外周血，分離淋巴細(xì)胞。每1×107細(xì)胞加入1 mL TRIzol充分裂解細(xì)胞，提取總RNA，瓊脂糖凝膠電泳鑒定總RNA。以O(shè)ligo（dT）15為引物，用Quantscript RT試劑盒逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，分別以重鏈和輕鏈5端和3端引物[3]的不同組合聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）擴(kuò)增重鏈Fd段和輕鏈基因片段。擴(kuò)增條件為：94℃預(yù)變性3 min。94℃變性1 min，退火溫度因引物
天津醫(yī)藥 2011年6期2011-03-13
- 一種具有人VEGF結(jié)合活性的人源單一重鏈可變區(qū)的克隆與表達(dá)
合活性的人源單一重鏈可變區(qū)的克隆與表達(dá)劉珩1,2，劉思國2，武藝2，馬梓力1,2，劉煜3，張愛民2，陳建泉2，成國祥21 同濟(jì)大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，上海 2000922 上海轉(zhuǎn)基因研究中心，上海 2012103 中國藥科大學(xué) 生化教研室，南京 210009為避免一種來自五特征轉(zhuǎn)基因小鼠的全人VEGF單克隆IgM抗體分子量大的不足，本研究探討了該抗體單一重鏈可變區(qū)的功能特性。首先，PCR獲得該抗體的重鏈可變區(qū)，將該序列克隆至pET28a表達(dá)載體內(nèi)，在大腸桿
生物工程學(xué)報(bào) 2010年11期2010-10-11
- 半巢式PCR法構(gòu)建天然噬菌體單域重鏈抗體文庫
建天然噬菌體單域重鏈抗體文庫涂 追1,2，許 楊1,2,*，何慶華1,2，陶 勇2(1.南昌大學(xué) 食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西 南昌 330047；2.南昌大學(xué) 中德聯(lián)合研究院，江西 南昌 330047)目的：構(gòu)建天然噬菌體單域重鏈抗體文庫，淘選可應(yīng)用于食品安全檢測的單域重鏈抗體。方法：以未經(jīng)免疫的健康羊駝(Lama pacos)外周血為起始材料，提取RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，根據(jù)重鏈抗體保守序列設(shè)計(jì)引物，通過半巢式PCR法擴(kuò)增獲得全套重鏈抗體可變區(qū)編
食品科學(xué) 2010年19期2010-09-15
- 停止訓(xùn)練與肌球蛋白重鏈異形體轉(zhuǎn)變及其相關(guān)性能變化研究進(jìn)展
，肌球蛋白由兩個(gè)重鏈和兩個(gè)輕鏈構(gòu)成，肌球蛋白重鏈（myosin heavy chain，MHC）有多種異形體表達(dá)，決定著骨骼肌機(jī)械活動(dòng)的本質(zhì)。研究表明[12，38]，肌球蛋白重鏈異形體通常可區(qū)分為3或4種，即MHC-I、MHC-IIA和MHC-IIB 或 MHC-I、MHC-IIA、MHC-IIX 和 MHC-IIB。由于其組成與骨骼肌的收縮性能和肌球蛋白ATP酶活性密切相關(guān)，故探討肌球蛋白重鏈異形體的組成模式已成為反映肌纖維收縮功能的表型標(biāo)志。研究表明[
中國運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志 2010年2期2010-08-15
- 天然人源IgG Fab噬菌體抗體庫的構(gòu)建及多樣性分析①
是不同基因家族的重鏈V(variable)-D(Diversity)-J(joining)片段的重排與輕鏈V-J片段的重排及輕重鏈的不同組合?？贵w基因重排過程中隨機(jī)發(fā)生的體細(xì)胞突變又進(jìn)一步增加了抗體的多樣性?？贵w多樣性的分子發(fā)生機(jī)制為B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生無限多樣性的免疫球蛋白基因產(chǎn)物提供了理論解釋。最新數(shù)據(jù)庫資料顯示重鏈可變區(qū)基因(VH)可分成7個(gè)基因家族,VH1～VH7,其中每個(gè)基因家族之間的同源性可達(dá)80%以上[1]。一般認(rèn)為,在健康個(gè)體,VH基因的表達(dá)常取
中國免疫學(xué)雜志 2010年11期2010-07-30
- α-硫辛酸對肉仔雞肉品質(zhì)及肌纖維組織特性的影響
型檢測 肌球蛋白重鏈（MYHC）基因mRNA在胸、腿肌的相對表達(dá)參照測定方法參照李玥等（2006）、Tidyman 等（1997）、Schiaffino 和Reggiani（1994）。1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)差異顯著性采用GLM 進(jìn)行 t檢驗(yàn)（SAS V8）。2 結(jié)果與分析2.1 硫辛酸對AA肉仔雞生產(chǎn)性能的影響 硫辛酸對肉仔雞生產(chǎn)性能的影響見表2。由表2可知，日糧中添加硫辛酸對肉仔雞各階段料肉比無顯著影響（P>0.05）。與對照組相比，600 m
中國飼料 2010年16期2010-06-29
- 鐵蛋白與SPIO在磁共振細(xì)胞活體示蹤中的增效作用
2 構(gòu)建鼠鐵蛋白重鏈全基因質(zhì)粒應(yīng)用Trizol試劑(Invitrogen，美國)從小鼠肌肉組織提取總RNA。在Oligo(dT)引物作用下，利用逆轉(zhuǎn)錄試劑(Promega，美國)將mRNA逆轉(zhuǎn)成cDNA。根據(jù)鼠鐵蛋白重鏈基因序列(GenBank，序列號NM-010239)設(shè)計(jì)含有NotI 和BamHI限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)引物，PCR擴(kuò)增出鼠鐵蛋白重鏈全基因片段(Fth)。應(yīng)用NotI和BamHI(大連寶生物公司)對全基因片段和pcDN
磁共振成像 2010年4期2010-06-02
- 鰱魚骨骼肌輕酶解肌球蛋白基因的cDNA克隆
200 000的重鏈亞基和4個(gè)相對分子質(zhì)量約20 000的輕鏈亞基,每個(gè)重鏈的氨基端形成一個(gè)球狀的頭部(S1)和頸狀結(jié)構(gòu)(S2),余下的羧基端形成具α-螺旋結(jié)構(gòu)的被稱之為輕酶解肌球蛋白(light meromyosin,LMM)的尾部;兩對輕鏈分別非共價(jià)地結(jié)合在重鏈的頸部[1]。肌球蛋白分子的頭部具有ATPase的活性;而LMM具有使肌球蛋白在生理?xiàng)l件下形成絲狀的能力,它的結(jié)構(gòu)性質(zhì)在很大程度上決定了魚肌肉蛋白質(zhì)的凝膠形成特性[2]。自從1990年 Gerl
食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào) 2010年4期2010-03-15